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目的：
优化蛋白芯片的制作条件，并探讨其在过敏性疾病诊断中的应用价值。
材料与方法：
(1)根据北京市顺义区中医医院皮肤科门诊、京煤集团总医院呼吸科门诊、首都医科大学附属北京复兴医院呼吸科门诊提供的591例表现为急性或慢性过敏症状，经皮肤点刺实验证实有一种或几种物质呈阳性反应的病例，统计得出引起过敏的主要食入性和吸入性物质分别为：海鱼、海虾、芝麻、海蟹、羊肉、牛奶、韭菜、鸡蛋、夏秋花粉、屋尘、粉尘螨、多价霉菌、猫狗毛、豚草花粉、床垫料、蒿属花粉。
(2)采用晶芯-48点样仪在不同的膜性载体上制备阳性对照、阴性对照、以及(1)中统计的过敏原为实验对象的6×4四种吸入性过敏原(屋尘、粉尘螨、豚草花粉、蒿属花粉)、6×5十种吸入性与食入性过敏原(屋尘、粉尘螨、豚草花粉、蒿属花粉、多价霉菌、猫狗毛、夏秋花粉、海蟹、牛奶、鸡蛋)联合检测蛋白芯片，并对制作条件进行优化。
(3)与德国“敏筛”过敏原检测系统进行诊断灵敏度、特异性等方面的比较。
结果：
(1)各种过敏原的点样浓度分别为：粉尘螨6.1g/L、屋尘1.6g/L、豚草花粉6.2g/L、蒿属花粉2.6g/L、多价霉菌0.78g/L、猫狗毛0.1g/L、夏秋花粉4.3 g/L、鸡蛋2.0g/L、牛奶g/L1.9、海蟹1.3g/L。
(2)最佳实验条件：以PVDF膜为载体，点样后4℃冰箱48h固定，2％～3％BSA室温封闭2h，TBST(pH7.4，含0.05％土温-20)洗3遍，3min/遍；加待检血清，室温孵育40min，洗涤同上；加生物素标记的抗人IgE(浓度为144 ng/ml)，室温孵育40min，洗涤同上；加连接有碱性磷酸酶的链酶亲和素，室温孵育20min，洗涤同上；加显色液BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸)，室温闭光孵育20min，观察结果。
(3)与“敏筛”过敏原检测系统比较：四种吸入性过敏原联合检测芯片总体诊断灵敏度为：88.60％；特异性：100％；诊断有效性：96.85％；总体符合率：83.31％。十种吸入性与食入性过敏原联合检测芯片总体诊断灵敏度为：82.84％；特异性：93.25％；诊断有效性：91.75％；总体符合率为80.11％。
结论：
(1)过敏性疾病检测蛋白芯片操作简单，成本低，血清用量少，同时检测多项指标，相互无干扰，是一种很有发展前景的过敏性疾病体外筛查的新方法。
(2)吸入性过敏原检测蛋白芯片特异性高于食物性过敏原检测蛋白芯片；食物性过敏原检测蛋白芯片灵敏性要高于吸入性过敏原检测蛋白芯片，但是否是假阳性还需要进一步的验证。