Bcl-3在乳腺癌中的表达以及对癌细胞的增殖与凋亡的影响

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目的:探讨Bcl-3在乳腺癌中表达情况以及其下调后对乳癌细胞MDA-MB-231生物学习性的影响。方法:(1)选取80例乳腺癌组织以及对应癌旁组织,采用免疫组化法检测其中Bcl-3蛋白表达,并分析癌组织中Bcl-3的表达水平与80例乳腺癌患者临床病理参数之间的关系;(2)将乳腺癌MDA-MB-231细胞随机分为空白对照组(常规培养),阴性对照组(转染对照siRNA)和Bcl-3 siRNA组(转染Bcl-3 siRNA)。(3)转染48 h后,Western blotting法检测三组细胞Bcl-3的表达水平以鉴定转染效率;(4)利用MTT实验检测空白对照组、阴性对照组和Bcl-3 siRNA组三组细胞增殖能力;(5)利用平板克隆实验检测空白对照组、阴性对照组和Bcl-3 siRNA组三组细胞克隆形成能力;(6)利用流式细胞凋亡检测并分析空白对照组、阴性对照组和Bcl-3 siRNA组三组细胞凋亡率的差别。结果:(1)Bcl-3蛋白在乳腺癌以及对应癌旁组织中的阳性表达率分别为72.5%和51.3%,癌组织中阳性表达率明显高于对应的癌旁组织(P<0.05);(2)80例乳腺癌组织中,Bcl-3蛋白的平均表达水平与该80例乳腺癌组织的组织学分级、淋巴结转移以及Her-2的表达水平呈正相关(P<0.05),但是其表达水平与年龄大小、肿瘤直径大小、病理分型,以及雌、孕激素受体的表达水平无关(P>0.05)。(3)Western blotting实验检测结果显示,在转染48 h后,空白对照组和阴性对照组两组乳腺癌MDA-MB-231细胞的Bcl-3基因的表达水平明显高于Bcl-3siRNA组的乳腺癌MDA-MB-231细胞内的表达(P均<0.01),说明转染成功。(4)MTT法实验检测结果显示,与两对照组相比,Bcl-3 siRNA组细胞的增殖率明显降低(P<0.01);(5)平板克隆实验结果显示,与两对照组相比,Bcl-3 siRNA组细胞的细胞克隆形成率明显降低(P<0.01);(6)流式细胞凋亡实验结果显示,与两对照组相比,Bcl-3 siRNA组细胞的细胞凋亡率增高(P<0.01)。结论:(1)Bcl-3在乳癌组织中呈高表达水平,而在对应癌旁组织中却呈低表达水平;(2)沉默Bcl-3后,MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖能力受到明显抑制。(3)沉默Bcl-3后,MDA-MB-231乳腺癌细胞的细胞克隆形成率受到显著的抑制作用。(4)沉默Bcl-3后,MDA-MB-231乳腺癌细胞的细胞凋亡率明显增高。
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