龙珠果繁殖技术研究

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龙珠果(Passiflora foetida Linn.)是西番莲科西番莲属草质藤本植物,花朵秀丽,颜色多变,具有一定的观赏价值;果实外形美观,香甜可食,具有一定的经济价值;全株可入药,具有一定的药用价值。自然界中龙珠果的主要繁殖方式是种子繁殖,但种子萌发率不高,关于龙珠果组织培养快繁体系的研究较少。本文以龙珠果种子为试验材料,对促进种子萌发的方法、组织培养快繁体系的建立及盐胁迫对组培苗生长和生理特性的影响等方面进行了研究,主要研究结果如下:  1、促进龙珠果种子萌发的方法。在温水、激素(GA3、6-BA)、超声波、紫外线等处理条件下,龙珠果种子萌发率普遍较低。总体来看,300mg L-1GA3浸泡24h,龙珠果种子萌发率最高,为19.33%。另外,试验发现,用紫外线照射种子不同时间均能使种子的萌发时间提前。  2、以龙珠果叶片为外植体的直接体胚发生途径。(1)激素种类和浓度会影响叶片诱导产物的类型和数量。培养基MS+2,4-D1.0mg L-1+6-BA2.0mg L-1中叶片会同时产生不定芽和体胚,而且数量较多;培养基MS+2,4-D1.0mg L-1+TDZ0.05mg L-1中叶片主要产生体胚,而且效果较好;MS培养基中单独添加0.01mg L-1TDZ,或将0.01mg L-1TDZ与2,4-D结合使用,叶片明显膨大,边缘及底部容易产生不定芽及芽点,这种芽点在后期培养过程中容易形成不定芽。(2)不同浓度的KT、6-BA与NAA组合使用时,体胚生长情况明显不同。KT和NAA搭配使用不利于体胚的生长,6-BA和NAA组合使用时,体胚生长状态良好,但萌发效果不理想。优化培养基MS+6-BA2.0mg L-1+NAA0.2mg L-1+GA31.5mg L-1能促进体胚萌发。(3)不同生长素种类和浓度对龙珠果植株再生的影响不同。适合植株再生的培养基为1/2MS+IBA0.2mg L-1,生根率达96%,根生长粗壮,有须根。(4)将龙珠果组培苗移栽到基质(泥炭土∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1)中,龙珠果幼苗长势良好,移栽成活率达92%。  3、以龙珠果茎节为外植体的直接器官发生途径。激素种类和浓度会影响茎节诱导产物的类型和数量。相对于IBA,6-BA和NAA搭配使用时茎节诱导出芽的数量和生长情况都较好。培养基MS+6-BA0.5mg L-1+NAA0.05mg L-1有利于茎节诱导出芽、培养基MS+6-BA3.0mg L-1+NAA0.3mg L-1有利于茎节诱导出愈伤组织。  4、盐胁迫对龙珠果幼苗生长和生理特性的影响。对移栽后成活且生长状态一致的龙珠果幼苗进行盐胁迫处理,测定其生长和生理指标。结果表明龙珠果幼苗对200mM以下的盐浓度不敏感;SOD酶活性随着NaCl浓度的增加逐渐升高;POD、CAT和APX酶活性整体呈先升高后下降的趋势,且在不同NaCl浓度时达到最高值;可溶性蛋白含量整体呈先增加后减少最后趋于平稳的趋势。它们的动态变化反应了龙珠果幼苗对盐胁迫的耐受性,是应答盐胁迫的一种积极的调节机制。
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