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目的：SD大鼠来源的骨髓间充质干细胞的培养及鉴定。观察川芎嗪在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞细胞成软骨分化的作用及机制，探索中药在组织工程修复技术中的潜力和应用价值，同时为川芎“补五劳，壮筋骨”的临床功效提供实验依据。
方法：实验1.运用全骨髓细胞贴壁法对大细胞鼠进行分离、培养、传代，并观察其生长形态及其特性，并进行细胞形态、免疫组化、流式鉴定和三向分化功能鉴定。实验2.观察川芎嗪对骨髓间充质干细胞生长增殖的作用和骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用。实验三：在微团培养方法下，观察成软骨诱导液联合低浓度川芎嗪组、成软骨诱导液联合中浓度川芎嗪组、成软骨诱导液联合高浓度川芎嗪组及对照组（成软骨诱导液）对大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用，进行阿尔新蓝染色、GAG（糖胺聚糖）检测及Q-PCR分析。
结果：实验1：全骨髓细胞贴壁法可以成功分离培养出大鼠骨髓间充质干细胞，并可以逐代纯化，全骨髓细胞贴壁法培养出的细胞增殖再生能力强，生长快，所含杂质细胞少。实验2：川芎嗪可以促进大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖及成软骨分化，其以中浓度的作用最强。实验3：在微团培养模式下，甲苯胺蓝染色后显示，观察成软骨诱导液联合低浓度川芎嗪组、中浓度川芎嗪组、高浓度川芎嗪组和对照组均出现软骨球团。成软骨诱导液联合川芎嗪能促进大鼠骨髓间充质干细胞向软骨分化，观察软骨微球大小，中浓度川芎嗪组优于中浓、高度川芎嗪组和对照组。进行GAG含量检测后显示，中浓度川芎嗪组含量高于低、高浓度川芎嗪组和对照组，差异具有统计学意义。进行Q-PCR检测后，中浓度川芎嗪组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖（ACAN）及SOX9含量均高于标准对照组（GADPH），差异具有统计学意义。
结论：实验1：采用全骨髓细胞贴壁法可培养出良好的大鼠骨髓间充质干细胞。实验2：川芎嗪可促进大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖及成软骨分化，以中浓度最适。实验3：微团培养下，川芎嗪在BMSCs成软骨分化过程中显著增强GAG含量，ACAN和COL2A1基因表达，以及基因表达转录因子SOX9的表达。为进一步将中药用于组织工程学治疗椎间盘退变在体实验提供实验基础。
方法：实验1.运用全骨髓细胞贴壁法对大细胞鼠进行分离、培养、传代，并观察其生长形态及其特性，并进行细胞形态、免疫组化、流式鉴定和三向分化功能鉴定。实验2.观察川芎嗪对骨髓间充质干细胞生长增殖的作用和骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用。实验三：在微团培养方法下，观察成软骨诱导液联合低浓度川芎嗪组、成软骨诱导液联合中浓度川芎嗪组、成软骨诱导液联合高浓度川芎嗪组及对照组（成软骨诱导液）对大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用，进行阿尔新蓝染色、GAG（糖胺聚糖）检测及Q-PCR分析。
结果：实验1：全骨髓细胞贴壁法可以成功分离培养出大鼠骨髓间充质干细胞，并可以逐代纯化，全骨髓细胞贴壁法培养出的细胞增殖再生能力强，生长快，所含杂质细胞少。实验2：川芎嗪可以促进大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖及成软骨分化，其以中浓度的作用最强。实验3：在微团培养模式下，甲苯胺蓝染色后显示，观察成软骨诱导液联合低浓度川芎嗪组、中浓度川芎嗪组、高浓度川芎嗪组和对照组均出现软骨球团。成软骨诱导液联合川芎嗪能促进大鼠骨髓间充质干细胞向软骨分化，观察软骨微球大小，中浓度川芎嗪组优于中浓、高度川芎嗪组和对照组。进行GAG含量检测后显示，中浓度川芎嗪组含量高于低、高浓度川芎嗪组和对照组，差异具有统计学意义。进行Q-PCR检测后，中浓度川芎嗪组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖（ACAN）及SOX9含量均高于标准对照组（GADPH），差异具有统计学意义。
结论：实验1：采用全骨髓细胞贴壁法可培养出良好的大鼠骨髓间充质干细胞。实验2：川芎嗪可促进大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖及成软骨分化，以中浓度最适。实验3：微团培养下，川芎嗪在BMSCs成软骨分化过程中显著增强GAG含量，ACAN和COL2A1基因表达，以及基因表达转录因子SOX9的表达。为进一步将中药用于组织工程学治疗椎间盘退变在体实验提供实验基础。