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目的：肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis，RIF)是几乎所有类型慢性肾脏疾病发展到后期的共同的病理学特征。研究者一直在研究寻找抑制或延缓肾间质纤维化的有效药物。近来研究发现维生素D除维持钙和骨骼代谢的平衡外还具有广泛的生物学作用，包括：诱导细胞分化、抑制细胞生长、免疫调节和调控其它激素分泌系统等。国外研究显示维生素D可抑制人和动物的肾间质纤维化进程，但其作用机制尚不清楚。肾间质纤维化的发生发展涉及多种细胞因子的作用，近年肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在抑制纤维化病理过程中的重要作用受到越来越多的关注。本实验选择经典的肾间质纤维化模型-单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction，UUO)模型大鼠为研究对象，研究活性维生素D3抗肾间质纤维化的作用及对HGF、生长转化因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle acting，α-SMA)蛋白和基因水平表达的影响，探讨活性维生素D3抑制肾间质纤维化的作用和可能机制。
方法：40只清洁级6周龄雄性SD大鼠，建立单侧输尿管梗阻(UUO)模型，并分为五组(每组8只)：①UUO+1，25(OH)2D3治疗组：1，25(OH)2D3溶于无水乙醇中腹腔注射3ng/(100g·d)，每天给药1次，持续给药56天。②UUO空白对照组：仅行左侧输尿管结扎术。③UUO+贝那普利阳性对照组：盐酸贝那普利片溶于生理盐水灌胃0.17mg/(100g·d)，每天给药1次，持续给药56天。④假手术组+1，25(OH)2D3:1，25(OH)2D3溶于无水乙醇中腹腔注射3ng/(100g·d)，每天给药1次，持续给药56天。⑤假手术组。各组于术后1周开始给药，于术后第9周处死大鼠，取血标本测定血钙及血尿素氮、肌酐水平；取梗阻侧肾脏采用常规HE染色、免疫组化法和RT-PCR法观察肾间质纤维化程度以及HGF、TGF-β1和α-SMA表达的变化。
结果：
1实验大鼠肾脏病理改变HE染色结果显示假手术组肾小球、小管结构正常，小管周围肾间质无增宽。UUO空白对照组显示肾小管结构紊乱，小管细胞呈现不同程度的变性、萎缩及坏死、细胞间结构不紧密，小管周围肾间质增宽，肾小球结构基本正常。UUO+1，25(OH)2D3治疗组显示肾小管病理改变程度较UUO空白对照组明显减轻，肾小管变形、小管间质增宽不明显，肾小球基本结构正常。UUO+1，25(OH)2D3治疗组与UUO+贝那普利阳性对照组肾组织病理改变比较无明显差异。
2实验大鼠肾脏HGF、TGF-β1和α-SMA的表达(1)UUO+1，25(OH)2D3治疗组大鼠肾间质中HGF阳性细胞表达增多，与假手术组相比有统计学意义(P＜0.01)；与UUO空白对照组相比，HGF蛋白表达明显(P＜0.001)；与UUO+贝那普利阳性对照组相比，HGF阳性细胞表达无统计学差异(P＞0.05)。
(2)UUO+1，25(OH)2D3治疗组与UUO空白对照组相比TGF-β1表达下调有统计学意义(P＜0.001)；与UUO+贝那普利阳性对照组比较TGF-β1表达无明显差异(P＞0.05)。 (3)UUO+1,25(OH)2D3治疗组与UUO空白对照组相比α-SMA表达明显减少(P＜0.01)；与UUO+贝那普利阳性对照组比较α-SMA表达无明显差异(P＞0.05)。
3实验大鼠肾脏HGF和TGF-β1 mRNA水平表达(1)HGF：UUO+1，25(OH)2D3治疗组HGF呈高表达，与假手术组相比有显著性差异(P＜0.05)。UUO空白对照组HGF表达明显减少，与UUO+1，25(OH)2D3治疗组比较有统计学差异(P＜0.01)。UUO+贝那普利阳性对照组与UUO+1，25(OH)2D3治疗组比较HGF表达无统计学差异(P＞0.05)。
(2)TGF-β1：UUO空白对照组TGF-β1表达呈高表达，与假手组比较有显著性差异(P＜0.01)。UUO+1，25(OH)2D3治疗组和UUO+贝那普利阳性对照组TGF-β1表达明显减少，两组与UUO空白对照组相比有统计学差异(P＜0.01)。UUO+1，25(OH)2D3治疗组与UUO+贝那普利阳性对照组TGF-β1表达无差异(P＞0.05)。
4实验大鼠血生化检测各组大鼠血钙浓度无统计学差异(P＞0.05)。UUO空白对照组血尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平升高，与假手术组相比有统计学差异(P＜0.05)。1,25(OH)2D3治疗组和UUO+贝那普利阳性对照组BUN和Scr水平与UUO空白对照组相比下降明显(P＜0.05)。
结论：
1.UUO模型加1,25(OH)2D3治疗组大鼠肾脏纤维化病理改变不明显，肾小球及肾小管结构基本正常，实验动物肾功能基本保持正常。表明1，25(OH)2D3具有抑制大鼠肾间质纤维化的作用。
2.1，25(OH)2D3可以促进纤维化肾组织HGF基因表达和蛋白分泌，同时可以直接或间接地抑制肾组织中TGF-β1的基因表达和蛋白分泌。
3.1，25(OH)2D3可以抑制肌成纤维细胞的活化，从而抑制小管上皮细胞的表型转化。
4 实验中所应用1，25(OH)2D3的剂量对动物血钙水平无明显影响，未见明显副作用，显示采用适当剂量1，25(OH)2D3用于抑制肾间质纤维化作用是安全的。
本实验结果提示1，25(OH)2D3具有成为临床治疗肾间质纤维化辅助药物的潜在应用前景。