【摘 要】
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[目的]利用生物"组学"和生物信息学技术手段,研究重离子辐射致细胞损伤与应答调控的蛋白表达谱,建立辐射损伤反应的定量描述数据库. [材料与方法]采用正常鼠胚胎成纤维细胞(MEF),给予碳离子照射,分组如下：对照组、0.5Gy坪区照射组、2Gy坪区照射组、2Gy峰区照射组.坪区：LET∶12.6keV/um,300MeV/n；峰区：LET∶ 25.4 keV/um,100 MeV/n.照射后4h收集
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市放射生物学重点实验室,北京100850 军事医学科学院放射
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]利用生物"组学"和生物信息学技术手段,研究重离子辐射致细胞损伤与应答调控的蛋白表达谱,建立辐射损伤反应的定量描述数据库. [材料与方法]采用正常鼠胚胎成纤维细胞(MEF),给予碳离子照射,分组如下：对照组、0.5Gy坪区照射组、2Gy坪区照射组、2Gy峰区照射组.坪区：LET∶12.6keV/um,300MeV/n；峰区：LET∶ 25.4 keV/um,100 MeV/n.照射后4h收集细胞,提取MEF细胞总蛋白,iTRAQ多重化学标记LC-MS质谱分析；免疫印迹杂交(Western blot)验证蛋白表达.[结果](1)不同的数据库(GO分析,KEGG分析,MIPS分析,BIOCARTA分析,PID分析,REACTOME分析)分析显示碳离子辐照后差异较显著的蛋白与以下几种通路有关：蛋白酶体通路；mRNA加工；DNA损伤；mRNA拼接和细胞分裂.基于文献和网络分析,确定了一些来自蛋白酶体、细胞周期、DNA损伤、泛素连接酶结合途径、RNA剪接、RNA代谢中的蛋白质形成相互紧密联系的网络,并且受碳离子辐照的影响而导致广泛集中.(2)网络分析差异表达的蛋白结果显示：细胞对低剂量辐照网络分析较复杂,随着辐照剂量的增加,基因的表达显著降低,网络分析图也相对简单,由此推断,高剂量的2Gy坪区和2Gy峰区已经超过细胞耐受阈值,可能产生更多潜在的致死性双链断裂,损伤不可逆转.而低剂量(0.5 Gy)辐射诱发的一些基因表达调控网络的变化,对辐照反应可能有保护作用.(3)碳离子辐照4h后,γ-H2AX蛋白表达随剂量增加表达增加的趋势,与数据库分析方法检测的相一致.[结论]通过碳离子辐照正常鼠胚胎成纤维细胞,分析其蛋白表达谱,建立了空间辐射的生物损伤反应的定量描述数据库.
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