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[目的]顺铂(cDDP)作为治疗晚期原发性肝细胞癌(HCC)的关键抗肿瘤药,可诱导肿瘤细胞周期阻滞而抑制增殖,但不同人群对cDDP的敏感性差异一定程度上限制了治疗有效性.蛋白磷酸酶2A(PP2A)是真核细胞中广泛表达的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶家族成员之一,参与细胞周期、增殖与分化、信号转导等过程的调控；其中PP2A-B55δ亚基(由PPP2R2D基因编码)通过对细胞周期因子依赖性激酶1(CDK1)的磷酸化平衡作用,调控细胞周期有丝分裂的进入和退出.但是,B55δ是否能经由靶向调控细胞周期因子的进程介导cDDP对HCC细胞转归尚不明确.因此,本研究旨在探讨PP2A-B55δ表达对cDDP诱导HCC细胞周期改变和抗肿瘤敏感性的影响,为肝致癌作用的化学预防提供依据.[材料和方法]选择人肝癌HepG2细胞,采用逆转录病毒载体(pBabe)构建PPP2R2D基因高表达HepG2-2R2Dc细胞,以HepG2-pBabe细胞为对照；采用慢病毒载体(pLKO.1)构建PPP2R2D基因敲低表达的HepG2-sh2R2D细胞,以HepG2-shGFP细胞为对照.采用cDDP作为受试物,按前期建立模型的剂量(2.5μg/ml),根据实验要求给予所构建细胞株不同时间的处理.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测目的基因mRNA水平；免疫印迹(WB)检测蛋白表达水平；丝氨酸/苏氨酸磷酸酶检测试剂盒测定PP2A酶活性；噻唑蓝(MTT)颜色反应法检测细胞增殖能力；克隆形成实验评价细胞自我更新能力；流式细胞术分析细胞周期时相分布.[结果]本研究发现：(1)所构建四株细胞与HepG2细胞之间未见明显形态学差异；与各自对照细胞相比,HepG2-2R2Dc细胞PPP2R2DmRNA和B55δ蛋白水平显著增高(p＜0.01),HepG2-sh2R2D细胞显著降低(p＜0.01),而PP2A其他亚基(-A,-C,-Bα,-B56γ)表达水平变化均不显著(p＞0.05),证实细胞株构建成功.(2) cDDP处理后,相比HepG2-pBabe细胞,HepG2-2R2Dc细胞中PP2A酶活性、B55δ蛋白水平显著增高(p＜0.01),G2/M期细胞周期因子Cyclin B1及其依赖性激酶CDK1蛋白表达水平显著降低(p＜0.01),细胞周期G2/M期百分比、克隆形成率均显著降低(p＜0.01),生长抑制率显著提高(p＜0.01).(3)与HepG2-shGFP细胞相比,cDDP处理组HepG2-sh2R2D细胞中PP2A酶活性、B55δ蛋白水平显著降低(p＜0.01),Cyclin B1及CDK1蛋白表达水平显著增高(p＜0.01),细胞周期阻滞、克隆形成能力、生长抑制情况得以恢复(P＜0.01).[结论]PP2A-B55δ经由对CDK1磷酸化平衡的作用,参与调控cDDP诱导的细胞周期阻滞,影响细胞增殖和自我更新能力,提高对肝癌细胞的抗肿瘤敏感性.