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目的:检测异基因造血干细胞移植后100天内NK细胞嵌合率的动态变化及重建后亚群和表面受体表达差异,分析并发现急性移植物抗宿主病发生的敏感指标,为评估及改善移植后患者预后提供线索。
方法:采取病例对照研究,选择2016年7月至2018年9月在宁波市第一医院接受外周血异基因造血干细胞移植的57名病人,在移植后14天、30天、60天、90天采集外周血或骨髓送检,使用短串联重复序列聚合酶链反应检测NK细胞嵌合率;采用流式细胞术检测NK亚群及受体表达数据,根据是否发生aGVHD分组并对相关结果进行统计分析。
结果:57例病人中恶性血液系统疾病患者(急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、骨髓瘤)48例,非恶性血液病患者(阵发性睡眠性血红蛋白尿、再生障碍性贫血)9例;男性33例,女性24例;中位年龄40岁(15岁-68岁);接受全相合allo-HSCT病例28例,其中亲缘全相合22例,非亲缘全相合6例,半相合allo-HSCT病例29例;其中供受者血型相同者35例,22例血型不同。57例患者中26例发生aGVHD(45.61%),31例未发生aGVHD(54.39%),分别纳入aGVHD组和non-aGVHD组。分析NK细胞4个时间点嵌合率发现NK细胞植入较早,大部分在移植后14天达到完全供者型嵌合。aGVHD组与non-aGVHD组NK细胞嵌合率在移植后14天、30天、60天、90天均无统计学差异,P>0.05。移植后30天不成熟的NK细胞亚群CD56bright亚群及NKG2A+NK细胞亚群比例最高,NKG2D表达最弱,在移植后90天,CD56dimNK亚群及NKG2A-NK亚群比例最高,NKG2D表达最强。aGVHD组CD56dimNK细胞亚群及NKG2A-NK细胞亚群在移植后30天比例皆低于non-aGVHD组,P<0.05,该时间点CD56dim/CD56brigh值≤0.2组与CD56dim/CD56brigh值>0.2组及NKG2A-/NKG2A+值≤0.35组与NKG2A-/NKG2A+值>0.35组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05。aGVHD组NKG2D受体表达在移植后14天及30天均低于non-aGVHD组,P<0.05,且移植后14天NKG2D的MFI值≤1900组与MFI值>1900组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05;移植后30天NKG2D的MFI值≤1800组与MFI值>1800组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05。
结论:Allo-HSCT后NK细胞亚群及受体重建过程具有一定规律。NK细胞CD56dim亚群及NKG2A-亚群及NKG2D受体参与aGVHD的发生,可辅助预测aGVHD的发生,并指导治疗。
方法:采取病例对照研究,选择2016年7月至2018年9月在宁波市第一医院接受外周血异基因造血干细胞移植的57名病人,在移植后14天、30天、60天、90天采集外周血或骨髓送检,使用短串联重复序列聚合酶链反应检测NK细胞嵌合率;采用流式细胞术检测NK亚群及受体表达数据,根据是否发生aGVHD分组并对相关结果进行统计分析。
结果:57例病人中恶性血液系统疾病患者(急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、骨髓瘤)48例,非恶性血液病患者(阵发性睡眠性血红蛋白尿、再生障碍性贫血)9例;男性33例,女性24例;中位年龄40岁(15岁-68岁);接受全相合allo-HSCT病例28例,其中亲缘全相合22例,非亲缘全相合6例,半相合allo-HSCT病例29例;其中供受者血型相同者35例,22例血型不同。57例患者中26例发生aGVHD(45.61%),31例未发生aGVHD(54.39%),分别纳入aGVHD组和non-aGVHD组。分析NK细胞4个时间点嵌合率发现NK细胞植入较早,大部分在移植后14天达到完全供者型嵌合。aGVHD组与non-aGVHD组NK细胞嵌合率在移植后14天、30天、60天、90天均无统计学差异,P>0.05。移植后30天不成熟的NK细胞亚群CD56bright亚群及NKG2A+NK细胞亚群比例最高,NKG2D表达最弱,在移植后90天,CD56dimNK亚群及NKG2A-NK亚群比例最高,NKG2D表达最强。aGVHD组CD56dimNK细胞亚群及NKG2A-NK细胞亚群在移植后30天比例皆低于non-aGVHD组,P<0.05,该时间点CD56dim/CD56brigh值≤0.2组与CD56dim/CD56brigh值>0.2组及NKG2A-/NKG2A+值≤0.35组与NKG2A-/NKG2A+值>0.35组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05。aGVHD组NKG2D受体表达在移植后14天及30天均低于non-aGVHD组,P<0.05,且移植后14天NKG2D的MFI值≤1900组与MFI值>1900组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05;移植后30天NKG2D的MFI值≤1800组与MFI值>1800组患者发生aGVHD情况存在统计学差异,P<0.05。
结论:Allo-HSCT后NK细胞亚群及受体重建过程具有一定规律。NK细胞CD56dim亚群及NKG2A-亚群及NKG2D受体参与aGVHD的发生,可辅助预测aGVHD的发生,并指导治疗。