介孔二氧化硅SBA-15致HUVEC毒性及对细胞黏附因子表达的影响研究

• 作 者: 牛照地;朱玲勤;刘贺荣;卜德云;段红菊;田大年;杨惠芳;
• 机 构: 宁夏医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系,银川
• 出 处: 中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
• 发表日期: 2015年期

　　[目的]探索介孔二氧化硅纳米颗粒((Mesoporous silica nanoparticles,MSN) SBA-15对人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的毒性效应及其机制,以期为MSN作为药物载体的安全使用提供理论依据.[方法]将HUVEC暴露于终浓度分别为0(空白对照)、25、50、100、200 μg/ml SBA-15和100 μg/ml微米二氧化硅(阳性对照)的RPMI1640培养液中培养24h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定SBA-15对HUVEC增殖的抑制作用,异硫氰酸荧光素FITC标记膜联蛋白Annexin V和核酸染料碘化丙啶(PI)双染结合流式细胞术检测SBA-15对HUVEC细胞凋亡的影响；二氯荧光乙酰乙酸盐(DCFH-DA)探针结合激光共聚焦显微镜技术检测SBA-15作用下HUVEC细胞活性氧(ROS)水平的变化,实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测SBA-15对炎症因子CRP和MCP-1和细胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达水平的影响,Western Blot技术检测细胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1蛋白表达水平的变化.[结果]与空白对照组比较,各浓度SBA-15均对HUVEC的增殖具有抑制作用,且随着SBA-15染毒浓度的升高,细胞生存率下降,差异有统计学意义(p＜0.05)；与空白对照组比较,50、100和200 μg/ml SBA-15染毒组HUVEC细胞凋亡率增高,差异有统计学意义(p＜0.05)；随着SBA-15染毒浓度的升高,细胞ROS水平升高；与空白对照组相比,SBA-15染毒组炎症因子CRP和MCP-1 mRNA和细胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白的表达水平均升高,差异有统计学意义(p＜0.05),且随着SBA-15染毒浓度的升高,表达水平均呈上升趋势.[结论]SBA-15具有内皮细胞毒性作用,可抑制HUVEC的增殖；细胞凋亡和细胞坏死是SBA-15致HUVEC死亡的两种并存方式；SBA-15可能导致动脉粥样硬化疾病的发生；氧化应激和炎症可能是SBA-15致HUVEC细胞毒性的重要机制.