【摘 要】
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目的:筛选不同的细胞因子对体外分离并扩增的兔骨髓间充质干细胞进行刺激和诱导,为组织工程半月板重建提供种子细胞.方法:分离并经体外传代培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mes
【机 构】
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北京大学第三医院运动医学研究所 100191
【出 处】
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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会
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目的:筛选不同的细胞因子对体外分离并扩增的兔骨髓间充质干细胞进行刺激和诱导,为组织工程半月板重建提供种子细胞.方法:分离并经体外传代培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),种植复合于脱钙松质骨支架上.分别用结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor-basic,FGF-b),转化生长因子β3(transforming growth factor, TGF-β3)及成软骨诱导培养液刺激后,CCK-8法检测细胞增殖活性,检测DNA相对含量,检测氨基葡聚糖(glycosaminoglycan,GAG)相对含量,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-Time PCR)的方法从分子水平检测COL-1,COL-2,AGC等基因表达.结果:分离并传代的间充质干细胞生长良好.MSCs在FGF-b和成软骨诱导培养液刺激下,细胞增殖活性及DNA相对含量明显增高(P<0.05).成软骨诱导培养液组GAG明显增高(P<0.05).FGF-b组COL-1表达明显增高,成软骨诱导培养液组COL-2,AGC表达明显增高(P<0.05).结论:FGF-b和成软骨诱导液能够刺激复合支架上的MSCs增殖并表达不同的细胞外基质,为半月板组织工程重建提供了可靠来源的种子细胞.
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