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目的：通过临床回顾性队列研究、荷瘤小鼠体内实验和乳腺癌细胞体外实验，初步探究疏肝化癥方治疗TNBC临床疗效及其作用机制，为疏肝化癥方的进一步研究提供循证医学和基础研究证据，拓宽其临床应用空间。
方法：1.应用回顾性队列研究方法，设立对照组和观察组，比较两组患者近期疗效、肿瘤标志物变化、功能状态改善、远期存活和毒副反应发生情况。2.应用乳腺癌4T1细胞构建小鼠乳腺癌模型，设立对照组及疏肝化癥方各剂量组，对比各组小鼠的瘤体体积、食量、体质量变化，观察小鼠肿物的病理形态。3.培养乳腺癌4T1细胞，设立正常对照组和疏肝化癥方各剂量组：观察疏肝化癥方对4T1细胞形态的影响；细胞计数法检测疏肝化癥方对4T1细胞生长数量的影响；MTT比色法检测疏肝化癥方对4T1细胞增殖抑制率的影响；划痕实验检测疏肝化癥方对4T1细胞侵袭能力的影响；PI染色流式细胞术检测疏肝化癥方对4T1细胞周期的影响；Annexin V-PI染色流式细胞术检测疏肝化癥方对4T1细胞凋亡的影响；RT-PCR检测疏肝化癥方对4T1细胞PI3K/AKT/Bax通路相关基因mRNA表达的影响；Western Blot检测疏肝化癥方对4T1细胞PI3K/AKT/Bax通路相关基因蛋白表达的影响。
结果：1.与对照组比较，观察组患者近期疗效稳定率、肿瘤标志物（CEA、CA125及CA153）总改善率、功能状态总改善率均显著升高（P＜0.05），而远期存活及毒副反应发生情况未见显著差异（P＞0.05）。2.疏肝化癥方各剂量组作用荷瘤小鼠一定时间，结果发现：第21d时，0.10、1.00和10.00g/kg剂量组小鼠抑瘤率显著增加（P＜0.05或P＜0.01）；各剂量组小鼠每日进食量未见显著差异（P＞0.05）；第14d和21d时，10.00g/kg剂量组小鼠体质量显著增加（P＜0.01）；各剂量组小鼠瘤体较小，其血管逐渐减少、出血及坏死面积逐渐增大，差异显著（P＜0.01）；肿瘤细胞的形态逐渐消失，核分裂相逐渐减少，且可观察到显著细胞碎裂。3.疏肝化癥方各剂量组作用4T1细胞后一定时间，结果发现：各剂量组细胞体积缩小、凝集和碎裂，且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组细胞生长数量：正常对照组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组，差异显著（P＜0.01）；各剂量组细胞增殖抑制率显著增加（P＜0.05），且与药物浓度和时间存在依赖关系；各剂量组细胞划痕修复率显著减少（P＜0.05），且与药物浓度和时间存在依赖关系；中、高剂量组G0/G1期、G2/M期细胞DNA含量显著升高，S期细胞DNA含量均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组早期及晚期凋亡率显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组PI3K、Akt、caspase-3和Bax的mRNA表达显著上升，而Bc1-2的mRNA表达显著下降（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组PI3K和Akt的蛋白表达无显著变化，p-PI3K、p-Akt和Bcl-2的蛋白的表达显著下降，而Bax和caspase-3的蛋白的表达显著上升（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系。
结论：1.疏肝化癥方对晚期TNBC患者具有治疗作用，可提高肿瘤近期治疗稳定率，降低肿瘤标志物水平，提升功能状态，且无毒副反应。2.疏肝化癥方对乳腺癌荷瘤小鼠具有抑瘤作用，可减缓瘤体生长，破坏瘤体组织结构，提高小鼠体质量，且不影响小鼠进食量。3.疏肝化癥方对乳腺癌4T1细胞具有抑制作用，可诱导细胞周期阻滞，抑制细胞增殖，抑制细胞侵袭能力，其机制可能通过调节 PI3K/AKT/Bax信号通路上相关基因来实现。
方法：1.应用回顾性队列研究方法，设立对照组和观察组，比较两组患者近期疗效、肿瘤标志物变化、功能状态改善、远期存活和毒副反应发生情况。2.应用乳腺癌4T1细胞构建小鼠乳腺癌模型，设立对照组及疏肝化癥方各剂量组，对比各组小鼠的瘤体体积、食量、体质量变化，观察小鼠肿物的病理形态。3.培养乳腺癌4T1细胞，设立正常对照组和疏肝化癥方各剂量组：观察疏肝化癥方对4T1细胞形态的影响；细胞计数法检测疏肝化癥方对4T1细胞生长数量的影响；MTT比色法检测疏肝化癥方对4T1细胞增殖抑制率的影响；划痕实验检测疏肝化癥方对4T1细胞侵袭能力的影响；PI染色流式细胞术检测疏肝化癥方对4T1细胞周期的影响；Annexin V-PI染色流式细胞术检测疏肝化癥方对4T1细胞凋亡的影响；RT-PCR检测疏肝化癥方对4T1细胞PI3K/AKT/Bax通路相关基因mRNA表达的影响；Western Blot检测疏肝化癥方对4T1细胞PI3K/AKT/Bax通路相关基因蛋白表达的影响。
结果：1.与对照组比较，观察组患者近期疗效稳定率、肿瘤标志物（CEA、CA125及CA153）总改善率、功能状态总改善率均显著升高（P＜0.05），而远期存活及毒副反应发生情况未见显著差异（P＞0.05）。2.疏肝化癥方各剂量组作用荷瘤小鼠一定时间，结果发现：第21d时，0.10、1.00和10.00g/kg剂量组小鼠抑瘤率显著增加（P＜0.05或P＜0.01）；各剂量组小鼠每日进食量未见显著差异（P＞0.05）；第14d和21d时，10.00g/kg剂量组小鼠体质量显著增加（P＜0.01）；各剂量组小鼠瘤体较小，其血管逐渐减少、出血及坏死面积逐渐增大，差异显著（P＜0.01）；肿瘤细胞的形态逐渐消失，核分裂相逐渐减少，且可观察到显著细胞碎裂。3.疏肝化癥方各剂量组作用4T1细胞后一定时间，结果发现：各剂量组细胞体积缩小、凝集和碎裂，且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组细胞生长数量：正常对照组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组，差异显著（P＜0.01）；各剂量组细胞增殖抑制率显著增加（P＜0.05），且与药物浓度和时间存在依赖关系；各剂量组细胞划痕修复率显著减少（P＜0.05），且与药物浓度和时间存在依赖关系；中、高剂量组G0/G1期、G2/M期细胞DNA含量显著升高，S期细胞DNA含量均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组早期及晚期凋亡率显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组PI3K、Akt、caspase-3和Bax的mRNA表达显著上升，而Bc1-2的mRNA表达显著下降（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系；各剂量组PI3K和Akt的蛋白表达无显著变化，p-PI3K、p-Akt和Bcl-2的蛋白的表达显著下降，而Bax和caspase-3的蛋白的表达显著上升（P＜0.05或P＜0.01），且与药物浓度存在依赖关系。
结论：1.疏肝化癥方对晚期TNBC患者具有治疗作用，可提高肿瘤近期治疗稳定率，降低肿瘤标志物水平，提升功能状态，且无毒副反应。2.疏肝化癥方对乳腺癌荷瘤小鼠具有抑瘤作用，可减缓瘤体生长，破坏瘤体组织结构，提高小鼠体质量，且不影响小鼠进食量。3.疏肝化癥方对乳腺癌4T1细胞具有抑制作用，可诱导细胞周期阻滞，抑制细胞增殖，抑制细胞侵袭能力，其机制可能通过调节 PI3K/AKT/Bax信号通路上相关基因来实现。