重组牛痘病毒表达HTLV-Ⅲ包膜基因

来源 :国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hangarfield
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已知获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病原Ⅲ型人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-Ⅲ)的包膜(env)基因规定约860个氨基酸的一级多肽,后者经糖基化形成一种分子量为160,000的前体(gp160),并进一步产生成熟的膜相关蛋白gp120和gp41。本文描述了通过牛痘病毒载体的完整env基因的表达,提供了env多肽的合成、糖基化、加工和膜转运的证据。作者将含有HTLV-Ⅲ全部env基因的DNA片段连接于牛痘病毒启动子下游,构成分别含有0和70个碱基对(bp)的env领头顺序的重组牛痘病毒V25和V26。两个重组体皆为胸苷激酶阴性和β-半乳糖苷酶阳性。以纯化的V25和V26感染细胞,24小时后取细胞溶解产物经12烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳, It is known that the envelope (env) gene of pathogenic agent type III human T-lymphotropic virus (HTLV-III) of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) defines a first order polypeptide of about 860 amino acids which is glycosylated A precursor of 160,000 in molecular weight (gp160), and further the mature membrane-associated proteins gp120 and gp41. This article describes the expression of the complete env gene by vaccinia virus vectors and provides evidence of the synthesis, glycosylation, processing, and membrane trafficking of env polypeptides. The authors linked a DNA fragment containing the entire env gene of HTLV-III to the downstream of the vaccinia virus promoter to form the env-leader recombinant vaccinia viruses V25 and V26 containing 0 and 70 base pairs (bp), respectively. Both recombinants were thymidine kinase negative and beta-galactosidase positive. Cells were infected with purified V25 and V26, and after 24 hours the cell lysates were subjected to 12 sodium alkylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,
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