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第一部分成血管细胞对视网膜血管损伤的修复作用
第一节成血管细胞对视网膜血管形态结构损伤的修复作用
目的:探讨成血管细胞对视网膜血管形态结构损伤的修复作用。
方法:利用高压氧诱导新生C57BI/6J乳鼠建立氧诱导视网膜病变模型,链脲佐菌素腹腔注射诱导Wistar大鼠早期糖尿病视网膜病变模型；将成血管细胞进行玻璃体腔移植；移植后进行视网膜铺片、血管isolectine染色、photoshop软件量化视网膜无灌注区和新生血管面积观测视网膜血管损伤修复情况；视网膜铺片和组织冰冻切片CD31、Nuclear Matrix Protein抗体染色检测移植成血管细胞迁移和分化情况。
结果:氧诱导视网膜病变模型中,移植成血管细胞组与对照组移植内皮细胞和PBS组比较,视网膜无灌注区和新生血管面积均明显减少,差异具有统计学意义(P<0.001)。氧诱导视网膜病变模型和早期糖尿病视网膜病变模型中,移植的成血管细胞均迁移到视网膜血管处、整合入血管组织中,CD31抗体染色均阳性。
结论:成血管细胞可帮助修复氧诱导视网膜病变模型和早期糖尿病视网膜病变模型中视网膜血管形态结构的损伤。
第二节成血管细胞对视网膜血管功能损伤的修复作用
目的:探讨成血管细胞对视网膜血管功能损伤的修复作用。
方法:利用高压氧诱导新生C57BL/6J乳鼠建立氧诱导视网膜病变模型,链脲佐菌素腹腔注射诱导Wistar大鼠早期糖尿病视网膜病变模型；将成血管细胞进行玻璃体腔移植；检测氧诱导视网膜病变模型中血管管腔通畅性和早期糖尿病视网膜病变模型中血视网膜屏障功能以评价视网膜血管功能损伤修复情况。
结果:氧诱导视网膜病变模型中,成血管细胞可帮助形成管腔通畅的血管；大鼠糖尿病诱发成功6周后,血视网膜屏障明显损伤,此时进行成血管细胞玻璃体腔移植,移植后第二天,血视网膜屏障损伤较对照移植PBS组明显恢复(P=0.001,n=6),但在移植后第4天和第10天,血视网膜屏障损伤无明显修复。
结论:成血管细胞可促进视网膜血管功能损伤的修复。
第三节成血管细胞对视网膜神经组织的保护作用
目的:探讨成血管细胞对视网膜神经组织损伤的作用。
方法:链脲佐菌素腹腔注射诱导Wistar大鼠早期糖尿病视网膜病变模型,利用前房灌注升高眼压、阻断视网膜血流建立Wistar大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型；将成血管细胞进行玻璃体腔移植；通过视网膜病理切片、测量视网膜厚度和视网膜神经节细胞双上丘荧光金逆行标记、神经节细胞计数两种方法评价视网膜神经组织的修复情况,Tunel染色观察细胞凋亡情况。
结果:糖尿病视网膜病变模型中,移植成血管细胞组与对照组比较,视网膜厚度无明显差异(P=0.13,n=4),但Tunel染色结果显示成血管细胞移植组细胞凋亡减少；在视网膜缺血再灌注损伤模型中,细胞移植后第2、5、7(P=0.26,n=3)三个时间点进行视网膜厚度测量,移植后第7天进行神经节细胞计数,移植成血管细胞组与对照组比较,两者之间无明显差异(P=0.36,n=6)。
结论:成血管细胞对视网膜缺血再灌注损伤模型中视网膜神经组织的损伤未见明确的保护作用,但可以减少早期糖尿病视网膜病变模型中的细胞凋亡。
第二部分骨髓间充质干细胞对视网膜血管损伤的修复作用
第一节骨髓间充质干细胞对氧诱导视网膜病变的修复作用
目的:探讨骨髓间充质干细胞对氧诱导视网膜病变的修复作用。
方法:利用高压氧诱导新生C57BL/6J小鼠建立氧诱导视网膜病变模型,将骨髓间充质干细胞进行玻璃体腔移植,进行视网膜铺片,血管isolectine染色,photoshop软件量化视网膜无灌注区和新生血管面积观测视网膜血管损伤修复情况,视网膜铺片检测移植骨髓间充质干细胞迁移分布情况。
结果:氧诱导视网膜病变模型建立成功,移植骨髓间充质干细胞组与对照移植PBS组比较,视网膜无灌注区和新生血管面积均减少,其中新生血管面积差异具有统计学意义(P=0.001)。移植的骨髓间充质细胞分布在视网膜前程模样结构。
结论:骨髓间充质干细胞对氧诱导视网膜病变模型中的血管损伤具有一定的修复作用
第二节骨髓间充质干细胞对糖尿病视网膜病变中血视网膜屏障损伤的作用
目的:探讨骨髓间充质干细胞是否对糖尿病视网膜病变模型中血视网膜屏障损伤有修复作用。
方法:链脲佐菌素腹腔注射建立Wistar大鼠早期糖尿病视网膜模型,将骨髓间充质干细胞进行玻璃体腔移植,检测血视网膜屏障功能以评价血视网膜屏障损伤修复情况。
结果:大鼠糖尿病诱发成功6周后,血视网膜屏障明显损伤,此时进行骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植,移植后第2、4、10天三个时间点检测,血视网膜屏障损伤无明显修复。
结论:骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对早期糖尿病视网膜病变中血视网膜屏障损伤无明确的修复作用。
第三节骨髓间充质干细胞对视网膜缺血再灌注损伤模型中视网膜神经组织的保护作用
目的:探讨骨髓间充质干细胞是否对视网膜缺血再灌注损伤模型中视网膜神经组织有保护作用。
方法:利用前房灌注升高眼压、阻断视网膜血流建立Wistar大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,将骨髓间充质干细胞进行玻璃体腔移植,通过视网膜病理切片、测量视网膜厚度和视网膜神经节细胞双上丘荧光金逆行标记、神经节细胞计数两种方法评价视网膜神经组织的修复情况。
结果:在细胞移植后第7进行视网膜厚度测量和神经节细胞计数,移植骨髓间充质干细胞组与对照移植PBS组比较,两组之间视网膜厚度具有明显差异(P=0.015,n=3),神经节细胞计数结果两组之间无明显差异。
结论:骨髓间充质干细胞对视网膜缺血再灌注损伤模型中视网膜神经组织的损伤具有一定的保护作用。
第三部分北京城乡地区眼外伤流行病学调查
目的:估计北京城乡地区人群眼外伤的发病率和患病率及相关视力损害率。
方法:北京眼病研究基线人群为大兴区榆垡镇3个自然村和市区北部海淀区4个社区40岁以上的5324人,其中4439人(83.4％)参加了调查。2006年对基线人群进行回访时,146人(3.3％)已死亡,4293位存活者中3251人(75.7％)参加了随访调查。受检者在基线和随访调查时接受了问卷调查、眼科检查及相关全身情况检查以获取相关信息,数据统计采用SPSS软件包进行分析。
结果:2001年眼外伤患病率为1.6±0.2％(年龄矫正后为:1.7±0.01％),患病率与男性(P=0.02),农村居住(P=0.04)和饮酒相关(P=0.01)；眼外伤人群中外伤致视力损害率为6.6％,外伤致盲率为4.2％；眼外伤五年发病率为2.6±0.3％,发病率与男性(P=0.02),低年龄(P=0.037)和低收入(P=0.009)相关。
结论:北京地区眼外伤患病率为1.7±0.01％,男性、农村居住、饮酒为高危因素,眼外伤发病率为2.6±0.3％,男性、低年龄、低收入是高危因素。