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目的：明确醒脑健神方对缺血性中风（痰热腑实证）患者的临床疗效、复方中的化学成分以及明确其体外的抗缺氧机制，为临床用药提供客观依据和指导。
方法：第一章是入组缺血性中风（痰热腑实证）的临床患者，应用非随机对照的临床试验方法评价治疗前后NIHSS、BI、mRS、中医证候（内风、痰湿、内火及血瘀）积分及便秘疗效的变化情况，明确临床治疗效果的相关结论。第二章是应用网络药理学的分析方法构建“药物一成分一疾病”的靶点集合及生物信息预测，探索醒脑健神方在缺血性中风病中可能发挥作用的机制通路与潜在靶点。第三章是应用HPLC-MS/MS的方法进行醒脑健神方的全谱分析，明确方中所含化学成分。第四章是应用PC12细胞在体外进行神经细胞的形态功能模拟，并进行化学缺氧造模，分组干预后应用蛋白质组学4D lable free等方法检测，明确醒脑健神方的体外抗缺氧机制。
结果：1．临床结果。通过比较试验组与对照组的NIHSS、BI与mRS的治疗前后变化，可以说明联用醒脑健神方的干预方法优于单纯使用西医基础治疗；通过对两组患者的中医证候要素积分变化情况的统计，可以说明联用酲脑健神方的干预方法优于单纯使用指南推荐的西医基础治疗，较为明显地改善痰湿、内火、血瘀证候表现，但在改善内风证候方面的疗效无明显差异；试验组的首次通便时间要长于对照组的西医对症治疗、便秘症状积分在第3天、第7天改善情况较对照组有统计学差异，便秘疗效的总有效率高于对照组。
2．网络药理学预铡结果。本研究将醒脑健神方中的药物成分与缺血性中风疾病的靶点进行网络互作，经过KEGG等生物信息分析后发现其主要调控的通路Apoptosis、HIF-1信号通路等，而且这些通路均与缺血性脑血管病有着密切联系，同时也确定了NF-κBp65、Bcl-2、Caspase3等目标蛋白，且应用蛋白印迹实验进行了验证，可确定其为药效作用的具体靶点。
3．全谱分析结果。醒脑健神方中共检测出398种成分，正离子模式293种、有64类（含暂不能归类的）；负离子模式105种、有24类。其中，正、负离子取交集发现成分种类吻合的是贡酮类化合物，也是复方中相对浓度表达较高的成分。贡酮类化合物共有46种化学成分，浓度高度突出的是贡酮榕碱和槲皮-3，4-二-O-葡糖苷等。
4．体外抗缺氧机制实验结果．缺氧后PC12细胞的存活能力有所下降，在造模基础上应用醒脑健神方预孵育后可以显著增加因缺氧而损伤的细胞活力。蛋白质组学的结果发现醒脑健神方的抗缺氧机制主要富集在凋亡、调控细胞各类代谢等方面，具体的机制通路富集到了PPAP、PI3K/AKT、HIF-1、Steroid biosynthesis、 Metabolic pathways等；根据关联强度与差异倍数确定兴趣蛋白并进行了PRM的蛋白验证，发现Perilipin、CoA synthase蛋白的变化趋势与蛋白组学的结果一致，说明酲脑健神方确实具有抗缺氧的作用机制。根据PC12各组细胞处理后使的抗体与抗原识别结合，可以发现醒脑健神方干预后可以使细胞样本发生三甲基化、乙酰化、乳酸化及泛素化的修饰变化。
结论：临床研究的结论是醒脑健神方对缺血性中风（痰热腑实证）患者确实具有临床治疗效果，联合应用可比对照组的疗效更明显。网络药理学的结论是醒脑健神方在本病中确实有调控作用，经过western验证发现其可调控凋亡标志蛋白。LC/MS的结论是醒脑健神方中有多种化学成分，很有可能的药效物质成分是黄酮类化合物，当然这需要实验来进行后续验证。体外实验的结论是醒脑健神方对PC12具有抗缺氧调控作用，主要的机制通路富集在凋亡、调控细胞糖脂及产物的代谢等，且在组蛋白修饰层面可能对蛋白基团具有三甲化、乙酰化、乳酸化及泛素化的调控作用。
方法：第一章是入组缺血性中风（痰热腑实证）的临床患者，应用非随机对照的临床试验方法评价治疗前后NIHSS、BI、mRS、中医证候（内风、痰湿、内火及血瘀）积分及便秘疗效的变化情况，明确临床治疗效果的相关结论。第二章是应用网络药理学的分析方法构建“药物一成分一疾病”的靶点集合及生物信息预测，探索醒脑健神方在缺血性中风病中可能发挥作用的机制通路与潜在靶点。第三章是应用HPLC-MS/MS的方法进行醒脑健神方的全谱分析，明确方中所含化学成分。第四章是应用PC12细胞在体外进行神经细胞的形态功能模拟，并进行化学缺氧造模，分组干预后应用蛋白质组学4D lable free等方法检测，明确醒脑健神方的体外抗缺氧机制。
结果：1．临床结果。通过比较试验组与对照组的NIHSS、BI与mRS的治疗前后变化，可以说明联用醒脑健神方的干预方法优于单纯使用西医基础治疗；通过对两组患者的中医证候要素积分变化情况的统计，可以说明联用酲脑健神方的干预方法优于单纯使用指南推荐的西医基础治疗，较为明显地改善痰湿、内火、血瘀证候表现，但在改善内风证候方面的疗效无明显差异；试验组的首次通便时间要长于对照组的西医对症治疗、便秘症状积分在第3天、第7天改善情况较对照组有统计学差异，便秘疗效的总有效率高于对照组。
2．网络药理学预铡结果。本研究将醒脑健神方中的药物成分与缺血性中风疾病的靶点进行网络互作，经过KEGG等生物信息分析后发现其主要调控的通路Apoptosis、HIF-1信号通路等，而且这些通路均与缺血性脑血管病有着密切联系，同时也确定了NF-κBp65、Bcl-2、Caspase3等目标蛋白，且应用蛋白印迹实验进行了验证，可确定其为药效作用的具体靶点。
3．全谱分析结果。醒脑健神方中共检测出398种成分，正离子模式293种、有64类（含暂不能归类的）；负离子模式105种、有24类。其中，正、负离子取交集发现成分种类吻合的是贡酮类化合物，也是复方中相对浓度表达较高的成分。贡酮类化合物共有46种化学成分，浓度高度突出的是贡酮榕碱和槲皮-3，4-二-O-葡糖苷等。
4．体外抗缺氧机制实验结果．缺氧后PC12细胞的存活能力有所下降，在造模基础上应用醒脑健神方预孵育后可以显著增加因缺氧而损伤的细胞活力。蛋白质组学的结果发现醒脑健神方的抗缺氧机制主要富集在凋亡、调控细胞各类代谢等方面，具体的机制通路富集到了PPAP、PI3K/AKT、HIF-1、Steroid biosynthesis、 Metabolic pathways等；根据关联强度与差异倍数确定兴趣蛋白并进行了PRM的蛋白验证，发现Perilipin、CoA synthase蛋白的变化趋势与蛋白组学的结果一致，说明酲脑健神方确实具有抗缺氧的作用机制。根据PC12各组细胞处理后使的抗体与抗原识别结合，可以发现醒脑健神方干预后可以使细胞样本发生三甲基化、乙酰化、乳酸化及泛素化的修饰变化。
结论：临床研究的结论是醒脑健神方对缺血性中风（痰热腑实证）患者确实具有临床治疗效果，联合应用可比对照组的疗效更明显。网络药理学的结论是醒脑健神方在本病中确实有调控作用，经过western验证发现其可调控凋亡标志蛋白。LC/MS的结论是醒脑健神方中有多种化学成分，很有可能的药效物质成分是黄酮类化合物，当然这需要实验来进行后续验证。体外实验的结论是醒脑健神方对PC12具有抗缺氧调控作用，主要的机制通路富集在凋亡、调控细胞糖脂及产物的代谢等，且在组蛋白修饰层面可能对蛋白基团具有三甲化、乙酰化、乳酸化及泛素化的调控作用。