补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马PKA/ERK/p-CREB通路的影响

• 作 者: 屈夏夏
• 机 构: 陕西中医药大学
• 出 处: 陕西中医药大学
• 发表日期: 2020年期
• 关键词: 阿尔茨海默病

目的：观察补益脾胃元气代表方药人参汤、洗心汤、大补元煎对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)/细胞外调节激酶(extracellular signal regulating kinase,ERK)/磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(Phosphorylation of cAMP-response element binding protein,p-CREB)通路的影响，探讨补益脾胃元气方药改善阿尔茨海默病(Alzheimers Disease，AD)患者学习记忆能力的作用机制，以期为补益脾胃元气方药防治AD提供实验依据。
　　方法：1)将3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、安理申组、补益脾胃元气方药组(人参汤组、洗心汤组、大补元煎组)，另以3月龄SAMR1小鼠作为空白对照组，共6组，连续灌胃给药10周后进行相关指标检测；2)采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力；3)采用免疫组化法检测PKA蛋白表达；免疫荧光法检测ERK、p-CREB蛋白表达；4)蛋白印迹法进一步检测小鼠海马PKA、ERK、p-CREB蛋白表达量。
　　结果：1)Morris水迷宫实验结果显示：通过定位航行实验训练，各组小鼠逃避潜伏期缩短，学习记忆能力改善。与空白对照组相比，模型组逃避潜伏期延长(P＜0.05、0.01)，穿越平台次数减少(P＜0.05)，目的象限游泳时间缩短(P＜0.01)；与模型组比较，补益脾胃元气方药组逃避潜伏期缩短，穿越平台次数增加，目的象限游泳时间延长(P＜0.05、0.01)，其中人参汤穿越平台次数无统计学意义(P＞0.05)；与模型组相比，安理申组逃避潜伏期缩短(P＜0.05)，目的象限游泳时间延长(P＜0.05)，越平台次数无统计学意义(P＞0.05)。免疫组化结果显示：与空白对照组比较，模型组小鼠海马PKA蛋白表达显著下降，差异具有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，补益脾胃元气方药组小鼠海马PKA蛋白表达显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，组间差异无统计学意义(P＞0.05)；与模型组相比，安理申组PKA蛋白表达无统计学意义(P＞0.05)。3)免疫荧光结果显示：与空白对照组比较，模型组小鼠海马ERK、p-CREB蛋白表达显著下降，差异具有统计学意义(P＜0.05、0.01)；与模型组比较，补益脾胃元气方药组小鼠海马ERK、p-CREB蛋白表达显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.05、0.01)，组间差异无统计学意义(P＞0.05)；与模型组相比，安理申组ERK、p-CREB蛋白表达无统计学意义(P＞0.05)。4)蛋白印迹实验结果与免疫组化、荧光结果趋同(P＜0.05、0.01)。
　　结论：补益脾胃元气代表方药(人参汤、洗心汤、大补元煎)对SAMP8模型小鼠学习记忆能力有明显改善作用，其机制可能是通过提高PKA、ERK及p-CREB的蛋白表达，从而激活PKA/ERK/p-CREB通路，进而参与突触可塑性，促进长时程记忆形成，介导神经元修复与再生有关。