斜纹夜蛾精巢融合及调控的研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuq
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
昆虫精巢常为左右对称的一对。在鳞翅目昆虫中,有些类群的2个精巢在发育中能够融合成1个,即精巢融合。目前,精巢融合对精子发生的作用及融合的调控及机制尚不清楚。  以具有精巢融合现象的鳞翅目害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)为实验材料,通过斜纹夜蛾精巢融合前后结构的变化、精巢基因表达谱的分析与关键候选基因的表达及蜕皮激素对精巢融合的作用等方面的工作,初步研究了精巢融合时围巢膜结构的变化,20E信号通路基因的表达变化及蜕皮激素与精巢融合的关系。  获得的主要结果如下:  (1)斜纹夜蛾精巢融合前后为肾形,显微及超微结构显示,精巢的围巢膜分为外膜与内膜两部分,外膜的最外层为非细胞结构的基膜,其余部分为不同类型的细胞,具丰富的脂滴;内膜向内延伸形成隔膜,电镜下为多层伸长的细胞,将精巢分为4个精小囊,精小囊内富含精巢液。从精小囊的顶端到末端依次分布顶细胞及不同发育程度的生精囊。生精囊内为同步发育的精细胞。融合中,围巢膜外膜消失,由内层细胞形成新的精小囊隔膜,新形成的精小囊隔膜较粗。精巢融合后成为圆球形,并发生扭曲,精小囊隔膜变窄,到蛹后期,精小囊隔膜粗细一致,分界不清。  (2)从斜纹夜蛾6龄4天幼虫(6L4d,精巢未融合)、6龄6天幼虫(6L6d,精巢开始靠近,发生融合)和蛹期4天(p4d,精巢已完成融合)的虫蛹中分离出精巢,提取高质量的RNA,测定了斜纹夜蛾精巢基因表达谱,共获得63292 unigenes。将全部unigenes上传至KEGG数据库中,使用双向比对的方法注释unigenes,预测得到195个unigenes为转录因子,其中44个unigenes在融合过程中有差异表达,这些转录因子主要参与细胞分裂、分化等过程。而差异基因的趋势分析说明在融合期高表达的这类趋势的基因,其信号通路包括较多细胞间的相互作用。蜕皮激素(20-hydroxyecdys one,20E)通路中,SlHR4和SlβFTZ-F1为差异表达基因。保幼激素(Juvenile hormone,JH)通路,SlSRC为差异表达基因。  (3)qRT-PCR检测20E信号通路的相关基因在精巢融合前后的表达,结果表明20E受体SlEcRA,SlEcRB1,SlUSP1和SlUSP2均在精巢融合前(6L4d)和融合期(6L6d)高表达,融合后期(p4d)低表达。另外,次级转录因子Sl HR4和SlβFTZ-F1在精巢融合期高表达,而在融合前后为低表达,定量结果与表达谱中的结果一致。Western Blot结果显示,USP1和USP2蛋白在6L2d的精巢中有较高的表达。  (4)分离了精巢的围巢膜与生殖细胞,RT-PCR检测结果表明SlEcRB1,SlUSP1,SlUSP2,SlHR4和SlβFTZ-F1的mRNA在围巢膜及生殖细胞中均有表达。WesternBlot结果显示,USP蛋白在围巢膜及生殖细胞中均有表达。  (5)6龄幼虫头胸部的结扎实验表明:能化蛹的斜纹夜蛾,精巢均能融合;而未化蛹的斜纹夜蛾其精巢均不融合。  研究结果表明,精巢融合时精巢围巣膜外膜消失;20E信号通路相关基因的表达在精巢融合前后有显著变化,它们在围巢膜及精细胞均有分布;斜纹夜蛾精巢融合发生在幼虫到蛹期的变态发育期,与蛹变态有关。
其他文献
氨氧化作用作为硝化过程的第一步,是氮素生物地球化学循环的关键步骤,氨氧化细菌中的变形菌纲β和γ亚群一直被认为是氨氧化作用的主要承担者。然而,近年来在环境基因组学研究上
红树林是生物多样性高度浓缩的海岸生态关键区域。由于土壤营养贫瘠,红树林生态系统的建设与维护问题至今仍处于瓶颈。深圳湾红树林位于亚热带海岸潮间带,其沉积物和海水的总磷
鳞甲目(Pholidota)是脊椎动物(Vetebrate)哺乳纲(Mammalia)下的一个分类阶元,由几种已灭绝的化石穿山甲和8种现存穿山甲组成。马来穿山甲(Manis javanica)是其中的物种之一。 
目的 估算北京市2018-2019流行季流感的发病率和住院率.方法 基于北京市昌平区和怀柔区的流感样病例(influenza like illness,ILI)监测、流感病原学监测、住院严重急性呼吸道
随着科学迅猛发展,人类基因组已经被逐渐破译,构成生命的图谱会呈现在人类面前,采取基因制造药物治疗更多的疾病已经不是一种向往。当代人类的计算机科学也在日新月异的变化,生物
研究植物致病性细菌生物学特性是了解植物细菌性病害发生机理、建立有效的检测和控制的基础。菌株ABB是1株新分离的可引起红掌细菌性叶斑病的植物致病菌,本论文主要开展其鉴定
对传统的信息检索技术的研究反映了人们很早就开始注意对信息搜集与使用的研究。随着人类社会进入信息时代,信息以爆炸般的速度增长,各种信息充斥了人们的生活空间。在这种情况
现如今,我国已经逐渐进入信息化社会,随着移动互联网技术的快速发展,智能手机APP已经逐渐地被推广和应用到各个的领域.伴随着越来越多的APP问世,校园APP也成为不可忽视的一部
帕金森症是现在世界所公认的第二大神经系统疾病,在中国的发病率约高达16‰。全球约有170万的帕金森症患者在中国,帕金森症主要的病理特征为中脑黑质多巴胺能神经元细胞选择性
学位