环境中典型多环芳烃对CD4+T细胞及其亚型的免疫调控研究

• 作 者: 魏云波 吕翠 侯召华 冯金红 韩婷婷 薛安琪 余迪
• 机 构: 山东省科学院环境与健康免疫研究室 澳大利亚Monash大学分子免疫调控研究室
• 出 处: 中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
• 发表日期: 2015年9期
• 关键词: 多环芳烃 CD4+T细胞 免疫调控 AhR AhR-KO小鼠

　　[目的]选取重要环境污染物16种多环芳烃(萘、蒽、菲、芘、芴、屈、苊、苊烯、荧蒽、苯并[a]芘、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、二苯并[a,h]蒽、茚并[1,2,3-cd]芘、苯并[ghi]花),研究其对CD4+T细胞体外增殖与分化的免疫调控及信号作用通路,为建立基于免疫学指标的环境污染物毒性评估体系奠定基础。[材料和方法]分离野生型C57/BL6小鼠外周淋巴结,获取淋巴细胞,通过多色流式细胞分选得到CD4+ na(i)ve T细胞,在最适体外培养体系下模拟T细胞活化(anti-CD3、anti-CD28预先包被平板),分别加入不同浓度梯度(10nM,100nM,1uM,10uM,100uM)的16种多环芳烃,3d后加入3H标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)继续培养18h,冻融后使用液闪计数仪通过3H-TdR掺入率测定多环芳烃对T细胞增殖的影响。将筛选后对细胞增殖无影响浓度的多环芳烃分别加入体外定向分化(Th1,Th17、Treg)的CD4+ na(i)ve T细胞,4-5d后,流式检测多环芳烃对Th1 (IFN-g)、Th 17 (IL-17a)、Treg (Foxp3)三种亚型的影响。获取芳香烃受体敲除(aryl hydrocarbon Receptor knockout,AhR-KO)小鼠淋巴细胞重复上述实验,验证多环芳烃通过AhR通路进行免疫调控,并探讨其调控机制。[结果]16种多环芳烃对CD4+ T细胞体外增殖无影响的浓度多为100nM-1uM,在CD4+ na(i)ve T细胞体外定向分化实验中,所选取的对细胞增殖无影响浓度的苊烯、荧蒽、苯并[a]芘、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、二苯并[a,h]蒽、茚并[1,2,3-cd]芘、苯并[ghi]苝均可显著促进Th17分化,对Th1分化也有促进作用,苯并[a]芘、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽对Treg分化有较为明显的抑制作用,而萘、蒽、菲、芘、芴、屈、苊对Th1、Th17、Treg定向分化无显著影响,推测不同多环芳烃的毒性及作用机制存在差异。来源于AhR-KO小鼠的CD4+ na(i)veT细胞体外定向分化实验中,原本有调控作用的多环芳烃均对Th1、Th17、Treg的分化无显著影响。[结论]针对在维持人体健康和免疫平衡中起核心调控作用的CD4+T细胞,多环芳烃可通过AhR通路对CD4+T细胞的增殖和分化有不同程度的影响和调控,但不同多环芳烃的毒性及作用机制存在差异。今后将继续进行环境污染物的免疫调控机制研究,筛选环境污染物毒性评估的有效免疫学指标。