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3第一部分:一种新型细胞块石蜡包埋法—双石蜡包埋法 目的:在细胞病理学免疫细胞化学研究中，石蜡细胞块较普通细胞学涂片，离心后细胞学涂片及薄层细胞印片的结果可靠性更高，并且可以保留标本便于今后研究。但是传统的细胞石蜡包埋法，因细胞松散，难以聚集成团，需要较多的细胞样本，包埋切片成功率仅为47.7％，很难达到满意的要求。故现在临床应用并不广泛。我们对常规的石蜡细胞块包埋法进行改进，并命名为双石蜡包埋法。 方法:在双石蜡包埋过程中，在浆膜腔积液离心及脱水之后，先将细胞块，放置于一个圆柱体中，将经过脱水后的细胞块，放置于一个1.5mlEP管，去掉离心管下面的2/3，留用上面的1/3的圆柱体中，这样可以使细胞聚集成圆柱体，向圆柱体中浸蜡，冷却后给离心管周围加热，再将其轻轻推出，这是其看上去像一个圆柱形的组织块，压实之后再往圆柱体中滴蜡，冷却后取出，再进行常规包埋，一共107例次样本纳入我们的研究。 结果:应用我们新的细胞块石蜡包埋法方法，包埋成功率为82.2％(88/107)。与传统的石蜡包埋法相比，提高了包埋成功率。 结论:双石蜡包埋法是一种简单、经济、可靠并且适用于多种细胞学样本的细胞包埋法，可以降低常规包埋的样本需求量，提高包埋切片成功率并且细胞更聚集，提高细胞蜡块的厚度，切出更多的片子，载玻片上单位面积的细胞数更多，从而在进行免疫组化染色时更加节省抗体，节约成本。但是由于采用两步石蜡包埋法，较传统的石蜡包埋法需多花费些时间，依据熟练程度不同需多花费几分钟到十几分钟处理时间。 第二部分:恶性浆膜腔积液TOPO-I蛋白表达与cDDP/HCPT灌注化疗疗效及预后关系 目的:研究患者恶性浆膜腔积液肿瘤细胞拓扑异构酶-I（TOPO-I）表达情况与给予顺铂(cis-Diaminedichloroplatinum cDDP)或羟基喜树碱(HydroxycamptothecinHCPT)胸腹腔灌注化疗疗效及患者预后之间的关系，来探讨其指导个体化疗。 方法:应用改进后的细胞块石蜡包埋法，对石蜡细胞块切片进行免疫组化染色，检测恶性浆膜腔积液患者肿瘤细胞TOPO-I蛋白的表达情况。免疫组化结果得分判断应用染色强度乘以各自强度的百分比之和。Kaplan-Meier法绘制生存曲线，用并进行Cox模型多因素分析，探讨TOPO-I表达水平与恶性浆膜腔积液患者预后相关的因素。 结果:我们收集了35例恶性浆膜腔积液样本，其中男性14例、女性21例，中位年龄为60岁（27～79岁）。本文研究的样本中，TOPO-I表达数值在0～210分，以中位数15分为临界值(Critical Value)，小于等于15为低表达，大于15分为高表达，TOPO-I蛋白低表达为17例，高表达为18例。TOPO-I蛋白表达与患者血清癌胚抗原(P=0.368)及乳酸脱氢酶(P=0.754)之间无明显相关性。本组病例的分析显示低表达组中位生存时间为13个月，高表达组中位生存时间为35个月(P=0.057)，两者差异无统计学差异，但差异趋势明显。自出现首次胸腹水后，患者低表达组中位生存时间为8个月，高表达组中位生存时间为9个月(P=0.576)，两者之间没有统计学差异。Cox多因素分析显示，年龄、性别、是否胸腹水为首发症状、胸水还是腹水，血清CEA及血清LDH指标不是患者预后的独立因素。 结论:对于晚期肿瘤并发恶性浆膜腔积液的患者，肿瘤细胞中TOPO-I蛋白高表达的患者可能会对给予顺铂或羟基喜树碱胸腹腔灌注化疗中获益，但由于样本量较少，其结果有待进一步的大样本研究来证实。