论文部分内容阅读
摘要：目的 探讨血清TSGF、VEGF水平在消化系统恶性肿瘤诊治中的变化及意义。方法 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法和自动生化法检测84例消化系统恶性肿瘤患者血清TSGF和VEGF水平，比较手术前及手术后7 d、14 d、2 a患者TSGF和VEGF水平变化并与35例正常对照组及40例消化系统良性疾病患者进行比较分析。结果 84例消化系统恶性肿瘤患者血清TSGF、VEGF水平显著高于正常对照组及良性疾病组患者，差异有统计学意义（P <0.01）；血清VEGF在良性疾病组稍高于对照组，但差异无统计学意义（P >0.05），而良性疾病组的TSGF则明显高于对照组（P <0.05）；84例患者经手术治疗后第7 d、14 d，血清TSGF、VEGF水平呈明显下降趋势，均比治疗前明显下降（P <0.05、P <0.01）；有淋巴结转移组患者的TSGF、VEGF水平显著高于无复发组及对照组（P <0.01），无转移组与对照组比较无明显差异。结论 血清VEGF和TSGF水平检测有助于消化系统恶性肿瘤的临床诊断；监测消化系统恶性肿瘤患者手术前、后血清VEGF和TSGF水平变化，对疾病的疗效观察及预后判断有重要临床意义。
关键词：恶性肿瘤；血管内皮生长因子；肿瘤特异性生长因子；诊断；治疗
消化系统恶性肿瘤是我国最常见的恶性肿瘤，近年来其发病率持续升高，严重威胁人类身体健康及生活质量。早发现、早诊断、早治疗能显著提高恶性肿瘤患者的生存率。因此，有助于恶性肿瘤早期诊断的方法——血清肿瘤标志物（TM）检测显得尤为重要。在肿瘤形成早期，肿瘤的发生发展与血管生成备受关注。血管内皮生长因子（VEGF）是重要的血管生成正性调节因子；肿瘤特异性生长因子（TSGF）由肿瘤细胞特异产生，是恶性肿瘤及周边血管大量扩增的物质基础，两种TM与恶性肿瘤血管的形成密切相关[1、2]。本文主要通过检测消化系统恶性肿瘤患者治疗前、后血清TSGF及VEGF水平，探讨其在消化系统恶性肿瘤早期诊断、疗效观察及预后判断中的应用价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料
84例消化系统恶性肿瘤患者均为2012年5月至2013年12月在广东医学院附属湛江中心医院住院的患者（肝癌25例、胃癌21例、肠癌38例）。其中男46例，女38例，年龄33～71岁，平均年龄53岁；所有患者术前均未进行放疗或化疗，均排除合并有其他疾病，所有患者均经手术和病理确诊。选择经临床及病理确认的消化系统疾病（胃肠道炎症、溃疡、息肉等）患者40例作为良性疾病组，另以35名健康体检者为对照组。各组患者年龄、性别差异均无统计学意义（P >0.05），具有可比性。
1.2 检测方法
消化系统恶性肿瘤患者手术前5d、手术后第7、14 d各采集静脉血3 ml，良性疾病组及对照组患者只采集1次空腹静脉血3 ml，所有标本均放置在无抗凝剂的一次性干燥试管，室温静置30 min，离心半径10cm，3000r/min 离心10 min，分离吸出血清1000 ul，放置在-20.C冰箱保存备用。所有标本均检测TSGF及VEGF。采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法检测VEGF（试剂盒购自深圳晶美生物工程公司），检测步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。按说明书在贝克曼DXC800全自动生化分析仪上设置工作参数、进行定标及测定TSGF。
1.3 统计学方法
采用SPSS13.0统计软件分析数据，计量资料用 表示，采用t检验，组间比较采用方差分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 消化系统恶性肿瘤与良性疾病及对照组患者血清TSGF、VEGF水平比较
84例初治消化系统恶性肿瘤患者血清TSGF、VEGF水平显著高于正常对照组及良性疾病组患者，差异有统计学意义（P <0.01）；良性疾病组患者血清TSGF、VEGF水平与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。
2.2 恶性肿瘤患者治疗前后血清TSGF、VEGF水平变化
84例消化系统恶性肿瘤患者经手术治疗7天后，血清TSGF、VEGF水平均比治疗前明显下降（P <0.05）。治疗14天后，患者血清TSGF、VEGF水平均比治疗前显著下降（P <0.01）。
2.3 有转移组与无转移组患者血清TSGF、VEGF水平变化
手术治疗1年后，经跟踪观察84例消化系统恶性肿瘤患者发现，68例无转移组患者的TSGF、VEGF水平（53.52±6.87、161.9±77.6）与正常对照组比较无明显差异；而11例有转移组患者的TSGF、VEGF水平（83.79±15.24、380.6±151.5）显著升高，明显高于无转移组及对照组，差异有统计学意义（P <0.01）。
3 结论
近年来我国大肠癌、结肠癌、肝癌和胰腺癌等消化系统恶性肿瘤在人群中发病呈上升趋势，消化系统恶性肿瘤占所有肿瘤发病的60%-70%，位居第一[3]，在死亡率也“名列前茅”，且呈年轻化趋势，严重危害着人们的生命和健康。以手术为主的综合治疗是消化系统肿瘤首选的治疗手段。早期发現、早期诊断，才能实现早期治疗，提高患者的生存质量。当前的影像学、病理学等检测方法确诊往往已在肿瘤的中晚期，血清生物学及免疫学方法检测肿瘤标志物（TM）已成为消化系统恶性肿瘤早期诊断的重要手段。由此可见，如能寻找到消化系统恶性肿瘤出现早期已敏感且在治疗过程中有明显变化的血清TM指标，对临床诊治疾病相当重要。
VEGF又称血管通透因子，是目前作用最强的促进血管内皮生长的细胞因子。VEGF能够刺激体外培养的血管内皮细胞发生有丝分裂和迁移，促进血管的构建及生长，也可诱导血管通透增加，导致血管内大分子物质的漏出，有利于血管外基质的形成，为血管内皮细胞的增殖，血管的形成提供支架，辅助血管的形成。在肿瘤细胞生长的前血管期，肿瘤细胞主要依靠弥散供应养分及排泄废物，虽然肿瘤细胞迅速增殖，但增殖与凋亡处于动态平衡；当肿瘤细胞转变成血管生成表型，凋亡明显减少，此时血清VEGF与血管内皮细胞特异性结合，刺激血管内皮细胞增殖，诱导血管新生并维持肿瘤生长。肿瘤发生后，为满足其生长需要，肿瘤细胞分泌大量VEGF并释放到血液循环，导致血清中VEGF水平升高[4]。本研究结果显示，消化系统恶性肿瘤患者的VEGF水平显著高于正常对照组及良性疾病组患者，差异有统计学意义（P <0.01），而良性疾病组患者血清TSGF、VEGF水平与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。这可能与肿瘤细胞分泌的VEGF穿过血管壁或使血管壁通透性增加有关。手术为主的治疗是消化系统恶性肿瘤首选的治疗手段，马利安[5]通过手术治疗XX例结肠癌患者发现，术后一周患者的血清VEGF比术前明显降低，提示去除癌细胞后，VEGF含量降低，对临床评估患者病情有一定价值。本资料结果显示，84例消化系统恶性肿瘤患者术后7天、14天的VEGF水平比术前明显下降（P <0.05，P <0.01）；随访观察2年后，11例淋巴结转移患者的VEGF水平比73例无淋巴结转移患者显著升高（P <0.01）。表明检测血清VEGF水平对消化系统恶性肿瘤患者的诊断及鉴别诊断、疗效观察和判断预后均有重要临床意义。 TSGF是国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物（脂蛋白、酶、氨基酸）的统称，是恶性肿瘤细胞及周边毛细血管大量扩增的物质基础，又称肿瘤相关物质群。TSGF 的发现为恶性肿瘤的诊断与治疗开拓了新的应用领域，它的广谱性、早期性与目前其它 TM相比显示出一定的优越性[6]，与其他常见的TM不同的是，TSGF的检测物在肿瘤形成的早期浓度就已经很高，且随着病情变化出现明显的升高或降低[7]。向礼贤等研究[8]表明，手术前、后动态监测上皮性卵巢癌患者血清TSGF的变化情况，有助于判断疗效，监测复发或转移。李小明等[9]报道，TSGF在甲状腺癌患者血清中表达增高，在甲状腺癌发生、发展中具有重要作用，检测血清TSGF对早期诊断及指导治疗有一定的价值。我们的研究结果显示，84例消化系统恶性肿瘤（肝癌25例、胃癌21例、肠癌38例）患者血清TSGF水平明显高于良性疾病组和正常对照组（P <0.01）；良性疾病组也明显高于正常对照组（P <0.05）；各恶性肿瘤组间差别均无统计学意义（P >0.05）。但一般疾病组患者经抗炎治疗后TSGF水平很快下降至接近健康者水平。可见，TSGF并非恶性肿瘤所特有，在健康人群和某些良性疾病体内也有一过性升高，提示血清TSGF检测有助于消化系统恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。本资料还显示，84例患者经手术治疗7天、14天后，血清TSGF呈下降趋势，与治疗前比较明显降低（P <0.05、P <0.01），表明血清TSGF水平的检测对消化系统肿瘤患者的疗效观察有重要临床意义；随访观察两年后发现，有淋巴结转移的11例患者血清TSGF水平明显高于73例无转移者（P <0.01），无转移者与正常对照比较则无明显差别。表明 TSGF与消化系统恶性肿瘤病情程度明显正相关，在某种程度上可以预测病情恶化程度，提示血清TSGF升高是恶性肿瘤获得高侵袭能力的重要因素。
综上所述，VEGF作为促血管内皮细胞增殖、促血管生长及增加血管通透性的主要因子，而TSGF是恶性肿瘤形成和生长时促使肿瘤及周边毛细胞血管大量增殖并释放到外周血液的一类因子，两者在消化系统恶性肿瘤的发生、发展及转移过程中均起着重要作用。监测患者手术前后血清VEGF及TSGF水平变化对消化系统恶性肿瘤的临床诊断、疗效观察及预后判断有重要临床应用价值。
参考文献：
[1]潘宇祥，周黎明.血管内皮生长因子与肿瘤转移的研究進展[J].四川生理科学杂志，2013，35（2）：83-85.
[2]高光琦，陆云，李鼎，等.恶性肿瘤特异性生长因子在体检与肿瘤病人中的对比分析[J].标记免疫分析与临床，2014，21（3）：349-350.
[3]邹丽芳，姚一芸，窦红菊，等.消化系统恶性肿瘤复发转移患者止凝血功能的研究[J].血栓与止血学，2011，17（5）：214-218.
[4]张家明，许景宁，李艳，等.血清血管内皮生长因子水平检测在结肠癌临床诊疗中的价值[J].肿瘤研究与临床，2013，25（4）：230-233.
[5]马利安.结直肠癌患者手术前后血清MMP-2和VEGF检测的临床意义[J].河北医科大学学报，2010，31（5）：523-525.
[6]关若萍，戴国奎，范元志.肿瘤相关物质群辅助诊断恶性肿瘤的意义[J].南方医科大学学报，2009，29（7）：1454-1456.
[7]Yu B，Xu PZ，Wang QW，et al.Clinical value of tumour specific growth factor（TSGF）and carbohydrate antigen-125（CA-125）in carcinoma of the endometrium.[J].J Int Med Res，2009，37（3）：878-883.
[8]向礼贤，陈刚，朱华强，等.卵巢癌患者术后早期血清CA125、CEA和TSGF的动态监测[J].海南医学院学报，2012，18（2）：223-226.
[9]李小民 黄作良 付祥芳，等.甲状腺癌患者血清中TSGF和VEGF联合检测的临床价值[J].医学综述，2012，18（12）：3850-3851.
基金项目：广东省湛江市科技攻关计划项目（编号：2012C3104048）
第一作者简介：张家明（1974-），男，汉族，广东湛江人，本科毕业，学士，副主任技师，主要从事临床医学检验工作及研究。
通迅作者：韩日成（1975-），女，本科 副主任技师
关键词：恶性肿瘤；血管内皮生长因子；肿瘤特异性生长因子；诊断；治疗
消化系统恶性肿瘤是我国最常见的恶性肿瘤，近年来其发病率持续升高，严重威胁人类身体健康及生活质量。早发现、早诊断、早治疗能显著提高恶性肿瘤患者的生存率。因此，有助于恶性肿瘤早期诊断的方法——血清肿瘤标志物（TM）检测显得尤为重要。在肿瘤形成早期，肿瘤的发生发展与血管生成备受关注。血管内皮生长因子（VEGF）是重要的血管生成正性调节因子；肿瘤特异性生长因子（TSGF）由肿瘤细胞特异产生，是恶性肿瘤及周边血管大量扩增的物质基础，两种TM与恶性肿瘤血管的形成密切相关[1、2]。本文主要通过检测消化系统恶性肿瘤患者治疗前、后血清TSGF及VEGF水平，探讨其在消化系统恶性肿瘤早期诊断、疗效观察及预后判断中的应用价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料
84例消化系统恶性肿瘤患者均为2012年5月至2013年12月在广东医学院附属湛江中心医院住院的患者（肝癌25例、胃癌21例、肠癌38例）。其中男46例，女38例，年龄33～71岁，平均年龄53岁；所有患者术前均未进行放疗或化疗，均排除合并有其他疾病，所有患者均经手术和病理确诊。选择经临床及病理确认的消化系统疾病（胃肠道炎症、溃疡、息肉等）患者40例作为良性疾病组，另以35名健康体检者为对照组。各组患者年龄、性别差异均无统计学意义（P >0.05），具有可比性。
1.2 检测方法
消化系统恶性肿瘤患者手术前5d、手术后第7、14 d各采集静脉血3 ml，良性疾病组及对照组患者只采集1次空腹静脉血3 ml，所有标本均放置在无抗凝剂的一次性干燥试管，室温静置30 min，离心半径10cm，3000r/min 离心10 min，分离吸出血清1000 ul，放置在-20.C冰箱保存备用。所有标本均检测TSGF及VEGF。采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法检测VEGF（试剂盒购自深圳晶美生物工程公司），检测步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。按说明书在贝克曼DXC800全自动生化分析仪上设置工作参数、进行定标及测定TSGF。
1.3 统计学方法
采用SPSS13.0统计软件分析数据，计量资料用 表示，采用t检验，组间比较采用方差分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 消化系统恶性肿瘤与良性疾病及对照组患者血清TSGF、VEGF水平比较
84例初治消化系统恶性肿瘤患者血清TSGF、VEGF水平显著高于正常对照组及良性疾病组患者，差异有统计学意义（P <0.01）；良性疾病组患者血清TSGF、VEGF水平与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。
2.2 恶性肿瘤患者治疗前后血清TSGF、VEGF水平变化
84例消化系统恶性肿瘤患者经手术治疗7天后，血清TSGF、VEGF水平均比治疗前明显下降（P <0.05）。治疗14天后，患者血清TSGF、VEGF水平均比治疗前显著下降（P <0.01）。
2.3 有转移组与无转移组患者血清TSGF、VEGF水平变化
手术治疗1年后，经跟踪观察84例消化系统恶性肿瘤患者发现，68例无转移组患者的TSGF、VEGF水平（53.52±6.87、161.9±77.6）与正常对照组比较无明显差异；而11例有转移组患者的TSGF、VEGF水平（83.79±15.24、380.6±151.5）显著升高，明显高于无转移组及对照组，差异有统计学意义（P <0.01）。
3 结论
近年来我国大肠癌、结肠癌、肝癌和胰腺癌等消化系统恶性肿瘤在人群中发病呈上升趋势，消化系统恶性肿瘤占所有肿瘤发病的60%-70%，位居第一[3]，在死亡率也“名列前茅”，且呈年轻化趋势，严重危害着人们的生命和健康。以手术为主的综合治疗是消化系统肿瘤首选的治疗手段。早期发現、早期诊断，才能实现早期治疗，提高患者的生存质量。当前的影像学、病理学等检测方法确诊往往已在肿瘤的中晚期，血清生物学及免疫学方法检测肿瘤标志物（TM）已成为消化系统恶性肿瘤早期诊断的重要手段。由此可见，如能寻找到消化系统恶性肿瘤出现早期已敏感且在治疗过程中有明显变化的血清TM指标，对临床诊治疾病相当重要。
VEGF又称血管通透因子，是目前作用最强的促进血管内皮生长的细胞因子。VEGF能够刺激体外培养的血管内皮细胞发生有丝分裂和迁移，促进血管的构建及生长，也可诱导血管通透增加，导致血管内大分子物质的漏出，有利于血管外基质的形成，为血管内皮细胞的增殖，血管的形成提供支架，辅助血管的形成。在肿瘤细胞生长的前血管期，肿瘤细胞主要依靠弥散供应养分及排泄废物，虽然肿瘤细胞迅速增殖，但增殖与凋亡处于动态平衡；当肿瘤细胞转变成血管生成表型，凋亡明显减少，此时血清VEGF与血管内皮细胞特异性结合，刺激血管内皮细胞增殖，诱导血管新生并维持肿瘤生长。肿瘤发生后，为满足其生长需要，肿瘤细胞分泌大量VEGF并释放到血液循环，导致血清中VEGF水平升高[4]。本研究结果显示，消化系统恶性肿瘤患者的VEGF水平显著高于正常对照组及良性疾病组患者，差异有统计学意义（P <0.01），而良性疾病组患者血清TSGF、VEGF水平与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。这可能与肿瘤细胞分泌的VEGF穿过血管壁或使血管壁通透性增加有关。手术为主的治疗是消化系统恶性肿瘤首选的治疗手段，马利安[5]通过手术治疗XX例结肠癌患者发现，术后一周患者的血清VEGF比术前明显降低，提示去除癌细胞后，VEGF含量降低，对临床评估患者病情有一定价值。本资料结果显示，84例消化系统恶性肿瘤患者术后7天、14天的VEGF水平比术前明显下降（P <0.05，P <0.01）；随访观察2年后，11例淋巴结转移患者的VEGF水平比73例无淋巴结转移患者显著升高（P <0.01）。表明检测血清VEGF水平对消化系统恶性肿瘤患者的诊断及鉴别诊断、疗效观察和判断预后均有重要临床意义。 TSGF是国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物（脂蛋白、酶、氨基酸）的统称，是恶性肿瘤细胞及周边毛细血管大量扩增的物质基础，又称肿瘤相关物质群。TSGF 的发现为恶性肿瘤的诊断与治疗开拓了新的应用领域，它的广谱性、早期性与目前其它 TM相比显示出一定的优越性[6]，与其他常见的TM不同的是，TSGF的检测物在肿瘤形成的早期浓度就已经很高，且随着病情变化出现明显的升高或降低[7]。向礼贤等研究[8]表明，手术前、后动态监测上皮性卵巢癌患者血清TSGF的变化情况，有助于判断疗效，监测复发或转移。李小明等[9]报道，TSGF在甲状腺癌患者血清中表达增高，在甲状腺癌发生、发展中具有重要作用，检测血清TSGF对早期诊断及指导治疗有一定的价值。我们的研究结果显示，84例消化系统恶性肿瘤（肝癌25例、胃癌21例、肠癌38例）患者血清TSGF水平明显高于良性疾病组和正常对照组（P <0.01）；良性疾病组也明显高于正常对照组（P <0.05）；各恶性肿瘤组间差别均无统计学意义（P >0.05）。但一般疾病组患者经抗炎治疗后TSGF水平很快下降至接近健康者水平。可见，TSGF并非恶性肿瘤所特有，在健康人群和某些良性疾病体内也有一过性升高，提示血清TSGF检测有助于消化系统恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。本资料还显示，84例患者经手术治疗7天、14天后，血清TSGF呈下降趋势，与治疗前比较明显降低（P <0.05、P <0.01），表明血清TSGF水平的检测对消化系统肿瘤患者的疗效观察有重要临床意义；随访观察两年后发现，有淋巴结转移的11例患者血清TSGF水平明显高于73例无转移者（P <0.01），无转移者与正常对照比较则无明显差别。表明 TSGF与消化系统恶性肿瘤病情程度明显正相关，在某种程度上可以预测病情恶化程度，提示血清TSGF升高是恶性肿瘤获得高侵袭能力的重要因素。
综上所述，VEGF作为促血管内皮细胞增殖、促血管生长及增加血管通透性的主要因子，而TSGF是恶性肿瘤形成和生长时促使肿瘤及周边毛细胞血管大量增殖并释放到外周血液的一类因子，两者在消化系统恶性肿瘤的发生、发展及转移过程中均起着重要作用。监测患者手术前后血清VEGF及TSGF水平变化对消化系统恶性肿瘤的临床诊断、疗效观察及预后判断有重要临床应用价值。
参考文献：
[1]潘宇祥，周黎明.血管内皮生长因子与肿瘤转移的研究進展[J].四川生理科学杂志，2013，35（2）：83-85.
[2]高光琦，陆云，李鼎，等.恶性肿瘤特异性生长因子在体检与肿瘤病人中的对比分析[J].标记免疫分析与临床，2014，21（3）：349-350.
[3]邹丽芳，姚一芸，窦红菊，等.消化系统恶性肿瘤复发转移患者止凝血功能的研究[J].血栓与止血学，2011，17（5）：214-218.
[4]张家明，许景宁，李艳，等.血清血管内皮生长因子水平检测在结肠癌临床诊疗中的价值[J].肿瘤研究与临床，2013，25（4）：230-233.
[5]马利安.结直肠癌患者手术前后血清MMP-2和VEGF检测的临床意义[J].河北医科大学学报，2010，31（5）：523-525.
[6]关若萍，戴国奎，范元志.肿瘤相关物质群辅助诊断恶性肿瘤的意义[J].南方医科大学学报，2009，29（7）：1454-1456.
[7]Yu B，Xu PZ，Wang QW，et al.Clinical value of tumour specific growth factor（TSGF）and carbohydrate antigen-125（CA-125）in carcinoma of the endometrium.[J].J Int Med Res，2009，37（3）：878-883.
[8]向礼贤，陈刚，朱华强，等.卵巢癌患者术后早期血清CA125、CEA和TSGF的动态监测[J].海南医学院学报，2012，18（2）：223-226.
[9]李小民 黄作良 付祥芳，等.甲状腺癌患者血清中TSGF和VEGF联合检测的临床价值[J].医学综述，2012，18（12）：3850-3851.
基金项目：广东省湛江市科技攻关计划项目（编号：2012C3104048）
第一作者简介：张家明（1974-），男，汉族，广东湛江人，本科毕业，学士，副主任技师，主要从事临床医学检验工作及研究。
通迅作者：韩日成（1975-），女，本科 副主任技师