【摘 要】
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Retromer复合体主要负责跨膜蛋白从内涵体(endosome)到反式高尔基体(Trans-Golgi Network,TGN)的逆向运输。Retromer复合体主要由两大亚基构成,包括一个负责膜结合和膜变形的
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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Retromer复合体主要负责跨膜蛋白从内涵体(endosome)到反式高尔基体(Trans-Golgi Network,TGN)的逆向运输。Retromer复合体主要由两大亚基构成,包括一个负责膜结合和膜变形的SNX二聚体,和一个负责货物选择识别的Vps26-Vps29-Vps35三聚体。SNX家族成员参与胞内蛋白的分选和运输。前人研究表明SNX1和SNX2是retromer的组分,SNX5和SNX6为候选组分。而负责货物选择识别的retromer复合体和负责逆向运输的动力蛋白dynein/dynactin复合体之间关联建立的机制尚不清楚。此外,SNX家族成员都拥有PX结构域,负责结合不同类型的磷酸肌醇(PIPs)；不同类型的磷酸肌醇分布于不同的细胞器上,已有研究提示磷酸肌醇可能参与调控膜转运的目的性和精确性。货物到达终点时从动力蛋白上卸载的机制仍然是个谜。
我们的研究表明,货物从内涵体到反式高尔基体的转运过程依赖于完好的胞内逆向运输系统。同时,免疫共沉淀实验结果显示SNX6不仅能够结合retromer的已知组分SNX1/2,并且和dynactin复合体的最大亚基p150Glued相互作用。进一步的研究表明,retromer的组分SNX6作为转运囊泡膜表面的蛋白因子,发挥衔接蛋白的功能,能够募集动力蛋白到retromer相联的囊泡上从而介导囊泡的转运。在此过程中,SNX6在膜上的定位对于其正常发挥衔接蛋白功能是非常重要的。
我们对货物卸载机制进行了初步探讨,活细胞成像结果显示SNX1/6相关的囊泡和受体膜(亦即反式高尔基体)之间有短暂的接触,并且反式高尔基体膜中磷酸肌醇PI4P的浓度参与调控retromer和动力蛋白两大复合体之间的亲和性。这些结果为进一步揭示货物卸载的机制奠定了实验基础。
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