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目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)及其产品湿润烧伤膏(MEBO)对SD大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。 方法:健康成年SPF级SD雄性大鼠80只,12周龄,体重220g~250g,适应性喂养1w后,按随机数字表法选出20只大鼠作为空白组,空白组大鼠建立全层皮肤缺损开放性创面模型后不予其他处理。其余60只大鼠制备成慢性难愈合创面模型,然后按处理办法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组20只。各组创面制备后立即用药治疗。各组首次换药前以1/5000呋喃西林液清洁创面,换2次药。观察各组大鼠创面愈合时间,以及在12h、3d、7d、14d共4个时相点的愈合率情况。所取组织样品一部分用10％福尔马林固定,待收集完所有时相点后统一用于组织病理学观察,另一部分迅速冻于-80℃冰箱,待采集完4个时相点后统一进行Western blot检测。 结果:(1)创面大体愈合情况:观察造模后创面肉芽组织生长情况,空白组愈合情况最佳,并发现MEBO组、贝复济组大鼠创面肉芽组织发展情况显著优于模型组,MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠的创面是苍白的,缓慢增长。(2)创面愈合时间:空白组愈合时间最快,MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合时间为16.28±1.19d,短于贝复济组17.52±1.20d,并且明显短于模型组21.10±2.90d(P<0.05),差异具有统计学意义。(3)创面愈合率:在第3d,7d,14d,空白组愈合率显著高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);在第7d、第14d,MEBO组、贝复济组与模型组愈合率比较差异均有统计学意义(P<0.05);MEBO组第3d创面愈合率为(21.36±3.47)％,与模型组比较无明显差异,但在第7d以后开始,两组差异有统计学意义(P<0.05);MEBO组与贝复济组比较,在第3d、7d、14d,MEBO组在数值上虽然高于贝复济组,但差异无统计学意义。(4)免疫蛋白印迹(Western blot)检测:①用药后12h模型组与空白组p38蛋白激酶含量比较,P<0.05,差异有统计学意义;用药后12h,空白组、MEBO组、贝复济组创面组织的p38蛋白激酶含量最高;其中第3d,模型组与MEBO组、贝复济组比较差异显著,MEBO组与模型组相比较,P<0.05,贝复济组与模型组比较,P<0.05,差异具有较显著的统计学意义;用药后第7d,MEBO组和贝复济组创面组织 p38蛋白激酶含量升高,其中MEBO组p38蛋白激酶含量略高于贝复济组,但差异不大,P>0.05;用药后14d,贝复济组、MEBO组大鼠皮肤创面组织中p38蛋白表达量明显高于模型组(P<0.05),差异有统计学意义,MEBO组与贝复济组大鼠皮肤创面组织中p38蛋白表达量相比较,P<0.05,差异有统计学意义。②用药后12h,模型组与空白组相比ATF2转录因子含量减小,P<0.05,差异显著有统计学意义;用药后12h、3d,MEBO组、贝复济组创面组织的ATF2转录因子含量均高于模型组;其中第7d,MEBO组、贝复济组与模型组相比差异显著,MEBO组与模型组相比P<0.05,差异有统计学意义,MEBO组与贝复济相比 P>0.05,差异无统计学意义;用药后第14d,MEBO组和贝复济组随着创面愈合,创面组织 ATF2转录因子含量逐渐恢复,MEBO组ATF2转录因子含量较贝复济组高,且差异有统计学意义P<0.05。 结论:MEBO对大鼠慢性难愈合皮肤创面具有明显的缩短愈合时间、提高愈合率的效果。MEBO可能通过影响 p38MAPK信号通路相关蛋白中p38蛋白激酶和ATF2转录因子的表达,从而激活p38MAPK,影响和调控细胞效应,进而促进细胞因子的产生以及随后的细胞增殖,血管再生和基质修复,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。