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目的: 从p38MAPK、JNK信号通路角度，探讨隔药灸“天枢”、“气海”穴调控IBD内脏痛的镇痛机制，拟阐释艾灸调节IBD内脏痛的信号通路途径及关键信息分子，为艾灸镇痛机制的阐明提供科学实验资料。 方法: 1.雄性SD大鼠随机分为六组:正常组、模型组、隔药灸组、假隔药灸组、p38MAPK抑制剂组、DMSO溶媒对照组;参照Morris法，将5％TNBS、乙醇、双蒸水按4∶1∶1比例混合进行灌肠用于制备IBD内脏痛大鼠模型。正常组:空白对照，不进行任何干预;隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双）、气海进行隔药灸，每天1次，每次每穴灸2炷，连续7天;假隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双)、气海，但不点燃艾炷，余同隔药灸组;p38MAPK抑制剂组鞘内注射p38MAPK特异性阻断剂SB203580，每天1次，连续7天; DMSO溶媒对照组鞘内注射2％ DMSO。通过测定AWR评分、 MWT和TWL观察隔药灸对IBD内脏痛大鼠痛行为的调节作用。结肠HE染色后光镜下观察病理学改变和损伤评分。应用Western Blot法检测各组大鼠脊髓p38MAPK、ELK-1及MSK1磷酸化蛋白表达情况;应用Real-time PCR方法检测各组大鼠脊髓p38MAPK、ELK-1及MSK1mRNA的表达情况，从p38MAPK信号通路探讨隔药灸对炎症性肠病内脏痛大鼠的中枢镇痛机制。 2.雄性SD大鼠随机分为六组:正常组、模型组、隔药灸组、假隔药灸组、JNK抑制剂组、DMSO溶媒对照组;参照Morris法，将5％TNBS、乙醇、超纯水按4∶1∶1比例混合进行灌肠用于制备IBD内脏痛大鼠模型。正常组:空白对照，不进行任何干预;隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双）、气海进行隔药灸，每天1次，每次每穴灸2炷，连续7天;假隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双)、气海，但不点燃艾炷，余同隔药灸组;JNK抑制剂组鞘内注射JNK特异性阻断剂SP600125，每天1次，连续7天; DMSO溶媒对照组鞘内注射5％ DMSO。通过测定AWR评分、MWT和TWL观察隔药灸对IBD内脏痛大鼠痛行为的调节作用。结肠HE染色后光镜下观察病理学改变和损伤评分。应用Western Blot法检测各组大鼠脊髓JNK、C-jun及ATF-2磷酸化蛋白表达情况;应用Real-timePCR方法检测各组大鼠脊髓JNK、C-jun及ATF-2mRNA的表达情况，从JNK信号通路探讨隔药灸对炎症性肠病内脏痛大鼠的中枢镇痛机制。 3.雄性SD大鼠随机分为四组:正常组、模型组、隔药灸组、假隔药灸组;参照Morris法，将5％TNBS、乙醇、超纯水按4∶1∶1比例混合进行灌肠用于制备IBD内脏痛大鼠模型。正常组:空白对照，不进行任何干预;隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双）、气海进行隔药灸，每天1次，每次每穴灸2炷，连续7天;假隔药灸组:将药饼和艾炷置于天枢(双)、气海，但不点燃艾炷，余同隔药灸组。通过测定AWR评分、MWT和TWL观察隔药灸对IBD内脏痛大鼠痛行为的调节作用。结肠HE染色后光镜下观察病理学改变和损伤评分。检测各组大鼠脊髓ASK1、MKK3、MKK6的磷酸化蛋白及mRNA的表达情况，探讨隔药灸对炎症性肠病内脏痛大鼠p38MAPK上游信号通路的调节作用;检测各组大鼠脊髓TAK1、MKK4、MKK7磷酸化蛋白及mRNA的表达情况，探讨隔药灸对炎症性肠病内脏痛大鼠JNK上游信号通路的调节作用。 结果: 1.对痛行为影响: (1) AWR评分:IBD内脏痛大鼠AWR评分在各个压力梯度刺激下均明显升高（P＜0.01，P＜0.05），隔药灸、p38MAPK抑制剂、JNK抑制剂干预后均能降低AWR评分(P＜0.01，P＜0.05)，假隔药灸和DMSO溶媒干预对AWR评分无明显作用（均P＞0.05）。 (2) MWT: IBD内脏痛大鼠MWT评分明显降低（P＜0.01，P＜0.05），隔药灸、p38MAPK抑制剂、JNK抑制剂干预后均能提高MWT评分（均P＜0.01）;假隔药灸和DMSO溶媒干预对MWT评分无明显作用（均P＞0.05）。 (3) TWL: IBD内脏痛大鼠TWL评分明显降低（均P＜0.01），隔药灸、p38MAPK抑制剂、JNK抑制剂干预后均能提高TWL评分（均P＜0.01）;假隔药灸和DMSO溶媒干预对TWL评分无明显作用（均P＞0.05）。 2.结肠HE染色病理评分:IBD内脏痛大鼠结肠组织病理损伤评分明显升高（P＜0.01），隔药灸、p38MAPK抑制剂、JNK抑制剂干预后均能降低结肠组织病理损伤评分（P＜0.01，P＜0.05），假隔药灸和DMSO溶媒干预对结肠组织病理损伤评分无明显作用（均P＞0.05）。 3.隔药灸对p38MAPK信号通路关键蛋白及mRNA表达的影响: (1)与正常组比较，模型组、假隔药灸组和DMSO溶媒对照组大鼠脊髓p38MAPK、ELK-1、MSK1磷酸化蛋白及mRNA表达均明显增高，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与模型组比较，隔药灸组大鼠在隔药灸治疗后大鼠脊髓p38MAPK、ELK-1磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）;p38MAPK抑制剂组大鼠干预后，p38MAPK、ELK-1、MSK1磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与假隔药灸组比较，隔药灸组大鼠在隔药灸治疗后脊髓p38MAPK、ELK-1磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与DMSO溶媒对照组比较，p38MAPK抑制剂组大鼠p38MAPK、ELK-1、MSK1磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）。 (2)与正常组比较，模型组和假隔药灸组大鼠脊髓ASK1、MKK3、MKK6磷酸化蛋白及mRNA的表达均显著增高，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与模型组和假隔药灸组大鼠比较，隔药灸组大鼠经治疗后ASK1、MKK3磷酸化蛋白及mRNA的表达均显著降低，差异有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)。 4.隔药灸对JNK信号通路关键蛋白及mRNA表达的影响: (1)与正常组比较，模型组、假隔药灸组和DMSO溶媒对照组大鼠脊髓JNK、C-jun、ATF-2磷酸化蛋白及mRNA表达均明显增高，差异有统计学意义(均P＜0.01);与模型组比较，隔药灸组和JNK抑制剂组大鼠脊髓JNK、C-jun、ATF-2的磷酸化蛋白及mRNA表达均显著降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与假隔药灸组比较，隔药灸组大鼠在隔药灸治疗后脊髓JNK、C-jun、 ATF-2磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与DMSO溶媒对照组比较，JNK抑制剂组大鼠JNK、C-jun、ATF-2磷酸化蛋白及mRNA表达均明显降低，差异有统计学意义（均P＜0.01）。 (2)与正常组比较，模型组和假隔药灸组大鼠脊髓TAK1、MKK4、MKK7磷酸化蛋白及mRNA的表达均显著增高，差异有统计学意义（均P＜0.01）;与模型组比较，隔药灸组大鼠经治疗后TAK1、MKK4、MKK7磷酸化蛋白及mRNA的表达均显著降低，差异有显著统计学意义(P＜0.01);与假隔药灸组比较，隔药灸组大鼠经治疗后TAK1、MKK4、MKK7磷酸化蛋白及mRNA的表达均显著降低，差异有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)。 结论: 1.脊髓p38MAPK、JNK信号通路激活与炎症性肠病内脏痛的发生密切相关。 2.隔药灸“天枢”、“气海”能有效缓解炎症性肠病内脏痛，其镇痛作用可能与其调节脊髓p38MAPK、ELK-1蛋白及mRNA的表达，抑制过度活化的p38MAPK信号通路有关。 3.隔药灸能抑制p38MAPK上游信号通路蛋白ASK1、MKK3蛋白及mRNA的表达，该作用可能是其抑制p38MAPK信号通路活化的重要机制。 4.隔药灸“天枢”、“气海”能有效缓解炎症性肠病内脏痛，其镇痛作用可能与其调节脊髓JNK、C-jun、ATF-2蛋白及mRNA的表达，抑制过度活化的JNK信号通路有关。 5.隔药灸能抑制JNK上游信号通路蛋白TAK1、MKK4、MKK7蛋白及mRNA的表达，该作用可能是其抑制JNK信号通路活化的重要机制。