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目的 本研究课题应用mRNA原位杂交法,测定脓毒症时期体内各重要脏器Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及肿瘤坏死因子-a (Tumor necrosis factor-a,TNF-a)表达.以及脓毒症时肝脏细胞凋亡情况测定.方法 1.建立动物模型及分组：72只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脓毒症组及脓毒性休克组,每组8只；脓毒症组腹腔注射10 mg/kg内毒素(lipopolysaccharide,LPS)、脓毒性休克组腹腔注射12mg/kg内毒素建立大鼠模型；正常对照组腹腔注射12mg/kg生理盐水.2.各组大鼠在相应时间点处死,采集肝脏组织标本；标本制作石蜡切片,并设计原位杂交探针序列,进行mRNA原位杂交检测；TUNEL(原位末端转移酶标记技术)法测定细胞凋亡；结果进行定量分析,并做数据统计.结果 1.mRNA原位杂交检测TLR4在脓毒症及脓毒症休克组大鼠肝脏表达随时间升高成上升趋势,单个时间均明显高于对照组(P＜0.05)；脓毒症组对应时间与脓毒性休克组比较,差异具有显著性(P＜0.05).TNF-a在肝脏的表达随时间升高成上升趋势,脓毒症组及脓毒性休克组单个时间组分别与对照组比较,均明显高于对照组(P＜0.05)；相同时间脓毒症组与脓毒性休克组比较,差异具有显著性(P＜0.05)；2.脓毒症组及脓毒性休克组肝脏细胞亡率较对照组明显升高,差异具有显著性(P＜0.05),脓毒症及脓毒性休克组之间相同时间对比,差异具有显著性(P＜0.05).结论 1、TLR4在脓毒症及脓毒性休克大鼠肝脏组织表达在LPS攻击大鼠后1h、6h、24h随时间程上升趋势,且每个时段脓毒症组、脓毒性休克组TLR4表达高于对照组,脓毒性休克组TLR4表达高于脓毒症组,差异有显著性；2、 TNF-a在脓毒症及脓毒性休克大鼠肝脏组织表达在LPS攻击大鼠后1h、6h、24h随时间程上升趋势,且每个时段脓毒症组、脓毒性休克组TNF-a表达高于对照组,脓毒性休克组TNF-a表达高于脓毒症组,差异有显著性；3、脓毒症及脓毒性休克大鼠肝脏组织细胞凋亡情况随时间呈上升趋势,且每个时段脓毒症组、脓毒性休克组细胞凋亡情况高于对照组,脓毒性休克组细胞凋亡情况高于脓毒症组,差异有显著性.由于TLR4及TNF-a的高表达,尤其在脓毒性休克大鼠的高表达,进一步证实由于LPS导致机体通过TLR4介导产生TNF-a等炎症因子的过度释放,产生炎症因子的瀑布反应,引起重要脏器组织细胞凋亡,对机体造成严重影响.可能通过阻断TLR4的表达,能够抑制脓毒症大鼠炎症因子的大量释放,对减轻对机体各重要脏器的损害是有益的.