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目的：研究大麻素WIN55,212-2对牛眼小梁细胞内钙离子及组织型转谷氨酰胺酶(tTGmRNA)表达的影响，探讨其降眼压的机制。
方法(1)牛眼小梁细胞的培养与鉴定：采用原代培养牛眼小梁细胞，观察细胞在倒置显微镜下的生长特征，取第三代细胞行免疫组织化学染色光学显微镜下观察，分析神经元烯醇化酶（NSE)、波形蛋白及第Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色结果，确定所获细胞绝大多数为小梁细胞组织来源。(2)激光扫描共聚焦显微镜检测：用荧光染料Fluo-3/AM负载第四代小梁细胞，于LSCM下测定浓度为0μmol/L，1μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L大麻素WIN55,212-2作用后细胞内钙荧光强度的动态变化(n=8)。(3)反转录聚合酶链式扩增检测：运用RT-PCR方法检测0μmol/L,1μmol/L，10μmol/L，20mol/L，40μmol/L，60μmol/L浓度的WIN55,212-2作用后tTGmRNA在小梁细胞的表达。
结果：(1)实验所培养的细胞神经特异性烯醇化酶表达阳性，波形蛋白表达阳性，第Ⅷ因子相关抗原表达阴性，结合对细胞生长过程的形态学观察，证明本实验所培养细胞为牛眼小梁细胞。(2)LSCM检测结果：各组比较差异有统计学意义(F=142.553，P＜0.01)，且大麻素WIN55,212-2作用组的荧光强度较空白对照组均有降低，各组间差异有统计学意义(20μmol/L组与40μmol/L组比较P＜0.05，其余每两组间比较P＜0.01)。(3)RT-PCR检测结果：各组比较差异有统计学意义(F=51.553，P＜0.01)，LSD-t检验0.1μmol/L组与空白组比较(P=0.247，P＞0.05)差异无统计学意义，其余各组均与空白对照组间差异有统计学意义(P＜0.01)。0.1μmol/L组与1μmol/L组比较(P=0.073，P＞0.05)，10μmol/L组与20μmol/L组比较(P=0.583，P＞0.05)，10μmol/L组与40μmol/L组比较(P=0.226，P＞0.05)，20μmol/L组与40μmol/L组比较(P=0.500，P＞0.05)差别无统计学意义，其余各组间差异有统计学意(P＜0.05)。
结论：一定浓度的大麻素WIN55,212-2能够降低小梁细胞内的钙离子浓度和组织型转谷氨酰胺酶的表达。推测其可通过降低小梁细胞内的钙离子浓度和组织型转谷氨酰胺酶的表达降低眼压。
方法(1)牛眼小梁细胞的培养与鉴定：采用原代培养牛眼小梁细胞，观察细胞在倒置显微镜下的生长特征，取第三代细胞行免疫组织化学染色光学显微镜下观察，分析神经元烯醇化酶（NSE)、波形蛋白及第Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色结果，确定所获细胞绝大多数为小梁细胞组织来源。(2)激光扫描共聚焦显微镜检测：用荧光染料Fluo-3/AM负载第四代小梁细胞，于LSCM下测定浓度为0μmol/L，1μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L大麻素WIN55,212-2作用后细胞内钙荧光强度的动态变化(n=8)。(3)反转录聚合酶链式扩增检测：运用RT-PCR方法检测0μmol/L,1μmol/L，10μmol/L，20mol/L，40μmol/L，60μmol/L浓度的WIN55,212-2作用后tTGmRNA在小梁细胞的表达。
结果：(1)实验所培养的细胞神经特异性烯醇化酶表达阳性，波形蛋白表达阳性，第Ⅷ因子相关抗原表达阴性，结合对细胞生长过程的形态学观察，证明本实验所培养细胞为牛眼小梁细胞。(2)LSCM检测结果：各组比较差异有统计学意义(F=142.553，P＜0.01)，且大麻素WIN55,212-2作用组的荧光强度较空白对照组均有降低，各组间差异有统计学意义(20μmol/L组与40μmol/L组比较P＜0.05，其余每两组间比较P＜0.01)。(3)RT-PCR检测结果：各组比较差异有统计学意义(F=51.553，P＜0.01)，LSD-t检验0.1μmol/L组与空白组比较(P=0.247，P＞0.05)差异无统计学意义，其余各组均与空白对照组间差异有统计学意义(P＜0.01)。0.1μmol/L组与1μmol/L组比较(P=0.073，P＞0.05)，10μmol/L组与20μmol/L组比较(P=0.583，P＞0.05)，10μmol/L组与40μmol/L组比较(P=0.226，P＞0.05)，20μmol/L组与40μmol/L组比较(P=0.500，P＞0.05)差别无统计学意义，其余各组间差异有统计学意(P＜0.05)。
结论：一定浓度的大麻素WIN55,212-2能够降低小梁细胞内的钙离子浓度和组织型转谷氨酰胺酶的表达。推测其可通过降低小梁细胞内的钙离子浓度和组织型转谷氨酰胺酶的表达降低眼压。