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目的：
分析由曲霉菌引起的真菌性鼻-鼻窦炎的病原学和流行病学特征,为研究其致病机制提供理论依据。
方法：
(1)收集首都医科大学附属北京同仁医院2007年7月至2011年3月,分离自真菌性鼻-鼻窦炎标本曲霉菌178株,分别用形态学和基因序列分析方法进行鉴定。基因序列分析方法包括转录间隔区(the internal transcribed space region,ITS)和β-微管蛋白基因片段。
(2)根据美国临床与实验室标准化委员会M38-A2所述方法对178株曲霉菌进行抗真菌药物敏感性试验,选用的抗真菌药物为两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ITZ)、伏立康唑(VRZ)和卡泊芬净(CAS)。
(3)查阅病例,记录病人的性别、年龄、基础疾病、居住地和职业,分析曲霉菌性鼻-鼻窦炎患者特征。
结果：
(1)形态学鉴定出7个种,黄曲霉占44.4％(79/178),烟曲霉占33.1％,杂色曲霉占13.5％(59/178),构巢曲霉占5.6％(10/178),土曲霉占1.7％(3/178),黑曲霉占1.1％(2/178),米曲霉占0.6％(1/178)。ITS基因序列分析鉴定出8个种,β-微管蛋白基因序列分析鉴定出10个种。1株菌株形态学鉴定为黄曲霉,ITS序列分析和β-微管蛋白基因序列分析鉴定为寄生曲霉。5.1％(3/59)烟曲霉经β-微管蛋白基因序列分析鉴定为仑图卢斯曲霉。形态学鉴定为杂色曲霉的24株曲霉菌中,70.8％(17/24)经ITS序列分析鉴定为杂色曲霉,29.2％(7/24)β-微管蛋白基因序列分析鉴定为聚多曲霉,但ITS序列分析未鉴定到种,其余17株与ITS序列分析和形态学鉴定一致。其他曲霉菌的形态学、ITS序列分析和β-微管蛋白基因序列分析鉴定结果一致。
(2)178株曲霉菌对AMB最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为0.06-4μg/ml,对ITZ的MIC为0.03-2μg/ml,对VRZ的MIC为0.12μg/ml,对CAS最小有效浓度(minimum effective concentration,MEC)为0.015-0.251μg/l。其中,1株黄曲霉对伏立康唑的MIC为2μg/l,1株黄曲霉对伊曲康唑的MIC为2μg/ml,2株黄曲霉对两性霉素B的MIC≥2μg/ml。
(3)患者平均年龄为50岁,女性占59％。无基础疾病或局部解剖结构异常的人群占47％,鼻中隔偏曲占36.1％。患者多居住于北京及其邻近的北方城市。
结论：
(1)曲霉菌性鼻-鼻窦炎的病原菌以黄曲霉为主。
(2)在曲霉菌的鉴定方面,β-微管蛋白基因序列分析比ITS基因序列分析和形态学更为准确。
(3)曲霉菌性鼻-鼻窦炎患者主要以无基础疾病或局部结构异常的人群为主,女性中老年多见,以非侵袭性真菌球和变应性真菌性鼻-鼻窦炎为主。
创新点：建立病原微生物传统方法与核酸分析相结合的检测流程。