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目的：通过体内外实验探讨ER-α36对MDA-MB-231三阴乳腺癌细胞的增殖及其化疗药物敏感性的影响，进一步了解三阴乳腺癌患者对化疗药物产生抵抗的分子机制，为完善化疗耐药机制提供依据，同时为患者的临床诊治和耐药监测提供新的检测靶标。
方法：1.采用靶向ER-α36的短发夹RNA重组慢病毒，定向沉默MDA-MB-231细胞株的ER-α36基因，构建ER-α36基因沉默的细胞株，并采用该细胞株构建裸鼠皮下移植瘤动物模型，通过观察细胞增殖、移植瘤体积变化以及ER-α36表达水平验证沉默效果。
2.采用化疗药物多西他赛分别作用于体内外ER-α36基因沉默及未沉默各实验组，观察细胞增殖及移植瘤体积变化，以及相关基因Survivin、Bax的表达水平，以确定化疗药物敏感性变化。
3.在ER-α36高表达的MDA-MB-231细胞株中，采用β-catenin特异性抑制剂观察细胞体内外增殖状况，以及β-catenin、Survivin的表达情况，探索ER-α36能否通过wnt/β-catenin信号通路参与三阴乳腺癌基因表达的信号传导。
结果：1.ER-α36基因沉默组细胞株和动物模型分别与未沉默组相比，细胞增殖能力下降，ER-α36在mRNA和蛋白水平上均表达下降，结果具有统计学差异（P＜0.05），成功构建ER-α36基因沉默的细胞株和动物模型。
2.多西他赛作用的ER-α36基因沉默组细胞株与未沉默组对比，细胞增殖能力下降，结果具有统计学差异（P＜0.05）；且各组细胞株增殖活性呈药物浓度和时间依赖性，其中沉默组抑制作用最明显，结果具有统计学差异（P＜0.05）。
3.ER-α36基因沉默组较未沉默组同期移植瘤体积增长速度显著减慢，结果具有统计学差异（P＜0.05）；多西他赛给药后沉默组裸鼠移植瘤体积前期增长速度减慢更为明显，后期体积逐渐缩小，结果均具有统计学差异（P＜0.05）。
4.ER-α36基因沉默组及各多西他赛用药组的BaxmRNA与蛋白表达量均增加，其中沉默组+多西他赛组BaxmRNA与蛋白表达量增加更为明显，结果均具有统计学差异（P＜0.05）。ER-α36基因沉默组及各多西他赛用药组的SurvivinmRNA与蛋白表达量均减少，其中沉默组+多西他赛组SurvivinmRNA与蛋白表达量减少更为明显，结果均具有统计学差异（P＜0.05），体内外结果一致。
5.ER-α36基因沉默组的β-catenin、Survivin的mRNA和蛋白表达量下降，结果具有统计学差异（P＜0.05）。β-catenin抑制剂作用后，细胞增殖能力下降，且该组的β-catenin、Survivin的mRNA与蛋白表达量均下降，结果具有统计学差异（P＜0.05），体内外结果一致。
结论：本实验结果表明ER-α36基因沉默可在体内外影响三阴乳腺癌细胞的增殖，显著增加三阴乳腺癌细胞对化疗药物多西他赛的敏感性，并且提示wnt/β-catenin信号通路可能参与了该过程的调节。
方法：1.采用靶向ER-α36的短发夹RNA重组慢病毒，定向沉默MDA-MB-231细胞株的ER-α36基因，构建ER-α36基因沉默的细胞株，并采用该细胞株构建裸鼠皮下移植瘤动物模型，通过观察细胞增殖、移植瘤体积变化以及ER-α36表达水平验证沉默效果。
2.采用化疗药物多西他赛分别作用于体内外ER-α36基因沉默及未沉默各实验组，观察细胞增殖及移植瘤体积变化，以及相关基因Survivin、Bax的表达水平，以确定化疗药物敏感性变化。
3.在ER-α36高表达的MDA-MB-231细胞株中，采用β-catenin特异性抑制剂观察细胞体内外增殖状况，以及β-catenin、Survivin的表达情况，探索ER-α36能否通过wnt/β-catenin信号通路参与三阴乳腺癌基因表达的信号传导。
结果：1.ER-α36基因沉默组细胞株和动物模型分别与未沉默组相比，细胞增殖能力下降，ER-α36在mRNA和蛋白水平上均表达下降，结果具有统计学差异（P＜0.05），成功构建ER-α36基因沉默的细胞株和动物模型。
2.多西他赛作用的ER-α36基因沉默组细胞株与未沉默组对比，细胞增殖能力下降，结果具有统计学差异（P＜0.05）；且各组细胞株增殖活性呈药物浓度和时间依赖性，其中沉默组抑制作用最明显，结果具有统计学差异（P＜0.05）。
3.ER-α36基因沉默组较未沉默组同期移植瘤体积增长速度显著减慢，结果具有统计学差异（P＜0.05）；多西他赛给药后沉默组裸鼠移植瘤体积前期增长速度减慢更为明显，后期体积逐渐缩小，结果均具有统计学差异（P＜0.05）。
4.ER-α36基因沉默组及各多西他赛用药组的BaxmRNA与蛋白表达量均增加，其中沉默组+多西他赛组BaxmRNA与蛋白表达量增加更为明显，结果均具有统计学差异（P＜0.05）。ER-α36基因沉默组及各多西他赛用药组的SurvivinmRNA与蛋白表达量均减少，其中沉默组+多西他赛组SurvivinmRNA与蛋白表达量减少更为明显，结果均具有统计学差异（P＜0.05），体内外结果一致。
5.ER-α36基因沉默组的β-catenin、Survivin的mRNA和蛋白表达量下降，结果具有统计学差异（P＜0.05）。β-catenin抑制剂作用后，细胞增殖能力下降，且该组的β-catenin、Survivin的mRNA与蛋白表达量均下降，结果具有统计学差异（P＜0.05），体内外结果一致。
结论：本实验结果表明ER-α36基因沉默可在体内外影响三阴乳腺癌细胞的增殖，显著增加三阴乳腺癌细胞对化疗药物多西他赛的敏感性，并且提示wnt/β-catenin信号通路可能参与了该过程的调节。