【摘 要】
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目的:观察糖尿病大鼠精囊脏器系数及形态学改变和精囊中神经生长因子(NGF)和胆碱能毒蕈碱M3受体含量的变化,以探讨这些变化在糖尿病性不育发病机制中的作用,为糖尿病不育的临
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目的:观察糖尿病大鼠精囊脏器系数及形态学改变和精囊中神经生长因子(NGF)和胆碱能毒蕈碱M3受体含量的变化,以探讨这些变化在糖尿病性不育发病机制中的作用,为糖尿病不育的临床防治提供理论依据。 方法:1.成年雄性普通级SD大鼠15只,体重300~400 g。其中10只制备糖尿病模型(D组),余5只为对照组(C组)。禁食24h后,用新鲜配制的链脲佐菌素(STZ)溶液,按60 mg/Kg的剂量腹腔注射,制备糖尿病(DM)大鼠模型。72 h后,测定大鼠尾静脉血糖,以空腹血糖连续3 d≥16.7 mmol/L作为成模标准。每周测血糖一次,以确定大鼠维持高血糖状态。正常对照组仅给予同体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。两组大鼠均给予自由饮食。造模8周后,称体重测血糖后处死后全部大鼠,取精囊组织称重、固定,石蜡包埋,切片行HE染色,神经生长因子(NGF)和胆碱能毒蕈碱M3受体(M-ChR)这两个指标均采用免疫组织化学(IHC)方法染色,每只精囊选取两张切片,每张切片随机选取5个视野(×200倍),Image-pro Plus6.0图像处理分析软件分析染色区的平均累积光密度(IOD)(样品区域累计光密度/样品区域面积,sum IOD/sample sum area),观察NGF和M3阳性表达的变化。 2.运用SPSS统计软件,所有数据均采用T检验,P<0.05差异具有统计学意义。 结果:1.精囊的脏器系数与C组相比,D组大鼠的精囊脏器系数明显降低,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。 2.HE染色 C组大鼠的精囊结构完整,肌层的平滑肌细胞和腺内上皮细胞胞浆被染成红色,形态规整,核蓝色,染色均匀。D组精囊腺内上皮胞浆变薄,结构紊乱,肌细胞明显减少,结缔组织增多。 3.免疫组织化学 M3免疫组织化学阳性部位主要位于精囊的肌层和上皮细胞层,D组阳性强度减弱,上皮层减弱程度尤为明显;C组NGF免疫组化阳性部位主要位于精囊的上皮细胞层,D组与 C组比较明显增强。M3与 NGF的C组和D组间的平均IOD差异均具有统计学意义。 结论:精囊脏器系数和精囊形态的改变说明,高血糖对大鼠的精囊组织有一定程度的损伤,这可能会影响到精囊的功能有从而影响精液的质量;精囊中NGF和M3受体在糖尿病鼠精囊中表达的改变提示糖尿病可致精囊自主神经病变。
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