1197例男性不育症患者精子DNA结构完整性的研究

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目的:随着辅助生殖技术的蓬勃发展,尤其是卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的出现,使一些精子质量非常差的男性不育症患者重新获得了生育其自身遗传子女的希望。但在ICSI治疗过程中,精子的自然选择过程被人为绕过,遗传物质受损的精子可能被直接注入卵子,从而影响了子代的健康。因此,对精子DNA完整性进行预评估的重要性日益突出。本研究主要运用吖啶橙实验(AOT)检测男性不育症患者精子DNA碎片化指数(DFI)与精子常规参数之间的关系,观察DFI在不同类型不育患者中的差异,以期为ICSI时如何挑选DNA结构完整的精子提供参考。  方法:连续收集我院男科门诊1197例不育症患者的精液标本,采用计算机辅助精液分析(CASA)分析精子浓度、活力。精子形态分析采用shorr染色法,分析标准采用WHO推荐的Tygerberg严格标准。根据WHO第五版手册新的分类方法将患者分为8组,即正常精液组(n=602)、少精子症组(n=48)、弱精子症组(n=140)、畸形精子症组(n=107)、少弱精子症组(n=40)、少畸精子症组(n=81)、弱畸精子症组(n=53)和少弱畸形精子症组(n=126),采用AOT检测精子DNA碎片化程度,该分析方法的原理是吖啶橙(AO)与DNA结合的变色反应性,每个样本计数300个精子,以红色和黄色精子所占百分率为DFI值。  结果: DFI与精子浓度呈负相关(r=-0.145,P<0.001)、与精子总活动率呈负相关(r=-0.126,P<0.001)、与精子前向运动率呈负相关性(r=-0.127,P<0.001)、与精子正常形态率呈负相关(r=-0.260,P<0.001)、与精子头部畸形率呈正相关(r=0.318, P<0.001)。与正常精液组相比,畸形精子症组、少畸精子症组、弱畸精子症组、少弱畸形精子症组的DFI均升高(P<0.001),这些组别的共同特征是正常形态精子率均小于4%,而正常精液组与其他组别的DFI值则没有统计学差异,这提示形态异常的精子特别是头部畸形的精子更容易出现DNA的损伤。DFI>30%的患者(n=362)精子浓度(P<0.001)、前向运动率(P<0.05)、总活动率(P<0.05)和正常形态精子率(P<0.001)均差于DFI≤30%的患者(n=835)。  结论:AOT检测的DFI值为男性不育症的诊疗提供了一个新的指标,WHO第五版手册中也提到了精子DNA损伤评估的重要性。第五版手册的新标准以及对异常精液更细致的分类使得我们能够对不同类型的异常精子症与精子DNA损伤的关系有更深入的理解。在我们的研究中,DFI与精子的浓度、前向运动率、总活动率及精子正常形态率具有负相关性,其中与正常形态率的负相关性最高;DFI与精子头部畸形率呈正相关。DFI较高的患者精液质量明显低于DFI正常的患者。这些结果将有助于行ICSI时筛选DNA结构完整的精子。
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