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【摘要】本文对悬钩子木中总黄酮对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢清除作用进行了研究。结果表明，悬钩子木中总黄酮对羟自由基、超氧阴离子、过氧化氢有较好的清除作用。
【关键词】悬钩子木总黄酮抗氧化性
Studv on the Antioxidallt Activitv of Total Flavonoids in the RamulusRuBi
JIN Lian1FU Zhi1BAOYu-Min2ZHANG Li2KOU Nan2
【Abstract】In this paper，scavenging effect of flavonoids extracted from RamulusRuBi on hydroxyl free radical，superoxide anion free radical．hydrogen peroxide was studied．Tile results show that the Flavonoids from RamulusRuBi have a better scavening effect on hydroxyl free radical．superoxide anion flee radical and hydrogen peroxide free radical．
【Keywords】 RamulusRuB I Total Flavonoids Antioxidant Activity
蒙药材悬钩子木(博格日乐吉根)为蔷薇科植物库页悬钩子的干燥茎枝，夏秋二季采收，除上杂质，干燥。性味：甘，微苦，软，平［1］。功能与主治：解表，调元，止咳，用于未熟热，瘟疫，讧热，感冒，肺热，咳嗽，“赫依”热［2-4］。
黄酮类化合物是临床上治疗心血管疾病的良药，有强心、扩张冠状血管、抗心律失常、降压、降低血胆固醇、降低毛细血管渗透性、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用。许多黄酮类化合物具有抗癌作用，其作用方式是能减少甚至消除一些化学致癌物的致癌毒性；另外它们有抗肝中毒和保肝作用，例水乙蓟素，临床用于治疗急慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤［1］。
1实验部分
1．1实验仪器、试剂及实验材料：721分光光度计(上海第三分析仪器厂)，UV一240紫外可见分光光度计(日本岛津)；芦丁(中国药品生物制品检定所，批号10080-200306)，乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸亚铁铵、邻二氮菲、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等均为分析纯，实验用水为二次石英亚沸蒸馏水；悬钩子木(购于内蒙古通辽市)。
1．2清除羟基自由基：利用Fenton反应产生自由基：H2O2=Fe2+=·OH+OH-+Fe3+，Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物，加入提取液后，减弱了·OH对Fe2+——邻二氮菲的氧化作用，引起吸光度变化，测定黄酮类化合物对·OH的清除能力。
清除率的计算公式：P=A样品-A损A未损-A损×100％(A样品、A未损、A损分别是加入提取液的羟基自由基的体系，不加H2O2及加入H2O2的吸光度值)。
取7个10mL的比色管，在1号管中加入0．20mL7．5mol／L邻二氮菲溶液，在2～7号比色管中加入0．20mL 7．5mol／L硫酸亚铁铵溶液，0．20mL7．5mol／L的邻二氮菲溶液以及1．00mL Tri s-HCI(pH=7．4)缓冲溶液。在3～7号比色管中加1．00mL7.5mol/L，过氧化氢。再向4～7号比色管中加入适量黄酮类化合物提取液，用二次蒸馏水定容至刻度，混匀，在37℃水浴中反应1 h，以水为参比，在508nm处测定吸光度值，计算清除率P。
1.3清除超氧自由基：取9支比色管，均加入4．4mL pH=8．2的Tris-HCl缓冲液，置于25℃水浴中预热20min，2～9号管中加入样品溶液，在1~5号管中加入0．5mL邻苯三酚溶液混匀后，置于25℃水浴中反应4min。9支比色管加入8mol／LHCI 3d终止反应，以二次蒸馏水为参比，在320nm处测吸光度值，计算清除率P。
清除率P(％)=［Ao-(A1-A2)］A0×100％
(A。A1、A2分别是未加提取液的超氧阴离子自由基的体系，加邻苯三酚及不加邻苯三酚的吸光度值)。
1．4清除过氧化氢能力：取11支洁净比色管，在1～6号管中加入5mL pH=7．4的过氧化氢一磷酸盐溶液，在2～11号管中加入适量的样品溶液，11支管加二次水定容至10mL，混匀后在200nm处测定吸光度值，计算清除率。
清除率P(％)=［A0-(A1-A2)］A0×100％
(A0、A1、A2分别是未加提取液的过氧化氢体系，加过氧化氢一磷酸溶液及不加过氧化氢一磷酸溶液的吸光度值)。
3结果讨论
3．1清除羟自由基：精密量取提取液适量，按1．2的实验方法，测定清除率，结果见图1。
图1悬钩子水中总黄酮清除羟自由基能力
实验结果表明：随着样品浓度的增加，清除率呈增大趋势。
3．2清除超氧自由基：精密量取提取液适量，按1．3的实验方法，测定清除率，结果见图2。
图2悬钩子木中总黄酮清除超氧自由基能力实验结果表明：当浓度在0．011476～0．02250mg／mL时，清除率跟浓度呈线性关系，在0．02250mg／mL时达到最大。
3．3清除过氧化氢能力：精密量取提取液适量，按1．4的实验方法，测定清除率，结果见图3。
图3悬钩子木中总黄酮清除过氧化氢能力实验结果表明：当浓度在0．011476～0．02295mg／mL时，清除率跟浓度成线性关系，此后随浓度的增加清除率变化不大。
参考文献
1付亲勤、台建祥等．生物类黄酮的研究及应用概况［J］．食品与发酵工业，1999，25(6)：25
2江苏新医学院．中国药品材料［M］．科学技术出版社，1986，253l～2533
3黄锁义．超声波提取九里香总黄酮及其鉴别［J］．时珍国医国药，2006，17(3)：395～396
4吴春、陈树林．菟丝子黄酮体外清除自由基活性的研究［J］．天然产物研究与开发，2005，77(5)
作者单位：028000内蒙古通辽职业学院1
028043内蒙古民族大学化学学院2
注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”
【关键词】悬钩子木总黄酮抗氧化性
Studv on the Antioxidallt Activitv of Total Flavonoids in the RamulusRuBi
JIN Lian1FU Zhi1BAOYu-Min2ZHANG Li2KOU Nan2
【Abstract】In this paper，scavenging effect of flavonoids extracted from RamulusRuBi on hydroxyl free radical，superoxide anion free radical．hydrogen peroxide was studied．Tile results show that the Flavonoids from RamulusRuBi have a better scavening effect on hydroxyl free radical．superoxide anion flee radical and hydrogen peroxide free radical．
【Keywords】 RamulusRuB I Total Flavonoids Antioxidant Activity
蒙药材悬钩子木(博格日乐吉根)为蔷薇科植物库页悬钩子的干燥茎枝，夏秋二季采收，除上杂质，干燥。性味：甘，微苦，软，平［1］。功能与主治：解表，调元，止咳，用于未熟热，瘟疫，讧热，感冒，肺热，咳嗽，“赫依”热［2-4］。
黄酮类化合物是临床上治疗心血管疾病的良药，有强心、扩张冠状血管、抗心律失常、降压、降低血胆固醇、降低毛细血管渗透性、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用。许多黄酮类化合物具有抗癌作用，其作用方式是能减少甚至消除一些化学致癌物的致癌毒性；另外它们有抗肝中毒和保肝作用，例水乙蓟素，临床用于治疗急慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤［1］。
1实验部分
1．1实验仪器、试剂及实验材料：721分光光度计(上海第三分析仪器厂)，UV一240紫外可见分光光度计(日本岛津)；芦丁(中国药品生物制品检定所，批号10080-200306)，乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸亚铁铵、邻二氮菲、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等均为分析纯，实验用水为二次石英亚沸蒸馏水；悬钩子木(购于内蒙古通辽市)。
1．2清除羟基自由基：利用Fenton反应产生自由基：H2O2=Fe2+=·OH+OH-+Fe3+，Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物，加入提取液后，减弱了·OH对Fe2+——邻二氮菲的氧化作用，引起吸光度变化，测定黄酮类化合物对·OH的清除能力。
清除率的计算公式：P=A样品-A损A未损-A损×100％(A样品、A未损、A损分别是加入提取液的羟基自由基的体系，不加H2O2及加入H2O2的吸光度值)。
取7个10mL的比色管，在1号管中加入0．20mL7．5mol／L邻二氮菲溶液，在2～7号比色管中加入0．20mL 7．5mol／L硫酸亚铁铵溶液，0．20mL7．5mol／L的邻二氮菲溶液以及1．00mL Tri s-HCI(pH=7．4)缓冲溶液。在3～7号比色管中加1．00mL7.5mol/L，过氧化氢。再向4～7号比色管中加入适量黄酮类化合物提取液，用二次蒸馏水定容至刻度，混匀，在37℃水浴中反应1 h，以水为参比，在508nm处测定吸光度值，计算清除率P。
1.3清除超氧自由基：取9支比色管，均加入4．4mL pH=8．2的Tris-HCl缓冲液，置于25℃水浴中预热20min，2～9号管中加入样品溶液，在1~5号管中加入0．5mL邻苯三酚溶液混匀后，置于25℃水浴中反应4min。9支比色管加入8mol／LHCI 3d终止反应，以二次蒸馏水为参比，在320nm处测吸光度值，计算清除率P。
清除率P(％)=［Ao-(A1-A2)］A0×100％
(A。A1、A2分别是未加提取液的超氧阴离子自由基的体系，加邻苯三酚及不加邻苯三酚的吸光度值)。
1．4清除过氧化氢能力：取11支洁净比色管，在1～6号管中加入5mL pH=7．4的过氧化氢一磷酸盐溶液，在2～11号管中加入适量的样品溶液，11支管加二次水定容至10mL，混匀后在200nm处测定吸光度值，计算清除率。
清除率P(％)=［A0-(A1-A2)］A0×100％
(A0、A1、A2分别是未加提取液的过氧化氢体系，加过氧化氢一磷酸溶液及不加过氧化氢一磷酸溶液的吸光度值)。
3结果讨论
3．1清除羟自由基：精密量取提取液适量，按1．2的实验方法，测定清除率，结果见图1。
图1悬钩子水中总黄酮清除羟自由基能力
实验结果表明：随着样品浓度的增加，清除率呈增大趋势。
3．2清除超氧自由基：精密量取提取液适量，按1．3的实验方法，测定清除率，结果见图2。
图2悬钩子木中总黄酮清除超氧自由基能力实验结果表明：当浓度在0．011476～0．02250mg／mL时，清除率跟浓度呈线性关系，在0．02250mg／mL时达到最大。
3．3清除过氧化氢能力：精密量取提取液适量，按1．4的实验方法，测定清除率，结果见图3。
图3悬钩子木中总黄酮清除过氧化氢能力实验结果表明：当浓度在0．011476～0．02295mg／mL时，清除率跟浓度成线性关系，此后随浓度的增加清除率变化不大。
参考文献
1付亲勤、台建祥等．生物类黄酮的研究及应用概况［J］．食品与发酵工业，1999，25(6)：25
2江苏新医学院．中国药品材料［M］．科学技术出版社，1986，253l～2533
3黄锁义．超声波提取九里香总黄酮及其鉴别［J］．时珍国医国药，2006，17(3)：395～396
4吴春、陈树林．菟丝子黄酮体外清除自由基活性的研究［J］．天然产物研究与开发，2005，77(5)
作者单位：028000内蒙古通辽职业学院1
028043内蒙古民族大学化学学院2
注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”