纳米SiO2暴露对人支气管上皮细胞microRNA表达水平的影响

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flexrhythm
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  [目的]探讨短期及长期纳米SiO2 (nano-SiO2)暴露对人支气管上皮细胞(16HBE)中microRNA(miRNA)表达水平的影响.[方法]长期暴露是指以10 μg/mL nano-SiO2每代处理16HBE细胞,分别处理10代和30代,记为P10和P30组,并设立对照组(P0组);短期染毒以终浓度0、5、10、20 μg/mL nano-SiO2和20μg/mL微米级SiO2 (μm-SiO2)暴露人支气管上皮细胞24h为对照组、低、中、高染毒组和微米级染毒组.用agilent miRNA微阵列芯片筛选P0、P10、P30组细胞差异表达的miRNA,并用逆转录荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法验证短期及长期染毒组与对照组差异表达的miRNA. [结果]获得P0、P10、P30组细胞2007个miRNA的表达谱,与P0组相比,P10、P30表达逐渐上调的miRNA为25个,逐渐下调的为3个.选取表达差异明显的miR-494-3p、miR-19a-3p、miR-148b-3p进行qRT-PCR验证.与P0组相比,P10、P30的miRNA-494-3p表达水平逐渐下降(F=60.77,p<0.05),分别为0.45±0.08、0.28±0.07; miRNA-19a-3p表达水平分别为2.27±0.45、1.06±0.19 (F=30.23,p<0.05);miRNA-148b-3p的表达水平分别为1.78±0.29、0.88±0.19(F=30.05,p<0.05).与对照组相比,5、10、20μg/mL nano-SiO2及20μg/mL μm-SiO2染毒组的miRNA-494-3p表达水平分别为0.99±0.04、1.38±0.19、2.13±0.14、0.81±0.25(F=57.03,p<0.05);miRNA-19a-3p的表达水平分别为0.91±0.03、1.12±0.03、0.53±0.01、0.86±0.01 (F=408.78,p<0.05);miRNA-148b-3p的表达水平分别为0.95±0.02、1.22±0.00、0.54±0.02、1.15±0.04 (F=264.14,p<0.05).[结论]纳米SiO2短期及长期染毒可诱导16HBE细胞miRNA表达水平的变化.其中,miRNA-494-3p的qRT-PCR验证结果和芯片结果一致,但长期和短期染毒对其表达水平的影响不同,这可能与miRNA-494-3p在nano-SiO2致细胞急性损伤和慢性损伤中发挥着不同的作用有关.
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