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背景：尿道缺损是临床上常见的疾病,且治疗困难,组织工程技术的发展为其治疗提供了新的策略.但是种子细胞需要量大、来源受限阻碍了其发展和运用.脂肪来源的间充质干细胞(ADSC)具有自我更新、多向分化能力,以及来源广、易获取培养等特点,有望成为尿道组织工程种子细胞的来源.目的：观察ADSCs在平滑肌细胞(SMC)微环境下向SMC分化的能力,确定最佳共培养比例,以便为组织工程尿道的构建提供新的方法.方法：分离培养原代新西兰大白兔腹股沟ADSC和膀胱SMC,将生长良好的第3～5代细胞用于实验.实验组中ADSC与SMC以不同比例(3∶1、1∶1、1∶3)及不同方式共培养(直接共培养、transwell小室间接共培养),单独ADSC和单独SMC培养作为对照,连续培养7天.观察不同组中细胞的的增殖情况,RT-PCR分别检测两种细胞中平滑肌细胞表面标志物α-SMA、MYH-11、SM22α的表达情况,观察不同微环境下SMC对ADSC分化的影响.结果：细胞增殖实验中,ADSC与SMC以3∶1直接共培养条件下细胞增殖最快,培养2天后即进入增殖平衡期.RT-PCR结果表明,ADSC在SMC微环境中能被诱导高表达SMC表面标志物,不同共培养体系α-SMA、MYH-11、SM22 α的表达在ADSC中升高程度不同,其中直接共培养优于间接共培养,且以ADSC∶SMC=3∶1条件下表达升高幅度最为显著(α-SMA： 66.4±2.9、MYH-11：45.1±5.2、SM22α：61.7±3.0,p＜0.05),同时ADSC亦影响SMC中α-SMA、MYH-11、SM22 α的表达,以3∶1直接共培养是升高最为明显(α-SMA： 18.3±3.4、MYH-11：16.2±5.2、SM22α： 25.3±3.1, p＜0.05).结论：ADSC与SMC共培养时,在SMC微环境中能被诱导向SMC分化,直接共培养优于间接共培养,且最佳比例为3∶1.在此微环境中ADSC促进SMC中α-SMA、MYH-11、SM22 α表达也最明显.因此,ADSC可以作为组织工程尿道种子细胞的来源,以最佳比例种植能大大减少SMC的用量,并且优于单纯使用SMC作为种子细胞的构建.