钝顶螺旋藻在发酵罐中培养条件的优化

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  螺旋藻(Spirulina platensis)是一种主要分布于热带、亚热带地区淡水或盐碱性湖泊中的多细胞丝状蓝藻,属蓝藻门(Cyomophyta)、颤藻科(Oscilatoriaceae)、螺旋藻屬(Spirulina),是地球上最早出现的光合生物之一,在这个星球上已存在了3 5亿年。本文主要通过改变螺旋藻在发酵罐中的各种培养条件如温度、光照强度、通气量和搅拌转速,以螺旋藻单位体积产量为衡量依据,观察螺旋藻的产率变化,获得在实验室条件下螺旋藻培养的最佳条件,以便为人们创造更多的价值提供理论基础和依据。
  钝顶螺旋藻( Spirulina platensis)是一种低等自养生物,能利用阳光进行光合作用合成高含量蛋白质,其干基蛋白质含量达56.5%,并且具有合理的氨基酸组成。与我国过去研究的小球藻相比,螺旋藻形成细胞壁的纤维素极少,易被人或动物消化吸收。因此自60年代以来,作为一种单细胞蛋白引起了国际上的高度重视,许多国家对其进行了广泛的研究和人工培养。
  发酵罐是广泛用于规模培养微生物的生物反应器,具有技术条件成熟、易于控制等优点,只要配套光源 ,就可成为培养微藻的反应器 ,因此可利用现有发酵工程技术开展微藻的研究开发工作 ,国内外许多学者在这方面都做了尝试。本研究采用搅拌式发酵罐,通过正交实验法对螺旋藻培养过程中搅拌转速、通气量和光照强度和温度等培养条件进行优化组合,获得搅拌式发酵罐中螺旋藻的最佳培养条件。
  一 、材料与方法
  实验材料
  钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)由中科院湖北水生生物研究所淡水藻种库提供;藻种采用Zarrouk液体保存法。
  培养液与接种
  螺旋藻培养Zarrouk培养基(g/L)
  接种:取对数生长期的螺旋藻培养液,直接接种。
  实验方法
  实验采用干重法,利用菌体过滤器测量藻种的生物量,取生长5d的藻液30mL,用直径7cm的单层定性滤纸过滤采收,放在烘干箱中50℃下烘干5~6小时,分析天平称重。精确到0.1mg。
  主要研究:藻种对螺旋藻生长的影响
  搅拌速度对螺旋藻生长的影响
  通气量对螺旋藻生长的影响
  光强对螺旋藻生长的影响
  温度对螺旋藻生长的影响
  二、结果与分析
  结果 单因素实验 见表1:
  由此可见,搅拌速度越快,螺旋藻干重量越小;
  分析
  1.藻种对螺旋藻生长的影响
  生产中应选用个体大,浮性好,生长快的藻种。
  2.转速对螺旋藻生长的影响
  发酵罐中藻体生物量测定是掌握藻体生长情况的基本参数之一。本实验采用干重法,测定培养基中的藻体生物量。该法基本依据是螺旋藻作为微小粒子能均匀悬浮于培养基中,通过测定干重就可了解藻体生长情况,因此该法与其他方法比较,具有迅速、简单、相对准确的优点。
  搅拌转速太快会因机械剪切作用而使藻体断裂,从而使螺旋藻的生长受到抑制。每隔30min检测一次溶解氧,发现随着生物量的增加,溶解氧值也逐渐增加,但夜间较白天略有降低,这是由于夜间同白天相比光照相对较弱,螺旋藻的生长速度降低的缘故。
  3.通气量对螺旋藻生长的影响
  当间断通气不搅拌时,螺旋藻生长状况较差,原因有以下几个:间断通气造成大量藻体贴壁生长,反应器内壁附着的藻体相对较多,这对采光有很大的影响;间断通气使搅拌不均匀,不通气时罐内培养液得不到充分的循环,使处于罐中心的藻体得不到足够的光照,影响藻体生长,这种情况在藻体密度较大时更为突出;通气的另一个作用是使氧气放出,过高的氧气浓度对藻体的生长有抑制作用。
  4.光强对螺旋藻生长的影响
  藻类进行光合作用所需的能量来自光能。在低光强下光合作用速率与呼吸作用的速率接近,此时藻类只能保持内呼吸或基础代谢,因此其生长缓慢。在高光强时,藻体细胞获得较高的能量进行光合作用,这时光合作用的速率大于呼吸速率,细胞生长速率加大。当光强过强时,藻体细胞产生光氧化,细胞生长速率减慢,甚至停止。光强在3.0klux 时,螺旋藻生长能迅速达到对数生长期。
  5.温度对螺旋藻生长的影响
  不同温度对螺旋藻生长影响不同,从实验来看,保证螺旋藻较高生长速率的适宜温度在30℃左右。
  三、总结
  钝顶螺旋藻在发酵罐中培养的优化条件是:搅拌速度为80rpm,温度为30℃,通气量为0.5L/h,光强为3.0klux。
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