【摘 要】
：
目的：cN0期甲状腺乳头状癌只是临床概念，仍有相当数量的患者术后病理证实存在淋巴结转移。甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移率高而且有明显的区域转移倾向，文献报道首次治疗时即有60.9％的病人发生颈淋巴结转移[1]。已有的研究证实CyclinD1、c-Met过度表达在PTC发生发展过程中可能起着重要作用。本研究旨在验证N0期甲状腺乳头状癌(PTC)颈淋巴结转移相关的分子标志物。应用RT-PCR和FQ-PC
论文部分内容阅读
目的：cN0期甲状腺乳头状癌只是临床概念，仍有相当数量的患者术后病理证实存在淋巴结转移。甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移率高而且有明显的区域转移倾向，文献报道首次治疗时即有60.9％的病人发生颈淋巴结转移[1]。已有的研究证实CyclinD1、c-Met过度表达在PTC发生发展过程中可能起着重要作用。本研究旨在验证N0期甲状腺乳头状癌(PTC)颈淋巴结转移相关的分子标志物。应用RT-PCR和FQ-PCR法检测甲状腺肿瘤组织中的c-Met和CyclinD1mRNA表达量的高低与肿瘤的良恶性、年龄、性别和淋巴结转移是否相关，探讨甲状腺乳头状癌的发生机制，研究其基因的异常表达与临床病理学特征之间的关系，并为其早期分子诊断、临床手术和靶基因治疗提供客观依据。
方法：研究对象为66例甲状腺疾病患者，均无放化疗史，均行手术切除。设计实验的阳性对照组为36例甲状腺癌病人，其中经病理证实为淋巴结转移患者21例，无淋巴结鞘移者15例。阴性对照组为30例甲状腺良性病变及癌旁正常甲状腺组织。采集新鲜手术切除组织标本，液氮下研磨后，提取总RNA，经反转录，均以β-action为内参进行PCR及FQ-PCR扩增，经2％琼脂糖凝胶电泳检测β-action和目的基因CyclinD1、c-MetmRNA在阴性对照组和阳性对照组中的表达。比较CyclinD1和c-Met在良性对照组、无淋巴结转移组、有淋巴结转移组之间的表达状态，分析甲状腺良恶性病变、甲状腺乳头状癌间表达差异，比较甲状腺癌病人的年龄、性别、淋巴结有无转移与CyclinD1和c-Met表达的关系，并检测CyclinD1和c-Met在甲状腺乳头状癌中的表达有无相关关系。统计方法采用方差分析、t检验和相关分析。
结果：RT-PCR和FQ-PCR法相对定量检测随机选取的36例N0期甲状腺乳头状癌患者和30例甲状腺良性病变，甲状腺乳头状癌组中，术后切除标本病理检查有淋巴结转移者20例，其颈部淋巴结转移发生率为55.56％。术后切除的外科标本中有淋巴结转移组c-Met和CyclinD1的表达明显高于术后外科切除标本中未发现转移淋巴结组(P<0.05)，c-Met表达量在男性组高于女性组，小于45岁组高于大于等于45岁组，而CyclinD1的表达量在上述分组中无明显表达差异。良恶性对照组之间，c-Met的表达量恶性组明显高于良性对照组，而CyclinD1在两组间无明显差异。在恶性对照组中，c-Met和CyclinD1的表达无明显相关关系。
结论：应用RT-PCR和FQ-PCR法检测甲状腺肿瘤组织中的c-MetmRNA表达量的高低与肿瘤的良恶性、年龄、性别和淋巴结是否转移具有显著的意义。CyclinD1在良恶性对照组中表达无统计学意义，但是在甲状腺乳头状癌淋巴结有转移组表达量明显高于无转移组。以上提示c-Met、CyclinD1在转录水平的异常表达可能是甲状腺乳头状癌发生颈部淋巴结转移的早期分子事件。与常规病理检测甲状腺乳头状癌的包膜侵犯情况决定手术方式相比，能更早地预测肿瘤细胞的淋巴转移，而且具有更高的准确性。本研究结果初步表明CyclinD1和c-Met在转录水平的异常表达可能与甲状腺乳头状癌的微转移有较为密切的关系，可能有助于对甲状腺癌患者早期诊断和早期干预治疗，提高患者的生存质量。
其他文献
目的：研究轻度认知障碍(MCI)患者后扣带回、左额中回皮质、左枕叶皮质的氢质子磁共振波谱(1H-MRS)，并与阿尔茨海默病(AD)患者、正常老年对照者(NC)相同感兴趣区(ROD)的H1-MRS进行比较，以探讨MCI患者的1H—MRS特点，并评价1H-MRS在MCI诊断及鉴别诊断中的作用。方法：20名MCI患者、20名AD患者、20名NC在Philips Intera Achieva 3.0T超导
目的：观察羟苯磺酸钙(安多明)、前列腺素E1(PGE1，凯时)治疗不同病因引起的慢性肾功能不全的临床疗效。方法：40例慢性肾功能不全患者按用药的不同分为羟苯磺酸钙组、PGE1组、羟苯磺酸钙和PGE1组，各组再按照病因不同分为Ⅰ(慢性肾小球肾炎)、Ⅱ(慢性间质性肾炎)、Ⅲ(糖尿病肾脏疾病)三亚组。描述各组的相关指标，比较三组及亚组间治疗前后血尿素氮、肌酐水平变化。结果：单用羟苯磺酸钙组和联合应用羟苯
目的：探讨肿瘤抑制基因PTEN、P33ING1蛋白在宫颈癌中的表达及其与临床病理参数间的关系。方法：应用免疫组化技术(SP法)，分别检测20例慢性宫颈炎组织、16例宫颈上皮内瘤变(轻度+中度)即CIN(Ⅰ+Ⅱ)、22例宫颈原位癌及56例宫颈浸润癌组织PTEN、P33ING1两种肿瘤抑制基因蛋白表达，其中鳞癌49例和腺癌7例，实验结果用卡方检验进行统计学分析。结果：慢性宫颈炎组织中PTEN、P33I
目的：1.探讨胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)/硫化氢(hydrogensulfide,H2S)体系与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的关系及其可能机制。2.观察血红素氧合酶(hemeoxygenase-1，HO-1)抑制剂锌原卟啉-Ⅸ(Znpp-Ⅸ)对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠CBSmRNA表达及H2S含量的影响。方法：用出生7日龄的wistar大鼠制作缺氧缺
目的：研究中药制剂白术挥发油对人膀胱癌细胞T24的抑制作用和诱导凋亡作用，并初步探讨其作用机制，为临床治疗提供参考。方法：将不同浓度的白术挥发油作用于人T24膀胱癌细胞，采用四甲基偶氮盐(MTT)检测其在体外对T24细胞生长抑制作用和有效作用浓度；流式细胞仪(FCM)分析其诱导T24细胞凋亡；用荧光显微镜观察细胞凋亡形态；用透射电镜进一步观察t24细胞的凋亡形态。结果：MTT法测得白术油对T24细
目的:构建携带人GITR基因胞外段真核表达质粒pDisplay-hGITRaa1-165构建人hGITRaa1-165-IgG1 Fc段融合蛋白的真核表达载体hGITRaa1-165-IgG1 Fc/pcDNA3.1(+)，并在COS-7细胞中进行蛋白表达。方法:(1)以pGEMT-GITR质粒为模板，进行PCR反应，获得含人GITR胞外段的基因。目的基因经BglⅡ和PstⅠ双酶切，1％琼脂糖电泳
目的：分别采用杆状病毒昆虫表达系统和pDisplay表达质粒体外表达hGITRLaa52-177蛋白；建立BA-ELISA法，检测hGITRL蛋白。方法：(1)PCR扩增获得hGITRlAA52177基因，克隆入pFastBacHTa转移载体，在E．coli DH10Bac内通过转座子Tn7的介导，得到重组杆粒，通过脂质体将其转入Tn细胞，收获病毒并进行传代，将病毒感染Tn细胞表达目的蛋白。通过S
目的：探讨125I粒子组织间植入对小鼠Lewis肺癌Egr-1及caspase-3基因表达的影响。方法：将体外培养生长活跃的Lewis肺癌细胞接种于40只C57BL小鼠左腹股沟区皮下，建立小鼠Lewis肺癌模型。一周后成瘤，瘤径约直径5-7mm，随机分成2组，治疗组(n=20)在瘤体内植入两粒表面放射活性为9.25MBq的BT-125-I型125I籽源，对照组(n=20)植入两粒无放射活性的空心籽
目的：1.研究抑郁症患者额前皮质、前扣带回皮质、海马等感兴趣区(region of interest，ROI)N-乙酰天冬氨酸(NAA)，谷氨酸(Glu)，胆碱(Cho)以及肌醇(mI)等代谢化合物相对含量的改变。2.研究抗抑郁治疗对抑郁症患者感兴趣区内代谢化合物相对含量的影响。3.研究抑郁症患者感兴趣区代谢化合物相对含量与临床症状及疗效之间的相关性。方法：1.研究对象分为抑郁组和对照组，采用西门
目的：借助99mTC-DTPA肾动态功能显像所获取的肾小球滤过率(GFR)评价慢性肾脏病(CKD)患者采用MDRD国内改良方程与MDRD简化方程预测GFR的准确性和可行性，研究GFR估测值在不同病期与不同病因时的应用价值。材料和方法：选择慢性肾脏病患者149例，年龄均大于18岁，入选标准参照美国NFK-K/DOQI指南，且无肾功能急剧下降、水肿、胸水或腹水、肌肉萎缩、肢体缺如。记录性别、年龄、身高