KDM2A调控miR-132-radixin途径影响宫颈癌细胞增殖和侵袭

• 作 者: 张喆超
• 机 构: 温州医科大学
• 出 处: 温州医科大学
• 发表日期: 2019年12期
• 关键词: 宫颈癌

目的：
　　赖氨酸特异性脱甲基酶2A（Lysine-specific demethylase2A，KDM2A）和microRNA-132（miR-132）在宫颈癌中表达异常可能与宫颈癌的发生发展相关。我们拟研究KDM2A和miR-132异常表达促进宫颈癌细胞增殖和侵袭的机制，为宫颈癌的诊断、治疗和预后提供新思路。
　　方法：
　　1.收集温州医科大学附属第一医院手术获得的81例HPV16阳性宫颈癌组织样本和癌旁正常宫颈组织样本，并收集患者的病理及预后数据。
　　2.通过实时荧光定量PCR技术检测肿瘤组织中KDM2A的表达量。
　　3.通过PicTar算法预测miR-132靶向作用基因。
　　4.构建含有radixin（RDX）基因3-UTR的荧光素酶报告载体，通过双荧光素酶报告实验验证miR-132靶向调节RDX基因。
　　5.通过实时荧光定量PCR技术检测RDX mRNA表达水平。
　　6.通过免疫印记western blot实验检测RDX蛋白表达水平。
　　7.通过CCK-8实验测定在Caski和C33A细胞中分别过表达miR-132和miR-132加RDX后宫颈癌细胞的增殖情况。
　　8.通过Transwell侵袭实验测定在CaSki和C33A细胞中分别过表达miR-132和miR-132加RDX后宫颈癌细胞的侵袭能力。
　　9.通过ChIP技术分析在RDX基因转录调节区域上H3K36me2，H3K36me1和KDM2A的结合情况。
　　结果:
　　1.宫颈癌组织中KDM2A的表达量相较于癌旁正常宫颈组织升高，并且KDM2A高表达的宫颈癌患者总生存率低于KDM2A低表达的宫颈癌患者。此外KDM2A高表达的宫颈癌患者有着更高的FIGO分期以及更高的淋巴结转移发生率。
　　2.miR-132能够靶向RDX的3-UTR进而抑制RDX的表达。
　　3.miR-132部分通过抑制RDX表达来抑制宫颈癌细胞的增殖和侵袭。
　　4.KDM2A可以调节RDX表达水平，但并非直接结合于RDX的启动子区域。
　　5.KDM2A通过miR-132依赖性的方式上调RDX表达，促进宫颈癌的增殖和侵袭。
　　结论：
　　我们的研究结果表明KDM2A通过调控miR-132-radixin途径促进宫颈癌细胞增殖和侵袭。