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摘要：目的：探讨微生物检验质控方法，提高微生物检测水平。
方法：对我单位疾控系统实验室间盲样进行对比性检测。
结果：依据上级CDC传达的反馈信息，本次考核，我疾病预防控制中心取得了满意的成绩。
结论：对比性检测结果证明我疾病预防控制中心的检测能力和总体检测水平具有很明显的进步。
关键词：疾病预防控制中心 卫生微生物 分析 检验质控
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）06-0405-01
作为疾病预防控制中心进行疾病与控制工作和执行卫生行政执法的基本手段和基础，实验室内对卫生微生物进行检验是卫生防病工作和卫生监督工作的基本技术支持[1]。承担盲样的分离鉴定工作、积极开展实验室间能力验证和对比活动、定期进行实验室质控能够有效的促进各实验室处理各种样品过程中的技术操作能力和分析鉴定能力的提高[2]。文章根据我疾病控制预防中心质控考核结果对卫生微生物检验质控技术进行了分析与探讨，结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料。
1.1.1 诊断血清。由我省生物制品研究所生产而且处于有效期内的0157∶H7诊断血清以及致病性大肠埃希菌诊断血清。
1.1.2 培养基。此次卫生微生物检验质控选用由杭州天和微生物试剂有限责任公司制造的细菌生化鉴定系统，采用我省疾病预防控制中心微生物试剂厂生产培养基进行检验质控。培养基皆处于有效期内。
1.1.3 质控样品。此次卫生微生物检验质控选用的质控样品冻干盲样菌种两份（编号为1号和2号），均由我省CDC下发。
1.2 检验质控方法。严格按照GB/T4789.1～4789.31-2003食品卫生微生物检验质控国标进行。
2 实验室检验
2.1 增菌步骤。在无菌环境中向开启后的真空冻干菌种管添加1.0ml无菌生理盐水进行菌种溶解；在分离培养和接种增菌过程中，选用两2支营养肉汤做增菌（复苏）培养；转中增菌液和分离平板时间为4.5至6.5小时，再次分离时间差是18.5至24.5小时。观察显示各增菌基具体生长情况如下表：
2.1.1 取生长情况浑浊的营养肉汤、8%NaC1肉汤各1环，分别接种于血琼脂平板和普通营养琼脂平板上，培养温度设为37℃，培养时间为24.5小时；将从生长情况浑浊的的营养肉汤液、TTB中取出的各1环分别接种于EMB、WS、SS平板上，温度设为37℃，培养时间24.5小时。分别观察每个平板上菌落的生长情况。
2.1.2 在乳糖发酵管、普通营养琼脂平板、血琼脂平板、EMB、WS、SS平板上分别接种一环样液，温度设为37℃，培养时间24.5小时。
2.2 分离培养。
2.2.1 增菌后分离培养。普通营养琼脂平板上菌落呈浅黄色，涂片镜检后发现呈葡萄状，格兰阳性球菌；血琼脂平板上菌落有溶血环，呈钱金黄色。两者菌落皆来自1号样。
EMB平板上菌落具有金属光泽，颜色为深紫色，将菌落进行涂片镜检后发现无芽孢、格兰阴性杆菌；SS、WW平板上菌落大小中等，不透明，菌落颜色为粉红色。其中菌落皆来自2号样。
2.2.2 直接分离。1号样菌：血琼脂平板上无溶血环，菌落颜色为浅黄色；普通琼脂平板上菌落呈浅黄色，两者乳糖发酵不产气，产酸。2号样菌：EMB平板上菌落具有金属光泽，颜色呈深紫色；SS、WS平板上菌落不透明、大小中等、颜色呈粉红色、形状为圆形，三者乳糖发酵产气，产酸。
2.2.3 经肉汤增菌后1号和2号原样中，菌落生长特征与以上描述一致。
2.2.4 其他增菌液情况。接种于普通营养琼脂平板、血琼脂平板、EMB、SS、WS平板中生长结果为澄清的增菌液中无细菌生长。
2.3 生化试验。
2.3.1 进行血浆凝固酶试验，试验材料为从分离培养生长为1号样菌落的平板上取出的呈浅金黄色、G+球菌可疑菌落，实验结果为阳性反应。取出适量可疑菌落进行生化试验，实验结果如表2。
2.3.2 从分离培养生长为2号的菌落平板上取出至少6个G-杆菌可疑菌落。并将选出的可疑菌落接种于KI琼脂斜面，温度设为37℃，培养时间为24.5小时。根据可疑菌落生长情况，可以确定实验中可疑菌落在KI琼脂斜面上反应结果与大肠埃希菌反应特征相吻合，具体生长情况见表3。
根据实验结果和菌落基本特征，判断1号菌为金黄色葡萄球菌，判断2号菌为出血性大肠埃希菌0157H7。我省CDC反馈信息证明质控结果正确无误。
3 讨论
疾病预防控制中心对微生物检验质控的准确性对于整个地区卫生检验工作具有非常重要的意义。对于检验质控工作，最基本的偏差消除有效手段就是实验室间能力验证和相互比对[3]，找出正确答案，同时又能够促进实验室检验质控水平的提升。本次试验室卫生微生物检验质控结果准确，证明我疾病预防控制中心检验能力合格。
参考文献
[1] 李丽颖，高芳群.卫生微生物检验质控结果的分析[J].当代医学，2013，19（7）：94-95
[2] 马桂华.疾病控制机构卫生微生物检验质量控制管理[J].医学信息：中旬刊，2011，24（9）：4980
[3] 李贻汉，蔡妙森，王琳，陈敏.卫生微生物检验的质量控制[J].中国卫生质量管理，2010，15（6）：78-80
方法：对我单位疾控系统实验室间盲样进行对比性检测。
结果：依据上级CDC传达的反馈信息，本次考核，我疾病预防控制中心取得了满意的成绩。
结论：对比性检测结果证明我疾病预防控制中心的检测能力和总体检测水平具有很明显的进步。
关键词：疾病预防控制中心 卫生微生物 分析 检验质控
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）06-0405-01
作为疾病预防控制中心进行疾病与控制工作和执行卫生行政执法的基本手段和基础，实验室内对卫生微生物进行检验是卫生防病工作和卫生监督工作的基本技术支持[1]。承担盲样的分离鉴定工作、积极开展实验室间能力验证和对比活动、定期进行实验室质控能够有效的促进各实验室处理各种样品过程中的技术操作能力和分析鉴定能力的提高[2]。文章根据我疾病控制预防中心质控考核结果对卫生微生物检验质控技术进行了分析与探讨，结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料。
1.1.1 诊断血清。由我省生物制品研究所生产而且处于有效期内的0157∶H7诊断血清以及致病性大肠埃希菌诊断血清。
1.1.2 培养基。此次卫生微生物检验质控选用由杭州天和微生物试剂有限责任公司制造的细菌生化鉴定系统，采用我省疾病预防控制中心微生物试剂厂生产培养基进行检验质控。培养基皆处于有效期内。
1.1.3 质控样品。此次卫生微生物检验质控选用的质控样品冻干盲样菌种两份（编号为1号和2号），均由我省CDC下发。
1.2 检验质控方法。严格按照GB/T4789.1～4789.31-2003食品卫生微生物检验质控国标进行。
2 实验室检验
2.1 增菌步骤。在无菌环境中向开启后的真空冻干菌种管添加1.0ml无菌生理盐水进行菌种溶解；在分离培养和接种增菌过程中，选用两2支营养肉汤做增菌（复苏）培养；转中增菌液和分离平板时间为4.5至6.5小时，再次分离时间差是18.5至24.5小时。观察显示各增菌基具体生长情况如下表：
2.1.1 取生长情况浑浊的营养肉汤、8%NaC1肉汤各1环，分别接种于血琼脂平板和普通营养琼脂平板上，培养温度设为37℃，培养时间为24.5小时；将从生长情况浑浊的的营养肉汤液、TTB中取出的各1环分别接种于EMB、WS、SS平板上，温度设为37℃，培养时间24.5小时。分别观察每个平板上菌落的生长情况。
2.1.2 在乳糖发酵管、普通营养琼脂平板、血琼脂平板、EMB、WS、SS平板上分别接种一环样液，温度设为37℃，培养时间24.5小时。
2.2 分离培养。
2.2.1 增菌后分离培养。普通营养琼脂平板上菌落呈浅黄色，涂片镜检后发现呈葡萄状，格兰阳性球菌；血琼脂平板上菌落有溶血环，呈钱金黄色。两者菌落皆来自1号样。
EMB平板上菌落具有金属光泽，颜色为深紫色，将菌落进行涂片镜检后发现无芽孢、格兰阴性杆菌；SS、WW平板上菌落大小中等，不透明，菌落颜色为粉红色。其中菌落皆来自2号样。
2.2.2 直接分离。1号样菌：血琼脂平板上无溶血环，菌落颜色为浅黄色；普通琼脂平板上菌落呈浅黄色，两者乳糖发酵不产气，产酸。2号样菌：EMB平板上菌落具有金属光泽，颜色呈深紫色；SS、WS平板上菌落不透明、大小中等、颜色呈粉红色、形状为圆形，三者乳糖发酵产气，产酸。
2.2.3 经肉汤增菌后1号和2号原样中，菌落生长特征与以上描述一致。
2.2.4 其他增菌液情况。接种于普通营养琼脂平板、血琼脂平板、EMB、SS、WS平板中生长结果为澄清的增菌液中无细菌生长。
2.3 生化试验。
2.3.1 进行血浆凝固酶试验，试验材料为从分离培养生长为1号样菌落的平板上取出的呈浅金黄色、G+球菌可疑菌落，实验结果为阳性反应。取出适量可疑菌落进行生化试验，实验结果如表2。
2.3.2 从分离培养生长为2号的菌落平板上取出至少6个G-杆菌可疑菌落。并将选出的可疑菌落接种于KI琼脂斜面，温度设为37℃，培养时间为24.5小时。根据可疑菌落生长情况，可以确定实验中可疑菌落在KI琼脂斜面上反应结果与大肠埃希菌反应特征相吻合，具体生长情况见表3。
根据实验结果和菌落基本特征，判断1号菌为金黄色葡萄球菌，判断2号菌为出血性大肠埃希菌0157H7。我省CDC反馈信息证明质控结果正确无误。
3 讨论
疾病预防控制中心对微生物检验质控的准确性对于整个地区卫生检验工作具有非常重要的意义。对于检验质控工作，最基本的偏差消除有效手段就是实验室间能力验证和相互比对[3]，找出正确答案，同时又能够促进实验室检验质控水平的提升。本次试验室卫生微生物检验质控结果准确，证明我疾病预防控制中心检验能力合格。
参考文献
[1] 李丽颖，高芳群.卫生微生物检验质控结果的分析[J].当代医学，2013，19（7）：94-95
[2] 马桂华.疾病控制机构卫生微生物检验质量控制管理[J].医学信息：中旬刊，2011，24（9）：4980
[3] 李贻汉，蔡妙森，王琳，陈敏.卫生微生物检验的质量控制[J].中国卫生质量管理，2010，15（6）：78-80