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研究目的：过氧化氢(hydrogenperoxide，H2O2)可以诱导分化PC12(differentiatedPC12，dPC12)细胞凋亡。本文研究自噬对发光二极管640±15nm红光(redlightat640±15nmfromlightemittingdiodearray，RLED)调节凋亡的介导作用，探讨弱光疗法治疗神经系统相关疾病的分子机制。 研究方法：用含50ng/ml神经营养因子(nervegrowthfactor，NGF)和2％胎牛血清的分化培养液培养未分化PC12细胞3-4天分化成为神经样dPC12细胞，选定150μMH2O2诱导dPC12细胞凋亡为氧化损伤神经细胞模型，同时给予0.06mW/cm2的RLED，照射20min，12h后收取样品。采用酶循环法检测胞内NAD+(nicotinamideadeninedinucleotide，NAD+)和其还原形式NADH的比值，WesternBlotting法分析自噬蛋白LC3的蛋白表达水平和NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶(sirtuin1，SIRT1)的蛋白水平。同时选取光照处理后的1.5h，6h，12h，18h后的时间点检测细胞的SIRT1蛋白表达水平。 研究结果： 1.两批次的细胞(B1和B2)LC3的蛋白检测实验中，H2O2组增加了而3-MA+H2O2组却减少了LC3蛋白的表达水平(P<0.01)，并且3-MA+H2O2组、H2O2+RLED组和3-MA+H2O2+RLED组分别降低了由H2O2诱导的LC3蛋白表达升高的水平(P<0.01)。在对照组、H2O2组、3-MA+H2O2组、3-MA+H2O2+RLED组，两个批次的细胞的LC3蛋白表达分别有显著性差异(P<0.01)，并且在这几组中，B1次细胞的LC3蛋白表达均高于B2次细胞；但是在H2O2+RLED组上，两者的LC3蛋白表达是无显著性差异的(P>0.05)。 2.H2O2组与对照组相比较表明，H2O2在第1.5h和第18h抑制了SIRT1蛋白的表达(P<0.01)，但是在第6h(P<0.05)、第12h(P<0.01)促进了SIRT1蛋白的表达。RLED组和H2O2组比较表明，RLED抑制了H2O2在第1.5h(P<0.05)和第18h(P<0.01)对SIRT1蛋白表达的抑制作用，并且抑制了H2O2在第6h、第12h(P<0.05)对SIRT1蛋白表达的促进作用。RLED组和对照组比较表明，SIRT1的蛋白表达在第1.5h(P<0.01)低于对照组，且具有显著性差异；在第6h、第12h和第18h中与对照组无显著性差异(P>0.05)。 3.H2O2组与对照组(N50-3)相比较表明，H2O2在12h后促进了SIRT1蛋白的表达(P<0.01)，并且升高了NAD+/NADH(P<0.01)的比值：H2O2+RLED组与H2O2组相比较表明，RLED抑制了H2O2对SIRT1蛋白表达的促进作用(P<0.05)，并且降低了NAD+/NADH(P<0.01)的比值；NAM+H2O2与H2O2组相比较表明，NAM同样也抑制了H2O2对SIRT1蛋白表达的促进作用(P<0.05)，并且降低了NAD+/NADH(P<0.01)的比值；N+H+RLED组与NAM+H2O2组相比较表明，RLED加剧了NAM对H2O2促进SIRT1蛋白表达的抑制作用(P<0.01)，但是在NAD+/NADH的水平上却无显著性差异(P>0.05)；然而，H2O2+RLED组与NAM+H2O2组、N+H+RLED组相比较SIRT1蛋白表达均无显著性差异(P>0.05)。 研究结论：自噬可能通过SIRT1长寿因子网络、活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)来介导RLED抑制N2O2诱导的dPC12细胞氧化应激引起的凋亡作用，并且RLED对LC3的调节可能取决于dPC12细胞的初始状态，RLED通过自适应作用对其进行调节。