【摘 要】
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目的 通过体外构建模拟的肿瘤微环境，探讨在肿瘤微环境下SIL-6R及GP130的过度激活和表达对骨髓间充质干细胞(MSCs)向肿瘤方向转化的影响.方法 采用transwell插入式培养皿结合6孔板构建间接共培养体系来模拟MSCs生长的微环境，将实验分为四组：实验组为MSCs与C6胶质瘤间接共培养组，阳性对照组为常规培养C6胶质瘤细胞组，阴性对照组为MSCs与星型胶质细胞间接共培养组，空白组为常规培
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院、重庆医科大学儿科研究所、儿童发育疾病研究教育部重点实验室
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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目的 通过体外构建模拟的肿瘤微环境，探讨在肿瘤微环境下SIL-6R及GP130的过度激活和表达对骨髓间充质干细胞(MSCs)向肿瘤方向转化的影响.方法 采用transwell插入式培养皿结合6孔板构建间接共培养体系来模拟MSCs生长的微环境，将实验分为四组：实验组为MSCs与C6胶质瘤间接共培养组，阳性对照组为常规培养C6胶质瘤细胞组，阴性对照组为MSCs与星型胶质细胞间接共培养组，空白组为常规培养MSCs组.应用RT-QPCR检测检测各组细胞中GP130、STAT-3、CyclinD1、BCL-x1的mRNA的表达水平；相差显微镜下观察培养后的各组细胞形态学的改变；ELISA法检测各组细胞上清液中SIL-6R的表达水平；免疫荧光法检测各组细胞膜上GP130的表达情况；Western blot检测各组细胞中STAT-3、CyclinD1、BCL-x1的蛋白表达水平.结果 实验组的MSCs呈现类似胶质瘤细胞样的形态；实验组GP130、STAT-3、CyclinD1、BCL-x1的mRNA的表达水平明显高于阴性对照组和空白组(P＜0.05)与阳性对照组无明显差别(P＞0.05)；实验组上清液中SIL-6R的表达水平高于阴性对照组和空白组(P＜0.05)与阳性对照组无明显差别(P＞0.05)；实验组大部分细胞及阳性对照组的细胞膜上表达GP130蛋白，分别达到93±5％和95±5％(P＞0.05)，而阴性对照组及空白组的表达率为0％(P＜0.01)，实验组STAT-3、CyclinD1、BCL-x1的蛋白表达水平高于阴性对照组和空白组(P＜0.05)与阳性对照组无明显差别(P＞0.05).结论 肿瘤微环境下存在SIL-6R及GP130的过度表达和激活有可能是造成MSCs向肿瘤方向转化的重要原因之一.
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