【摘 要】
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目的：明确NDRG2对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响,探索NDRG2对脑缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法：构建NDRG2基因缺失的转基因小鼠(Ndrg2-/-),以其同窝野生型小鼠(WT)做对照.建立MCAO模型,缺血60 min后再灌注24 hr,通过Longa神经功能学评分、TTC染色、NeuN染色明确NDRG2对脑缺血再灌注损伤的影响.微透析定量检测脑内细胞外液谷氨酸的含量,星形胶质细胞对谷氨
【机 构】
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陆军总医院麻醉科、中国人民解放军第四军医大学西京医院麻醉科、中国人民解放军第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
【出 处】
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中国医师协会麻醉学医师分会2016年中青年论坛
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目的：明确NDRG2对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响,探索NDRG2对脑缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法：构建NDRG2基因缺失的转基因小鼠(Ndrg2-/-),以其同窝野生型小鼠(WT)做对照.建立MCAO模型,缺血60 min后再灌注24 hr,通过Longa神经功能学评分、TTC染色、NeuN染色明确NDRG2对脑缺血再灌注损伤的影响.微透析定量检测脑内细胞外液谷氨酸的含量,星形胶质细胞对谷氨酸清除实验、Western blot方法检测NDRG2谷氨酸转运和转运体表达的影响.免疫共沉淀方法检测星形胶质细胞内NDRG2与Na+-K+-ATPase B 1的相互作用,病毒转染、Western blot方法、谷氨酸清除率实验检测Na+-K+-ATPase B 1对NDRG2调节的谷氨酸转运和转运体表达的影响.结果：NDRG2缺失可以增加小鼠神经功能学评分和脑梗死容积(p<0.01),Neu N阳性神经元数减少(p<0.01),脑内细胞外液谷氨酸浓度增加(p< 0.01),星形胶质细胞对谷氨酸的摄取和清除能力降低(p<0.01),EAAT1和EAAT2蛋白质表达水平降低(p<0.01).NDRG2慢病毒可以逆转上述现象(p<0.05).星形胶质细胞内源性的NDRG2可以与Na+-K+-ATPaseβ1相互作用.Na+-K+-ATPaseβ1慢病毒可以显著上调EAAT1和EAAT2蛋白质的表达水平(p< 0.01),提高Ndrg2-/-星形胶质细胞清除谷氨酸的能力(p<0.05).结论：NDRG2可以通过与Na+-K+-ATPase相互结合,调节星形胶质细胞上EAAT1和EAAT2的表达,促进谷氨酸再摄取,从而发挥脑缺血再灌注损伤的神经保护作用.
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