【摘 要】
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人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPVs)是一种引起人类皮肤、粘膜的乳头状瘤或疣,且可导致恶生病变的病原体.其中,人乳头瘤病毒16型(HPV16)是引起宫颈癌的主要因素,但目前
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人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPVs)是一种引起人类皮肤、粘膜的乳头状瘤或疣,且可导致恶生病变的病原体.其中,人乳头瘤病毒16型(HPV16)是引起宫颈癌的主要因素,但目前尚缺乏有效的预防手段.由于该病毒尚不能体外培养,减毒活疫苗灭活疫苗的制备几乎不可能实现,且蛋白疫苗有一定局限性.目前,人们比较倾向于核酸疫苗,在动物实验中已经证实HPV16晚期基因L1的产物具有诱导产生中和抗体及细胞免疫的表位,诱导产生的免疫可抵抗再次感染,故L1基因是制备核酸疫苗的最佳侯选基因.该研究是从该室构建的HPV16L1-PCR2.1重组质粒上将L1基因自然克隆至真核表达载体pTracer-CMV上,在国内首次构建成HPV16L1-pTracer-CMV真核表达质粒.将该重组质粒大量制备,应用质脂体法转染哺乳动物细胞Hela、NIH3T3和直接免疫BALB/C小鼠.实验结果证实:重组质粒转染真核细胞转染率达90%;透射电镜检测到两种细胞内均有类病毒颗粒(Virus like particles,VLPs)形成;Western-Blot证实HPV16L1在NIH3T3细胞内有特异蛋白表达;动物试验证实重组质粒在小鼠体内无致癌、致畸作用.
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