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背景：
子宫内膜癌(endometrial cancer)，为女性生殖器三大恶性肿瘤之一，约占女性癌症总数7％，占女性生殖道恶性肿瘤20％～30％，其高发年龄为58～61岁。子宫内膜癌可分为两种病理类型：雌激素依赖型(estrogen-dependent)和非激素依赖型(estrogen-independent)，前者的发病机制和雌激素有一定的关系，而后者发病与雌激素无明确关系。在激素依赖型中，子宫内膜样腺癌占多数，约为80％～90％。子宫内膜癌的确切病因目前仍不清楚，目前大多数学者偏向于其发病与长期持续的雌激素刺激、又无孕激素拮抗相关[1]。子宫内膜癌的治疗目前以手术治疗为首选方法，尤其是对早期病例。对于晚期或复发、老年或严重合并症不能耐受手术的患者可予以放疗、内分泌治疗和化疗。对于早期未生育并且强烈要求保留生育功能的患者，可以给予内分泌治疗。内分泌治疗包括孕激素的使用、抗雌激素制剂(如他莫昔芬)、芳香化酶抑制剂等。目前国际上常用的内分泌治疗手段是大剂量孕激素疗法。但由于孕激素的使用存在很多不足，比如大剂量的孕激素的使用对肝功能影响较大，还可导致患者体内水钠潴留，引起水肿，部分患者出现血脂异常，甚至出现心脏疾患。此外，孕激素仅对激素依赖型子宫内膜癌效果较好，对非激素依赖型的子宫内膜癌疗效较差。因此，芳香化酶抑制剂的应用逐渐受到广大学者的关注。
芳香化酶(Aromatas又称做Cytochrome P45019A1细胞色素P450，CYPXIX，Estrogen synthetase，P-450AROM)存在于合成雌激素的细胞的内质网和线粒体内膜上[11]。在人体内，芳香化酶存在于多种组织中，包括卵巢、胎盘、睾丸，以及性腺外的组织如大脑、脂肪组织、皮肤纤维组织等等。还有个别文献报道芳香化酶可存在于内膜癌组织中，但在正常的内膜组织却没有。芳香化酶是雌激素合成途径中较为关键的催化剂，绝经后妇女体内雌激素主要为雌酮，主要来源于雄激素的转化，而转化作用主要依赖芳香化酶。由于芳香化酶在内膜癌的发病机制上起着如此重要的作用，越来越多的学者意识到芳香化酶抑制剂可能对子宫内膜癌有一定的治疗效果，它可以通过阻断雌激素的合成而对内膜癌起到治疗作用，对芳香化酶抑制剂的研究也成为近几年内膜癌治疗的研究热点。
随着分子生物学技术和实验技术的普及，关于恶性肿瘤的生长和凋亡己成为肿瘤研究的热点，许多基因位点标志逐渐成为肿瘤细胞生物学特性的检测标志。PTEN和Ki67便是常用的观察肿瘤生长的指标。PTEN是一种抑癌基因，在子宫内膜样腺癌中，PTEN突变率为83％，癌前病变中达55％。PTEN的突变造成了正常内膜细胞的异常增殖，成为肿瘤细胞，因此，检测PTEN的表达可以反映肿瘤凋亡的情况，是从细胞凋亡的角度来反映细胞的生物学特性。Ki67是标记细胞增殖状态的抗原，而在内膜腺癌中的表达率高达71％，反映了细胞处于增生活跃状态。
研究目的：
本研究的目的是利用ER+、PR+的人子宫内膜癌细胞株RL-952，种植于BALB/c雌性裸鼠形成移植瘤模型后。通过观察移植瘤生长体积的变化、PTEN以及Ki67的变化来研究来曲唑对子宫内膜癌的治疗效果。
材料与方法：
1.实验对象：RL-952人内膜癌细胞株，BALB/c裸鼠。
2.将子宫内膜癌细胞株RL-952,培养于RPMI1640培养液+10％的牛血清中，培养液中不含青霉素、链霉素。于37℃5％二氧化碳饱和湿度培养箱内培养，细胞处于对数生长期时，用0.125％的胰蛋白酶+0.02％的EDTA消化传代，每2～3d传代1次。
3.将对数生长期的RL-952细胞消化后制成1.2×107/mL细胞悬液，在裸鼠右侧背部皮下注射0.3mL含细胞1.2×107的细胞悬液。
4.观察裸鼠的成瘤情况，待移植瘤长成0.3～0.5cm时，判断成瘤实验成功。可进入药物实验阶段。把裸鼠随机分成四个小组，分别是来曲唑组，甲地孕酮组，来曲唑+甲地孕酮组以及空白对照组。来曲唑组：来曲唑0.38mg/kg.d；甲地孕酮组：甲地孕酮30mg/kg.d；来曲唑+甲地孕酮组：各给予相同剂量的来曲唑和甲地孕酮；对照组：每天给予同等量的生理盐水。每周用药6d，均以口服给药，共4周。测量4组裸鼠移植瘤体积的变化情况，观察各组肿瘤体积有无缩小，了解各组的疗效是否有差别。体积用公式V=1/2ab2来计算。于停药后4～6h内取出瘤体、处死裸鼠，取出肝肾组织。
5.取出瘤体后制成石蜡标本固定，然后再进行制片，观测免疫组化PTEN和Ki67在各组中的表达情况。
6.统计方法：计量资料进行单因素方差分析。计数资料进行卡方检验或fisher确切概率法检验。各种检验均以P≤0.05为差别有统计学意义。所有数据处理均在SPSS13.0统计软件完成。
结果：
1.来曲唑组给药后瘤体体积小于甲地孕酮组和空白对照组，差异有统计学意义，而与来曲唑+甲地孕酮组相比无差异。来曲唑组、甲地孕酮组和来曲唑+甲地孕酮组的抑瘤率分别为：84.72％、56.80％、71.12％。各组两两比较存在统计学差异。
2.PTEN在各组的表达情况。PTEN的表达率在来曲唑组、甲地孕酮组、来曲唑+甲地孕酮组均高于空白对照组，且差异有统计学意义。而来曲唑组、甲地孕酮组和来曲唑+甲地孕酮组之间PTEN的表达情况没有差异。
3.Ki-67在各组中的表达情况进行统计学分析，各组之间对比结果显示它们不存在统计学差异。
4.肝肾组织的对比结果：来曲唑组、甲地孕酮组、来曲唑+甲地孕酮组与空白对照组相比较，肝肾组织均未见明显的器质性病变。药物对裸鼠未造成严重毒副反应。
结论：
一、来曲唑对子宫内膜癌移植瘤的生长有一定的抑制作用。
二、来曲唑对子宫内膜癌移植瘤的抑制作用与甲地孕酮相比较，优于甲地孕酮。@2三、两种药物联合应用，未见到明显的优势。
子宫内膜癌(endometrial cancer)，为女性生殖器三大恶性肿瘤之一，约占女性癌症总数7％，占女性生殖道恶性肿瘤20％～30％，其高发年龄为58～61岁。子宫内膜癌可分为两种病理类型：雌激素依赖型(estrogen-dependent)和非激素依赖型(estrogen-independent)，前者的发病机制和雌激素有一定的关系，而后者发病与雌激素无明确关系。在激素依赖型中，子宫内膜样腺癌占多数，约为80％～90％。子宫内膜癌的确切病因目前仍不清楚，目前大多数学者偏向于其发病与长期持续的雌激素刺激、又无孕激素拮抗相关[1]。子宫内膜癌的治疗目前以手术治疗为首选方法，尤其是对早期病例。对于晚期或复发、老年或严重合并症不能耐受手术的患者可予以放疗、内分泌治疗和化疗。对于早期未生育并且强烈要求保留生育功能的患者，可以给予内分泌治疗。内分泌治疗包括孕激素的使用、抗雌激素制剂(如他莫昔芬)、芳香化酶抑制剂等。目前国际上常用的内分泌治疗手段是大剂量孕激素疗法。但由于孕激素的使用存在很多不足，比如大剂量的孕激素的使用对肝功能影响较大，还可导致患者体内水钠潴留，引起水肿，部分患者出现血脂异常，甚至出现心脏疾患。此外，孕激素仅对激素依赖型子宫内膜癌效果较好，对非激素依赖型的子宫内膜癌疗效较差。因此，芳香化酶抑制剂的应用逐渐受到广大学者的关注。
芳香化酶(Aromatas又称做Cytochrome P45019A1细胞色素P450，CYPXIX，Estrogen synthetase，P-450AROM)存在于合成雌激素的细胞的内质网和线粒体内膜上[11]。在人体内，芳香化酶存在于多种组织中，包括卵巢、胎盘、睾丸，以及性腺外的组织如大脑、脂肪组织、皮肤纤维组织等等。还有个别文献报道芳香化酶可存在于内膜癌组织中，但在正常的内膜组织却没有。芳香化酶是雌激素合成途径中较为关键的催化剂，绝经后妇女体内雌激素主要为雌酮，主要来源于雄激素的转化，而转化作用主要依赖芳香化酶。由于芳香化酶在内膜癌的发病机制上起着如此重要的作用，越来越多的学者意识到芳香化酶抑制剂可能对子宫内膜癌有一定的治疗效果，它可以通过阻断雌激素的合成而对内膜癌起到治疗作用，对芳香化酶抑制剂的研究也成为近几年内膜癌治疗的研究热点。
随着分子生物学技术和实验技术的普及，关于恶性肿瘤的生长和凋亡己成为肿瘤研究的热点，许多基因位点标志逐渐成为肿瘤细胞生物学特性的检测标志。PTEN和Ki67便是常用的观察肿瘤生长的指标。PTEN是一种抑癌基因，在子宫内膜样腺癌中，PTEN突变率为83％，癌前病变中达55％。PTEN的突变造成了正常内膜细胞的异常增殖，成为肿瘤细胞，因此，检测PTEN的表达可以反映肿瘤凋亡的情况，是从细胞凋亡的角度来反映细胞的生物学特性。Ki67是标记细胞增殖状态的抗原，而在内膜腺癌中的表达率高达71％，反映了细胞处于增生活跃状态。
研究目的：
本研究的目的是利用ER+、PR+的人子宫内膜癌细胞株RL-952，种植于BALB/c雌性裸鼠形成移植瘤模型后。通过观察移植瘤生长体积的变化、PTEN以及Ki67的变化来研究来曲唑对子宫内膜癌的治疗效果。
材料与方法：
1.实验对象：RL-952人内膜癌细胞株，BALB/c裸鼠。
2.将子宫内膜癌细胞株RL-952,培养于RPMI1640培养液+10％的牛血清中，培养液中不含青霉素、链霉素。于37℃5％二氧化碳饱和湿度培养箱内培养，细胞处于对数生长期时，用0.125％的胰蛋白酶+0.02％的EDTA消化传代，每2～3d传代1次。
3.将对数生长期的RL-952细胞消化后制成1.2×107/mL细胞悬液，在裸鼠右侧背部皮下注射0.3mL含细胞1.2×107的细胞悬液。
4.观察裸鼠的成瘤情况，待移植瘤长成0.3～0.5cm时，判断成瘤实验成功。可进入药物实验阶段。把裸鼠随机分成四个小组，分别是来曲唑组，甲地孕酮组，来曲唑+甲地孕酮组以及空白对照组。来曲唑组：来曲唑0.38mg/kg.d；甲地孕酮组：甲地孕酮30mg/kg.d；来曲唑+甲地孕酮组：各给予相同剂量的来曲唑和甲地孕酮；对照组：每天给予同等量的生理盐水。每周用药6d，均以口服给药，共4周。测量4组裸鼠移植瘤体积的变化情况，观察各组肿瘤体积有无缩小，了解各组的疗效是否有差别。体积用公式V=1/2ab2来计算。于停药后4～6h内取出瘤体、处死裸鼠，取出肝肾组织。
5.取出瘤体后制成石蜡标本固定，然后再进行制片，观测免疫组化PTEN和Ki67在各组中的表达情况。
6.统计方法：计量资料进行单因素方差分析。计数资料进行卡方检验或fisher确切概率法检验。各种检验均以P≤0.05为差别有统计学意义。所有数据处理均在SPSS13.0统计软件完成。
结果：
1.来曲唑组给药后瘤体体积小于甲地孕酮组和空白对照组，差异有统计学意义，而与来曲唑+甲地孕酮组相比无差异。来曲唑组、甲地孕酮组和来曲唑+甲地孕酮组的抑瘤率分别为：84.72％、56.80％、71.12％。各组两两比较存在统计学差异。
2.PTEN在各组的表达情况。PTEN的表达率在来曲唑组、甲地孕酮组、来曲唑+甲地孕酮组均高于空白对照组，且差异有统计学意义。而来曲唑组、甲地孕酮组和来曲唑+甲地孕酮组之间PTEN的表达情况没有差异。
3.Ki-67在各组中的表达情况进行统计学分析，各组之间对比结果显示它们不存在统计学差异。
4.肝肾组织的对比结果：来曲唑组、甲地孕酮组、来曲唑+甲地孕酮组与空白对照组相比较，肝肾组织均未见明显的器质性病变。药物对裸鼠未造成严重毒副反应。
结论：
一、来曲唑对子宫内膜癌移植瘤的生长有一定的抑制作用。
二、来曲唑对子宫内膜癌移植瘤的抑制作用与甲地孕酮相比较，优于甲地孕酮。@2三、两种药物联合应用，未见到明显的优势。