【摘 要】
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目的 观察瓜子金皂苷己对MPP+诱导的PC12细胞损伤的影响,并且探讨其保护作用机理.方法 采用MTT法检测细胞存活率,Annexin Ⅴ/PI染色流式细胞术(FCM)检测PC12细胞凋亡,JC-
【机 构】
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中国医学科学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室,北京100050
【出 处】
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第十六届全国神经精神药理学学术会议
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目的 观察瓜子金皂苷己对MPP+诱导的PC12细胞损伤的影响,并且探讨其保护作用机理.方法 采用MTT法检测细胞存活率,Annexin Ⅴ/PI染色流式细胞术(FCM)检测PC12细胞凋亡,JC-1染色检测细胞线粒体膜电位,Western blotting检测蛋白的水平.结果 MPP+500μmol作用PC12细胞48 h,细胞存活率降至60%左右(P<0.001),细胞凋亡率由空白组的2.68%增加到54.81%,有(76.71±4.31)%细胞线粒体膜电位降低;在正常细胞中没有活性胱天蛋白酶3的表达,经MPP+损伤后胱天蛋白酶3的表达显著升高;给予瓜子金皂苷己0.10,1.00和10.00 μmol· L-1处理,PC12细胞存活率显著增加,其中1.00和10.00μmol· L-1浓度组与MPP+处理组比较有显著性差异(P<0.01);瓜子金皂苷己0.10,1.00和10.00 μmol· L-1组早期凋亡率分别为39.04%,33.43%和29.73%,呈剂量依赖性降低,从而使活细胞比例增加;线粒体膜电位降低分别为(55.19±2.84)%,(36.75±1.47)%和(23.61±2.23)%,表明瓜子金皂苷己能浓度依赖性的抑制MPP+损伤线粒体膜电位的降低;同时活性胱天蛋白酶3蛋白水平降低(P<0.01).结论 瓜子金皂苷己能够对抗MPp+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,降低胱天蛋白酶3表达有关.
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