葛根素对氧自由基诱导的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞凋亡和Bcl-x/Bax表达的影响

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目的: 观察葛根素(puerarin)对氧自由基诱导的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞凋亡的保护作用及可能的机制。 方法: 将体外培养的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞随机分为对照组,氧自由基组和葛根素干预组,葛根素干预组又分为三个不同浓度剂量,各组分别加入0.5mmol/L,1.0mmol/L,3.0mmol/L葛根素作用12小时后,将自由基组和葛根素干预组加入次黄嘌呤(终浓度为0.1mmol/L)和黄嘌呤氧化酶溶液(终浓度为0.05 U/ml)。将培养板置放在二氧化碳孵箱内60min(5%CO2,37℃)建立调亡模型,24小时后用流式细胞术检测各组细胞的凋亡,免疫组化和RT-PCR法检测内皮细胞中Bcl-XL,Bax蛋白质及mRNA的表达。  结果: 氧自由基组与对照组相比细胞凋亡率明显增高,且差异有显著性;不同浓度的葛根素均可减少由氧自由基诱导的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性降低,与对照组相比差异均有显著性;各个浓度的葛根素干预组,Bcl-xL蛋白及mRNA的表达均较氧自由基组显著增加,并呈葛根素浓度依赖性升高,与氧自由基组比较差异有显著意义;氧自由基组Bax蛋白及mRNA的表达较对照组下降,差异有显著性,葛根素干预组与氧自由基组比较Bax蛋白及mRNA的表达改变很小,差异无显著性。  结论: 氧自由基可诱导耳蜗微血管内皮细胞凋亡,而葛根素可通过上调细胞凋亡抑制因子Bcl-xL的表达,从而抑制氧自由基诱导的耳蜗微血管内皮细胞的凋亡。
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