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背景和目的：
缺血性卒中是导致死亡和长期残疾的原因之一，但有效的治疗措施却寥寥无几。脑缺血预适应(Cerebral ischemic preconditioning，CIP)是指在损害性缺血开始前1天或几天先进行短暂的非损害性缺血，它可以减轻随后的严重缺血带来的损害，这种保护作用也叫缺血耐受(ischemic tolerance，IT)。CIP被认为是至今减轻缺血性脑损害最有效的内源性神经保护途径，由于它的机制提示了新的神经保护治疗，已受到许多神经病学家和科学家的关注。尽管有大量的研究，但缺血预适应(ischemic preconditioning，IP)在脑中的保护机制仍不完全清楚。
整合素是细胞表面黏附分子家族的重要成员之一，是由α和β两种亚基以非共价键形式结合而成的异二聚体跨膜糖蛋白受体，迄今已发现19种α亚单位和9种β亚单位，组成至少24种整合素。整合素主要介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质(extracellular matrix，ECM)之间的相互粘附，并介导细胞与ECM之间的双向信号转导，对细胞的粘附、增殖、分化、转移、凋亡起着重要的调控作用。整合素αVβ3是整合素家族的重要成员之一，是由αV亚基(CD51，150kD)和β3亚基(CD61，105kD)形成的异二聚体。αVβ3主要在血管再生、损伤组织创口愈合和重塑及肿瘤的生长转移中起关键作用，在动物模型的局部缺血性卒中损害中也起着重要作用。除了主要表达在生血管源性内皮细胞上，αVβ3也散在分布于正常的脑微血管、神经元细胞和星型细胞上。有研究报道αVβ3在狒狒局部脑缺血灶中表达升高，并且抑制αVβ3的表达在动物模型的脑缺血中有神经保护作用，例如保存缺血后微血管的开放、减轻血脑屏障(blood-brain barrier，BBB)的破坏和减小局部脑缺血的梗死灶。
既往的有关αVβ3的研究均建立在脑缺血损害模型上，尚未有关缺血预适应方面的研究报道。整合素αVβ3在脑缺血预适应中的表达情况如何，在缺血预适应中起到如何的作用，这些都仍未见报道。本课题拟探讨脑缺血预适应后整合素αVβ3的表达情况及脑缺血预适应对缺血后整合素αVβ3表达的影响，希望能在脑缺血损伤中的神经保护方面获得新的发现。
方法：
(1)动物分组：将健康雄性C57BL/6小鼠170只，随机分为四组：假手术组(sham group，n=20)，预适应组(IP group，n=50)，缺血组(Isch group，n=50)，预适应+缺血组(IP+Isch group，n=50)。其中预适应组、缺血组和预适应+缺血组又分为五个亚组：2小时组(2h)，4小时组(4h)，24小时组(24h)，3天组(3d)和7天组(7d)。
(2)模型建立：应用夹闭双侧颈总动脉方法建立脑预适应缺血和脑缺血再灌注模型。在脑缺血再灌注模型中双侧颈总动脉夹闭时间为30min，在预适应缺血模型中夹闭时间为5min，而预适应+脑缺血组在缺血30min前2天行预适应缺血5min。假手术组仅暴露颈部动脉。
(3)HE染色和海马CA1区神经元细胞计数检测海马神经元损害情况。
(4)伊文氏蓝检测血脑屏障通透性。
(5)Real-time PCR检测整合素αVβ3的mRNA水平。
结果：
(1)缺血组小鼠的血脑屏障通透性高于假手术组、预适应组和预适应+缺血组(P＜0.05)，同时缺血组的海马神经元损害明显重于预适应组和预适应+缺血组。
(2)整合素αVβ3的mRNA水平在全脑缺血30min后2小时开始升高，在24小时达高峰(与假手术组相比P＜0.05)。
(3)缺血组αVβ3的mRNA水平在缺血再灌注24小时明显高于假手术组和预适应组，预适应+缺血组的mRNA水平有统计学意义的低于缺血组。
(4)小鼠皮层的αVβ3 mRNA水平在预适应缺血后第3天升高明显，并持续到第7天；而海马的则到预适应缺血后第7天才明显升高(与假手术组相比P＜0.05)。
(5)在预适应+缺血组中，整合素αVβ3mRNA水平在再灌注24小时开始升高(与假手术组相比P＜0.05)，并持续到第7天。
结论：
(1)整合素αVβ3的mRNA表达在全脑缺血后24小时升高最明显。IP在一定程度上抑制了缺血再灌注24小时整合素αVβ3 mRNA表达而发挥神经保护作用。
(2)IP能部分抑制并延缓脑缺血后整合素αVβ3的mRNA表达上调，其中可能的神经保护机制是避免整合素αVβ3在缺血再灌注早期的有害作用并促进其在缺血后期的组织修复中的有益作用。
缺血性卒中是导致死亡和长期残疾的原因之一，但有效的治疗措施却寥寥无几。脑缺血预适应(Cerebral ischemic preconditioning，CIP)是指在损害性缺血开始前1天或几天先进行短暂的非损害性缺血，它可以减轻随后的严重缺血带来的损害，这种保护作用也叫缺血耐受(ischemic tolerance，IT)。CIP被认为是至今减轻缺血性脑损害最有效的内源性神经保护途径，由于它的机制提示了新的神经保护治疗，已受到许多神经病学家和科学家的关注。尽管有大量的研究，但缺血预适应(ischemic preconditioning，IP)在脑中的保护机制仍不完全清楚。
整合素是细胞表面黏附分子家族的重要成员之一，是由α和β两种亚基以非共价键形式结合而成的异二聚体跨膜糖蛋白受体，迄今已发现19种α亚单位和9种β亚单位，组成至少24种整合素。整合素主要介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质(extracellular matrix，ECM)之间的相互粘附，并介导细胞与ECM之间的双向信号转导，对细胞的粘附、增殖、分化、转移、凋亡起着重要的调控作用。整合素αVβ3是整合素家族的重要成员之一，是由αV亚基(CD51，150kD)和β3亚基(CD61，105kD)形成的异二聚体。αVβ3主要在血管再生、损伤组织创口愈合和重塑及肿瘤的生长转移中起关键作用，在动物模型的局部缺血性卒中损害中也起着重要作用。除了主要表达在生血管源性内皮细胞上，αVβ3也散在分布于正常的脑微血管、神经元细胞和星型细胞上。有研究报道αVβ3在狒狒局部脑缺血灶中表达升高，并且抑制αVβ3的表达在动物模型的脑缺血中有神经保护作用，例如保存缺血后微血管的开放、减轻血脑屏障(blood-brain barrier，BBB)的破坏和减小局部脑缺血的梗死灶。
既往的有关αVβ3的研究均建立在脑缺血损害模型上，尚未有关缺血预适应方面的研究报道。整合素αVβ3在脑缺血预适应中的表达情况如何，在缺血预适应中起到如何的作用，这些都仍未见报道。本课题拟探讨脑缺血预适应后整合素αVβ3的表达情况及脑缺血预适应对缺血后整合素αVβ3表达的影响，希望能在脑缺血损伤中的神经保护方面获得新的发现。
方法：
(1)动物分组：将健康雄性C57BL/6小鼠170只，随机分为四组：假手术组(sham group，n=20)，预适应组(IP group，n=50)，缺血组(Isch group，n=50)，预适应+缺血组(IP+Isch group，n=50)。其中预适应组、缺血组和预适应+缺血组又分为五个亚组：2小时组(2h)，4小时组(4h)，24小时组(24h)，3天组(3d)和7天组(7d)。
(2)模型建立：应用夹闭双侧颈总动脉方法建立脑预适应缺血和脑缺血再灌注模型。在脑缺血再灌注模型中双侧颈总动脉夹闭时间为30min，在预适应缺血模型中夹闭时间为5min，而预适应+脑缺血组在缺血30min前2天行预适应缺血5min。假手术组仅暴露颈部动脉。
(3)HE染色和海马CA1区神经元细胞计数检测海马神经元损害情况。
(4)伊文氏蓝检测血脑屏障通透性。
(5)Real-time PCR检测整合素αVβ3的mRNA水平。
结果：
(1)缺血组小鼠的血脑屏障通透性高于假手术组、预适应组和预适应+缺血组(P＜0.05)，同时缺血组的海马神经元损害明显重于预适应组和预适应+缺血组。
(2)整合素αVβ3的mRNA水平在全脑缺血30min后2小时开始升高，在24小时达高峰(与假手术组相比P＜0.05)。
(3)缺血组αVβ3的mRNA水平在缺血再灌注24小时明显高于假手术组和预适应组，预适应+缺血组的mRNA水平有统计学意义的低于缺血组。
(4)小鼠皮层的αVβ3 mRNA水平在预适应缺血后第3天升高明显，并持续到第7天；而海马的则到预适应缺血后第7天才明显升高(与假手术组相比P＜0.05)。
(5)在预适应+缺血组中，整合素αVβ3mRNA水平在再灌注24小时开始升高(与假手术组相比P＜0.05)，并持续到第7天。
结论：
(1)整合素αVβ3的mRNA表达在全脑缺血后24小时升高最明显。IP在一定程度上抑制了缺血再灌注24小时整合素αVβ3 mRNA表达而发挥神经保护作用。
(2)IP能部分抑制并延缓脑缺血后整合素αVβ3的mRNA表达上调，其中可能的神经保护机制是避免整合素αVβ3在缺血再灌注早期的有害作用并促进其在缺血后期的组织修复中的有益作用。