【摘 要】
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目的:研究骨碎补总黄酮在TNF-α介导的炎症环境下对成骨细胞增殖、凋亡及Bcl-2、Bax、Fas、RANKL、OPG基因表达的影响,从而探讨其防治类风湿关节炎骨破坏及骨质疏松症的作用
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目的:研究骨碎补总黄酮在TNF-α介导的炎症环境下对成骨细胞增殖、凋亡及Bcl-2、Bax、Fas、RANKL、OPG基因表达的影响,从而探讨其防治类风湿关节炎骨破坏及骨质疏松症的作用机理。
方法:选择新生的Wister乳鼠颅盖骨,应用改良的胰酶-Ⅰ型胶原酶消化法分离成骨细胞,采用细胞形态学、碱性磷酸酶染色、茜素红钙结节染色法给予鉴定。应用血清药理学方法探讨骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下对成骨细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响。实验分为四组:空白对照血清组(灌蒸馏水),骨碎补总黄酮含药血清组(灌强骨胶囊),空白对照血清+TNF-α组,骨碎补总黄酮含药血清+TNF-α组。应用四唑蓝比色法(MTT法)测定成骨细胞的增殖,流式细胞仪测定成骨细胞的凋亡率,Realtime-PCR测定Bcl-2、Bax、Fas、RANKL、OPG的基因表达。
结果:与对照血清相比骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下同样能够促进成骨细胞增殖。与对照血清相比骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下能够减少成骨细胞的凋亡率。与对照血清相比骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下使得Fas基因表达减少,Bcl-2/Bax基因表达增加,RANKL/OPG基因表达减少。
结论:骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下能够促进成骨细胞增殖,减少成骨细胞凋亡率,可能是通过使得Fas基因表达减少,Bel-2/Bax基因表达增加来实现的;同时还能使RANKL/OPG基因表达减少,间接反映激活的破骨细胞数目及活性减少,骨破坏也就相应的减少;以上这可能是骨碎补总黄酮防治类风湿关节炎骨破坏及骨质疏松症的作用机理之一。
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