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目的:探讨补阳还五汤协同骨髓基质干细胞对缺血性中风的神经元再生的影响,补阳还五汤协同BMSCs治疗缺血性中风提供实验依据。
方法:将90只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、移植组、联合组,除空白组外,其余各组制作大脑中动脉栓塞模型,分别给予不同方法BrdU标记及相应干预。分别于24小时、7天、14天(每组每个时间点6只大鼠)进行ZeaLonga神经功能缺损评分后,进行灌注取材。通过HE染色和尼氏体染色观察脑组织病理形态变化。取梗死区脑组织进行免疫荧光双染染色,测定DCX/Brdu与NeuN/Brdu阳性细胞的表达,进行统计分析。
结果:1.神经功能缺损评分:24小时,联合组神经功能缺损症状改善较显著,具有统计学意义(P<0.05)。7天时,与模型组相比,各组神经功能缺损症状均有明显的改善,其中联合组仍改善明显(P<0.05)。14天时,相较模型组,各组神经功能缺损改善明显,具有统计学意义(P<0.05)。其中联合组的症状改善最明显,其次为移植组,最后为中药组。
2.HE染色与尼氏体染色:24小时造模大鼠脑组织切片均可见细胞形态异常与细胞丢失或尼氏体浅然消失等病理表现。7天、14天时,各组可见细胞数量或尼氏体数量增多,细胞形态逐渐恢复或尼氏体复现。联合组的细胞数量及形态改善较明显。
3.DCX/Brdu阳性细胞表达:24小时,脑缺血后可代偿性的产生内源性幼稚神经元。移植组与联合组可产生新生的幼稚神经元。7天时,各组新生幼稚神经元的表达均下降。补阳还五汤较模型组阳性细胞表达较多,具有统计学差异(p<0.05)。BMSCs组与联合组表达下降,但联合组的幼稚神经元表达较明显,具有统计学差异(p<0.05)。14天时,阳性细胞表达继续减少,与模型组比较,补阳还五汤组,BMSCs组与联合组阳性表达具有显著性差异(p<0.05)。其中联合组较BMSCs阳性细胞表达多,有明显差异(p<0.05)。
4.NeuN/Brdu阳性细胞表达:24小时,各组之间NeuN/Brdu阳性细胞数无明显差异(p>0.05)。7天时,造模各组成熟神经元表达均较前增多。补阳还五汤组较模型组阳性细胞表达多,具有统计学差异(p<0.05)。联合组较BMSCs组成熟神经元表达多。14天时,模型组成熟神经元较前减少,但BYHW汤组仍表达显著(p<0.05)。BMSCs组与联合组成熟神经元表达较前减少,联合组相较BMSCs组阳性细胞表达较多,具有统计学差异(p<0.05)。
结论:补阳还五汤、BMSCs移植与两者协同作用不同程度程度上促进了神经元再生。补阳还五汤既可以通过促进内源性神经元的增殖分化,也可以促进外源性BMSCs向神经元分化,从而使神经功能恢复,改善神经功能缺损症状。
方法:将90只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、移植组、联合组,除空白组外,其余各组制作大脑中动脉栓塞模型,分别给予不同方法BrdU标记及相应干预。分别于24小时、7天、14天(每组每个时间点6只大鼠)进行ZeaLonga神经功能缺损评分后,进行灌注取材。通过HE染色和尼氏体染色观察脑组织病理形态变化。取梗死区脑组织进行免疫荧光双染染色,测定DCX/Brdu与NeuN/Brdu阳性细胞的表达,进行统计分析。
结果:1.神经功能缺损评分:24小时,联合组神经功能缺损症状改善较显著,具有统计学意义(P<0.05)。7天时,与模型组相比,各组神经功能缺损症状均有明显的改善,其中联合组仍改善明显(P<0.05)。14天时,相较模型组,各组神经功能缺损改善明显,具有统计学意义(P<0.05)。其中联合组的症状改善最明显,其次为移植组,最后为中药组。
2.HE染色与尼氏体染色:24小时造模大鼠脑组织切片均可见细胞形态异常与细胞丢失或尼氏体浅然消失等病理表现。7天、14天时,各组可见细胞数量或尼氏体数量增多,细胞形态逐渐恢复或尼氏体复现。联合组的细胞数量及形态改善较明显。
3.DCX/Brdu阳性细胞表达:24小时,脑缺血后可代偿性的产生内源性幼稚神经元。移植组与联合组可产生新生的幼稚神经元。7天时,各组新生幼稚神经元的表达均下降。补阳还五汤较模型组阳性细胞表达较多,具有统计学差异(p<0.05)。BMSCs组与联合组表达下降,但联合组的幼稚神经元表达较明显,具有统计学差异(p<0.05)。14天时,阳性细胞表达继续减少,与模型组比较,补阳还五汤组,BMSCs组与联合组阳性表达具有显著性差异(p<0.05)。其中联合组较BMSCs阳性细胞表达多,有明显差异(p<0.05)。
4.NeuN/Brdu阳性细胞表达:24小时,各组之间NeuN/Brdu阳性细胞数无明显差异(p>0.05)。7天时,造模各组成熟神经元表达均较前增多。补阳还五汤组较模型组阳性细胞表达多,具有统计学差异(p<0.05)。联合组较BMSCs组成熟神经元表达多。14天时,模型组成熟神经元较前减少,但BYHW汤组仍表达显著(p<0.05)。BMSCs组与联合组成熟神经元表达较前减少,联合组相较BMSCs组阳性细胞表达较多,具有统计学差异(p<0.05)。
结论:补阳还五汤、BMSCs移植与两者协同作用不同程度程度上促进了神经元再生。补阳还五汤既可以通过促进内源性神经元的增殖分化,也可以促进外源性BMSCs向神经元分化,从而使神经功能恢复,改善神经功能缺损症状。