SWCNT-PEG-DA缓解6-OHDA对PC12的毒性作用

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangdinghui
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  [目的]以聚乙二醇(PEG)修饰的单壁碳纳米管(SWCNT)对PC12细胞毒性进行评估,研究PEG修饰的SWCNT作为药载加载多巴胺(DA)减轻6-羟基多巴胺(6-OHDA)对PC12毒性作用以及阻断剂H89对此过程的影响.[材料和方法]以PC12为研究对象,将SWCNT-PEG分为6个浓度(0、1、5、10、20、50 μg/mL),采用MTT法检测不同浓度的SWCNT-PEG对PC12的细胞活力的影响,然后将SWCNT-PEG分为4个浓度(0、6.25、12.5、25 μg/mL),采用CCK-8法检测不同浓度的SWCNT-PEG对PC12的细胞活力的影响;再将不同浓度多巴胺(5、10、20、40μM)加载到6.25 μg/mL的SWCNT-PEG上,实验分为6组(6-OHDA(100 μM)、6-OHDA和SWCNT-PEG-DA(DA 5 μM)、6-OHDA和SWCNT-PEG-DA(DA 10 μM)、6-OHDA和SWCNT-PEG-DA(DA 20 μM)、6-OHDA和SWCNT-PEG-DA(DA 40 μM)、对照组),采用CCK-8、LDH、ROS方法检测不同浓度SWCNT-PEG-DA对6-OHDA诱导的PC12的细胞活力和氧化损伤的影响;最后将实验分为 4组(6-OHDA (100μM)、6-OHDA*SWCNT-PEG-DA(DA 20 μM)+H89(10 μM)、6-OHDA+SWCNT-PEG-DA(DA 20μM)、对照组),采用CCK-8、LDH、ROS方法检测阻断剂H89对SWCNT-PEG-DA对6-OHDA诱导PC12的细胞活力和氧化损伤的影响. [结果]MTT实验表明SWCNT-PEG在10μg/mL开始降低细胞活力,出现显著性,在20、40 μg/mL时出现极显著性,CCK-8实验发现SWCNT-PEG在12.5 μg/mL开始降低细胞活力,出现显著性,在25 μg/mL时出现极显著性;CCK-8、LDH、ROS实验表明6-OHDA和对照组相比,降低了细胞活力,增加了氧化损伤,出现了极显著性;6-OHDA和SWCNT-PEG-DA(DA 20 μM)与6-OHDA(100 μM)相比,增加细胞活力,降低了细胞氧化损伤,出现了极显著性.CCK-8、LDH、ROS实验表明6-OHDA+SWCNT-PEG-多巴胺(多巴胺20 μM)+H89(10 μM)和6-OHDA+SWCNT-PEG-多巴胺(多巴胺20μM)相比,降低了细胞活力,增加氧化损伤,出现极显著性.[结论]PEG修饰的单壁碳纳米管对PC12毒性的安全浓度应低于6.25 μg/mL;浓度为20μM的DA加载到SWCNT上可以缓解6-OHDA对PC12的毒性的作用;且使用H89可有效阻断上述过程,进一步提示通过应用PEG-SWCNT-DA可对PC12细胞起到保护作用,免受6-OHDA产生的毒性作用.因此可以证明适当浓度且修饰有PEG的SWCNT可将DA运载到靶标部位且缓解6-OHDA的毒性作用.
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