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目的：通过比较不同肾虚模型和补肾中药治疗后各组大鼠唾液腺水通道蛋白及VIP-cAMP-PKA信号通路的变化，探索肾与唾相关的内在分子机制及补肾药的干预作用，为“肾在液为唾”理论的现代化研究、临床开展相关疾病唾液微观辨证和无创伤诊疗技术及其防治研究奠定实验基础。
方法：分别采用灌胃甲状腺片(45mg/100g )和肌肉注射氢化可的松(2.5mg/100g)的方法制备肾阴虚和肾阳虚证动物模型，在此基础上，六味地黄丸组用六味地黄丸灌胃进行干预治疗，金匮肾气丸组用金匮肾气丸灌胃进行干预治疗。比较各组大鼠一般状况、唾液流率、渗透压，颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5蛋白的表达及VIP、cAMP、PKA含量的变化，以探讨肾与唾相关的内在分子机制及补肾药的干预作用。
结果：①一般状况：正常对照组大鼠反应灵敏，皮毛有光泽，大小便正常。肾阴虚模型组大鼠好动，易惊易激惹，饮水量增加，毛色发黄干枯；肾阳虚模型组大鼠精神萎靡，蜷卧少动，尿量增多，毛色无光泽，弓背，扎堆，四肢水肿溃烂。六味地黄丸组大鼠皮毛干枯症状不明显；金匮肾气丸组弓背和四肢水肿溃烂现象少见。
②体重：实验结束后，与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠体重显著减轻(P＜0.01)，与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠体重无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠体重显著增加(P＜0.01)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠体重显著增加(P＜0.01)。
③唾液流率：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠唾液流率显著降低(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠唾液流率无明显变化(P＞0.05)，六味地黄丸组大鼠唾液流率有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠唾液流率有升高的趋势(P＞0.05)。
④唾液渗透压：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠唾液渗透压有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组唾液渗透压无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠唾液渗透压有降低的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠唾液渗透压有降低的趋势(P＞0.05)。
⑤颌下腺病理观察：正常对照组大鼠颌下腺组织腺泡分布均匀、腺泡间隙适中。肾阴虚、肾阳虚模型组大鼠颌下腺腺泡体积缩小，排列紊乱，腺泡间隙增大，闰管管壁上皮细胞体积缩小，管腔增大。六味地黄丸组和金匮肾气丸组颌下腺腺泡分布相对均匀，腺泡细胞体积增大，闰管管腔增大。
⑥颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5的IHC检测结果：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2蛋白表达显著减少(P＜0.01)；肾阴虚模型组大鼠AQP5蛋白表达减少(P＜0.05)，肾阳虚模型组大鼠AQP5蛋白表达显著减少(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，六味地黄丸组大鼠AQP1蛋白表达显著增多(P＜0.01),AQP2和AQP5蛋白表达无明显变化(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠AQP5蛋白表达增多(P＜0.05)，AQP1和AQP2蛋白表达无明显变化(P＞0.05)。
⑦颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5的WB检测结果：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2蛋白表达显著减少(P＜0.01)；肾阴虚模型组大鼠AQP5蛋白表达减少(P＜0.05)，肾阳虚模型组大鼠AQP5蛋白表达显著减少(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠AQP1、AQP2、AQP5蛋白无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠AQP1、AQP5蛋白表达显著增多(P＜0.01)，AQP2蛋白表达有增多的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠AQP2蛋白表达增多(P＜0.05)，AQP1和AQP5蛋白表达有增多的趋势(P＞0.05)。
⑧颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA含量：与正常对照组大鼠比较，肾阴虚、肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA的含量显著降低(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA含量无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠VIP含量升高(P＜0.05)，cAMP、PKA的含量有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA的含量有升高的趋势(P＞0.05)。
结论：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚证动物模型大鼠唾液流率及渗透压，颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5、VIP、cAMP、PKA均发生了变化，说明伴随着肾虚状态的出现，唾液腺内的水通道蛋白确实会发生变化，这可能即是肾虚状态下唾液分泌异常的物质基础，其发生的内在分子机制可能与VIP-cAMP-PKA信号通路有关。说明肾阴虚和肾阳虚有客观物质基础，“肾在液为唾”有其科学依据。应用补肾药进行干预治疗后，模型动物相应指标的变化得到了改善，说明补肾药可以改善肾虚状态下唾液分泌异常的状态。
方法：分别采用灌胃甲状腺片(45mg/100g )和肌肉注射氢化可的松(2.5mg/100g)的方法制备肾阴虚和肾阳虚证动物模型，在此基础上，六味地黄丸组用六味地黄丸灌胃进行干预治疗，金匮肾气丸组用金匮肾气丸灌胃进行干预治疗。比较各组大鼠一般状况、唾液流率、渗透压，颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5蛋白的表达及VIP、cAMP、PKA含量的变化，以探讨肾与唾相关的内在分子机制及补肾药的干预作用。
结果：①一般状况：正常对照组大鼠反应灵敏，皮毛有光泽，大小便正常。肾阴虚模型组大鼠好动，易惊易激惹，饮水量增加，毛色发黄干枯；肾阳虚模型组大鼠精神萎靡，蜷卧少动，尿量增多，毛色无光泽，弓背，扎堆，四肢水肿溃烂。六味地黄丸组大鼠皮毛干枯症状不明显；金匮肾气丸组弓背和四肢水肿溃烂现象少见。
②体重：实验结束后，与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠体重显著减轻(P＜0.01)，与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠体重无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠体重显著增加(P＜0.01)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠体重显著增加(P＜0.01)。
③唾液流率：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠唾液流率显著降低(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠唾液流率无明显变化(P＞0.05)，六味地黄丸组大鼠唾液流率有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠唾液流率有升高的趋势(P＞0.05)。
④唾液渗透压：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠唾液渗透压有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组唾液渗透压无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠唾液渗透压有降低的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠唾液渗透压有降低的趋势(P＞0.05)。
⑤颌下腺病理观察：正常对照组大鼠颌下腺组织腺泡分布均匀、腺泡间隙适中。肾阴虚、肾阳虚模型组大鼠颌下腺腺泡体积缩小，排列紊乱，腺泡间隙增大，闰管管壁上皮细胞体积缩小，管腔增大。六味地黄丸组和金匮肾气丸组颌下腺腺泡分布相对均匀，腺泡细胞体积增大，闰管管腔增大。
⑥颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5的IHC检测结果：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2蛋白表达显著减少(P＜0.01)；肾阴虚模型组大鼠AQP5蛋白表达减少(P＜0.05)，肾阳虚模型组大鼠AQP5蛋白表达显著减少(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，六味地黄丸组大鼠AQP1蛋白表达显著增多(P＜0.01),AQP2和AQP5蛋白表达无明显变化(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠AQP5蛋白表达增多(P＜0.05)，AQP1和AQP2蛋白表达无明显变化(P＞0.05)。
⑦颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5的WB检测结果：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2蛋白表达显著减少(P＜0.01)；肾阴虚模型组大鼠AQP5蛋白表达减少(P＜0.05)，肾阳虚模型组大鼠AQP5蛋白表达显著减少(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠AQP1、AQP2、AQP5蛋白无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠AQP1、AQP5蛋白表达显著增多(P＜0.01)，AQP2蛋白表达有增多的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠AQP2蛋白表达增多(P＜0.05)，AQP1和AQP5蛋白表达有增多的趋势(P＞0.05)。
⑧颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA含量：与正常对照组大鼠比较，肾阴虚、肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA的含量显著降低(P＜0.01)。与肾阴虚模型组比较，肾阳虚模型组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA含量无明显变化(P＞0.05)；六味地黄丸组大鼠VIP含量升高(P＜0.05)，cAMP、PKA的含量有升高的趋势(P＞0.05)。与肾阳虚模型组比较，金匮肾气丸组大鼠颌下腺组织中VIP、cAMP、PKA的含量有升高的趋势(P＞0.05)。
结论：与正常对照组比较，肾阴虚和肾阳虚证动物模型大鼠唾液流率及渗透压，颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5、VIP、cAMP、PKA均发生了变化，说明伴随着肾虚状态的出现，唾液腺内的水通道蛋白确实会发生变化，这可能即是肾虚状态下唾液分泌异常的物质基础，其发生的内在分子机制可能与VIP-cAMP-PKA信号通路有关。说明肾阴虚和肾阳虚有客观物质基础，“肾在液为唾”有其科学依据。应用补肾药进行干预治疗后，模型动物相应指标的变化得到了改善，说明补肾药可以改善肾虚状态下唾液分泌异常的状态。