论文部分内容阅读
目的：应用联合化疗药物诱导MCF-7多药耐药株，针对肿瘤多耐药机制进行研究。探讨“平郁炻乳方”对乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM增殖的影响，并从蛋白组学的角度研究其对乳腺癌耐药蛋白BCRP的影响。
方法：以MCF-7为亲本细胞，表阿霉素为诱导药物，使用低浓度加量持续诱导法，成功构建出乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM，并绘制出生长抑制曲线图，计算出细胞的IC50、耐药指数；应用MTT法检测不同剂量浓度的“平郁炻乳方”作用于MCF-7/ADM细胞24h、48h、72h后，对其增殖抑制率的影响。并通过绘制生长抑制曲线图，比较各组细胞抑制情况；运用WesternBlot方法观察不同剂量组“平郁炻乳方”作用于MCF-7/ADM细胞后，BCRP蛋白表达的影响。
结果：
1.成功诱导出MCF-7/ADM细胞，耐药指数（RI）为148.261。
2.通过MTT法测量MCF-7细胞在波长490处的吸光值，并计算细胞生长抑制率，并绘制出细胞生长抑制率曲线图。ADM浓度与细胞抑制率呈正相关，药物浓度逐渐升高，细胞生长速度缓慢，状态差，死细胞数增加。当达到一定浓度时，细胞抑制率趋于平缓。利用SPSS23.0软件做回归曲线分析，求得ADM对MCF-7细胞抑制率回归方程为y=36.557x+54.695，R2=0.9717。由指数方程可得出，ADM对MCF-7细胞的IC50为0.740.03μg/mL。
3.运用MTT法检测不同剂量“平郁炻乳方”对MCF-7/ADM细胞的抑制率。相对于对照组，“平郁炻乳方”每组含药血清能够在给药后的24小时、48小时以及72小时不同程度地减少MCF-7/ADM细胞的增殖。并且其随着低、中、高剂量组中药物浓度的升高，其抑制率也在越来越高，同时随着时间的迁移，其增长幅度增幅越来越高；“平郁炻乳方”低剂量含药血清组与空白组比较后，其P=0.035＜0.05，有统计学意义；中剂量组与空白组比较，P=0.9×10-3＜0.05，差异有统计学意义。高剂量组与空白组对比，P=0.18×10-2＜0.05，有显著差异。此外，该结果以时间和剂量依赖的方式呈现。“平郁炻乳方”高剂量组在72小时的抑制率最高,达到27.6%。
结论：“平郁炻乳方”能够抑制人乳腺癌多耐药细胞MCF-7/ADM增殖，下调细胞中BCRP蛋白的表达；且与浓度呈相关性。
方法：以MCF-7为亲本细胞，表阿霉素为诱导药物，使用低浓度加量持续诱导法，成功构建出乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM，并绘制出生长抑制曲线图，计算出细胞的IC50、耐药指数；应用MTT法检测不同剂量浓度的“平郁炻乳方”作用于MCF-7/ADM细胞24h、48h、72h后，对其增殖抑制率的影响。并通过绘制生长抑制曲线图，比较各组细胞抑制情况；运用WesternBlot方法观察不同剂量组“平郁炻乳方”作用于MCF-7/ADM细胞后，BCRP蛋白表达的影响。
结果：
1.成功诱导出MCF-7/ADM细胞，耐药指数（RI）为148.261。
2.通过MTT法测量MCF-7细胞在波长490处的吸光值，并计算细胞生长抑制率，并绘制出细胞生长抑制率曲线图。ADM浓度与细胞抑制率呈正相关，药物浓度逐渐升高，细胞生长速度缓慢，状态差，死细胞数增加。当达到一定浓度时，细胞抑制率趋于平缓。利用SPSS23.0软件做回归曲线分析，求得ADM对MCF-7细胞抑制率回归方程为y=36.557x+54.695，R2=0.9717。由指数方程可得出，ADM对MCF-7细胞的IC50为0.740.03μg/mL。
3.运用MTT法检测不同剂量“平郁炻乳方”对MCF-7/ADM细胞的抑制率。相对于对照组，“平郁炻乳方”每组含药血清能够在给药后的24小时、48小时以及72小时不同程度地减少MCF-7/ADM细胞的增殖。并且其随着低、中、高剂量组中药物浓度的升高，其抑制率也在越来越高，同时随着时间的迁移，其增长幅度增幅越来越高；“平郁炻乳方”低剂量含药血清组与空白组比较后，其P=0.035＜0.05，有统计学意义；中剂量组与空白组比较，P=0.9×10-3＜0.05，差异有统计学意义。高剂量组与空白组对比，P=0.18×10-2＜0.05，有显著差异。此外，该结果以时间和剂量依赖的方式呈现。“平郁炻乳方”高剂量组在72小时的抑制率最高,达到27.6%。
结论：“平郁炻乳方”能够抑制人乳腺癌多耐药细胞MCF-7/ADM增殖，下调细胞中BCRP蛋白的表达；且与浓度呈相关性。