体外不同方案诱导分化间充质干细胞用于组织工程半月板的可行性研究

来源 :首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wys8800
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  目的:筛选不同方案对体外分离并扩增的兔骨髓间充质干细胞进行刺激和诱导作用,为组织工程半月板提供可行的种子细胞诱导方案.方法:分离并经体外传代培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem ceils,MSCs),种植复合于脱钙松质骨支架上.分别用结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor-basic, FGF-b),转化生长因子β3 (transforming growth factor, TGF-β3)及成软骨诱导培养液刺激后,分别于刺激后1周、2周、4周用CCK-8法检测细胞增殖活性,检测DNA相对含量,检测氨基葡聚糖(glycosaminoglycan,GAG)相对含量,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-Time PCR)的方法从分子水平检测COL-1,COL-2,AGC等基因表达.结果:分离并传代的间充质干细胞生长良好.细胞增殖活性方面: FGF-b组和成软骨诱导培养液组较对照组明显增高(P<0.05).DNA相对含量方面:各实验组均较对照组明显增高(P<0.05),其中FGF-b组和成软骨诱导培养液组共培养1周、2周、4周都有明显增高(P<0.05).GAG相对含量方面:成软骨诱导培养液组明显增高(P<0.05).mRNA相对表达量方面:COL-1相对表达FGF-b组明显增高(P<0.05),COL-2相对表达成软骨诱导培养液组明显增高(P<0.05),AGC相对表达成软骨诱导培养液组明显增高(P<0.05).单纯CTGF组和TGF-β3组的mRNA相对表达没有明显提高(P>0.05).结论:FGF-b和成软骨诱导液分别能够刺激复合支架上的MSCs增殖并表达不同的细胞外基质,为半月板组织工程重建提供了可靠来源的种子细胞.
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