蛋白激酶B(PKB/Akt)活性抑制在酒精性脂肪肝发病中的作用

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangjie198811
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  [目的]蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)在肝脏脂肪代谢调控中起着重要作用,但其在酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver,AFL)发病中的作用未知。本研究拟探讨Akt在慢性AFL发病中的作用及可能机制。[材料和方法]SPF级雄性ICR小鼠(22-24 g)随机分为对照组和AFL模型组,分别给予不含酒精和含5%酒精(w/v)的Lieber-DeCarli液体饲料喂饲4周;每周末随机选择5只小鼠处死,生化法测定肝脏甘油三酯(triglyceride,TG)含量,制备冰冻切片脂肪染色观察肝脏脂肪蓄积,western blotting测定肝脏Akt及其活性形式p-Aktser473和p-Aktthr308的蛋白水平。另取雄性ICR小鼠,随机分为对照组、AFL模型组、Akt激活剂人胰岛素样生长因子(insulin growth factor-1,IGF-1)干预组和细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1,CYP2E1)特异性抑制剂氯美噻唑(clomethiazole,CMZ)干预组,分别给予对照饲料和含5%酒精(w/v)的液体饲料4周;测定肝脏脂肪含量和Akt及其活性形式的蛋白水平。细胞实验以不表达CYP2E1的HepG2细胞为研究对象,给予脂质过氧化活性产物4-羟基壬希酸(4-HNE)干预,测定细胞中Akt及其活性形式的蛋白水平。
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